蜂蜜构对 [蜂毒素基因的突变与表达及其构效关系研究]

　　摘要：为获得保留有抗菌活性而降低溶血活性作用的蜂毒素，对其分子结构进行了改造。其中一条序列缺失Lys・7，另一条缺失Ieu・9。用PCR技术获得两条新的蜂毒素基因，将其克隆到酵母表达载体pPICzα-A，获得重组质粒pPICZα―A-Me1 1和pPICZα-A-Me1 2。将2个重组质粒分别转化毕赤酵母菌CSll5。筛选获得重组酵母菌。对重组酵母菌培养条件进行优化，在YEPD中含甘油2％，pH为7，重组酵母菌培养48 h后，0.5％的甲醇诱导72h，表达目的蛋白通过Tricion-SDS-PAGE确定分子质量为5．4 kD。杀菌效价分别达0．947、1．085。结果表明两条蜂毒素基因成功的在毕赤酵母中表达，经突变后表达的蜂毒素降低了溶血活性，同时保留了抗菌活性。
　　关键词：蜂毒素；毕赤酵母；培养条件；抗菌活性；溶血活性
　　中图分类号：Q786
　　文献标识码：A
　　文章编号：1007-7847(2006)04-0313-07 本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文