两种粤产粉孢牛肝菌抗氧化活性:网孢牛肝菌
研究两种产自广东的粉孢牛肝菌（Tylopilus）——类铅紫粉孢牛肝菌(T. plumbeoviolaceoides)和花盖粉孢牛肝菌 (GDGM27210)的子实体水提液和75%乙醇提取液的体外抗氧化活性。结果表明，在实验浓度范围内，两种牛肝菌的子实体水提液和75%乙醇提液有不同程度的抑制亚油酸自氧化和清除自由基DPPH?、 羟自由基?OH的作用。其中水提液对抑制亚油酸自氧化作用效果较好，最大抑制率分别可达95.74%和 92.79%；而75%乙醇提取液对清除DPPH?效果较好，最大清除率分别可达86.68%和94.03%。
牛肝菌； 抗氧化活性； 自由基
人体生理代谢过程都伴有氧自由基的生成，它与人体健康密切相关，许多疾病如心血管病、肺病、肝脏疾病、癌症、皮肤及眼睛疾病等都与产生大量的自由基干扰人体生理代谢活动，使免疫力下降有关［1］。因此，直接或间接抑制自由基的产生或清除自由基的研究具有重要意义。
许多大型真菌具有清除氧自由基和抗氧化的作用［2,3］。牛肝菌含有多种丰富的氨基酸、维生素、矿质元素、碳水化合物、蛋白质、活性多糖等物质［4-6］，同时有些种类已被证明多糖类和总酚类成分是其主要的抗氧化活性物质［7-9］。
前期研究中发现了2种广东省特有的野生牛肝菌，一种是类铅紫粉孢牛肝菌(Tylopilus plumbeoviolaceoides)［10］，另一种是新发现有待正式发表命名的花盖粉孢牛肝菌GDGM27210。笔者对其子实体水提液和75%乙醇提取液进行抗氧化生物活性研究，希望为其开发利用提供参考。
1 材料与方法
1.1材料
类铅紫粉孢牛肝菌（T. plumbeoviolaceoides）(A)和花盖粉孢牛肝菌（GDGM27210）（B）的野生子实体，留样标本号分别为：GDGM20311和GDGM27210，标本保存于广东省微生物真菌标本馆内，均由广东省微生物研究所真菌资源研究组采集并鉴定。将子实体清理干净后，60 ℃干燥，粉碎后过60目筛得样品粉末。
1.2水提液和75%乙醇提取液的制备
A和B的子实体水提液和75%乙醇提取液的制备方法同参考文献［11］。
1.3自由基DPPH?清除试验
试验方法同参考文献［11］，设3次重复，每个重复测3次。
1.4羟自由基?OH清除试验
采用邻二氮菲 -Fe2+-H 2O 2法清除羟自由基，方法同参考文献［12］，稍有改动，即采用 1 mmol/L的邻二氮菲溶液，在510 nm处测定；设3次重复，每个重复测3次。
1.5抗脂质过氧化试验
采用硫氰酸铁法测定脂质过氧化程度，方法同参考文献［11］，设3次重复，每个重复测3次。
2 结果与分析
2.1水提液的抗氧化活性
水提液的抗氧化结果见表1～3。当两样品浓度达到10 mg/mL时，对DPPH?清除率分别可达89.70%和96.24%；由IC 50值可知，样品B的水提液对DPPH?的清除作用较样品A强。样品A的水提液对?OH的清除作用以及对亚油酸自氧化抑制作用比样品B强。
2.275%乙醇提取液的抗氧化活性
75%乙醇提取液活性见表4～6。按IC 50值显示，样品B对DPPH?的清除作用强于样品A，样品A对?OH的清除作用以及对亚油酸自氧化的抑制作用强于样品B。
张 明，等：两种粤产粉孢牛肝菌抗氧化活性
表1 水提液对DPPH?的清除率
Table 1 DPPH? radical scavenging activity of aqueous extracts of two Tylopilus strains
样品
Sample浓度 Concentration (mg/mL）
0.51.02.04.06.08.010.0 IC 50
（mg/mL）
A38.10±0.4247.18±0.2788.48±0.3188.26±0.6588.59±0.3288.37±0.2789.70±1.180.65
B55.60±0.1780.18±2.1677.96±1.1080.73±1.2494.91±1.0396.46±0.3296.24±1.720.39
数据（百分数）为3次试验平均值±标准误
Values are expressed as percentages and represent the means of three replicates±SD
A: T. plumbeoviolaceoides; B: Tylophilus, strain GDGM27210
表2 水提液对?OH的清除率
Table 2 ?OH radical scavenging activity of aqueous extracts of two Tylopilus strains
样品
Sample浓度 Concentration (mg/mL）
0.10.20.40.60.81.0 IC 50
（mg/mL）
A12.56±2.4623.67±1.8152.66±5.2771.01±6.6084.54±5.4784.54±2.980.35
B8.22±2.9814.97±1.3232.85±1.8143.48±2.0547.83±2.3653.14±1.810.83
表注同表1 Values as in Table 1
表3 水提液对亚油酸自氧化的抑制率
Table 3 Inhibition of linoleic acid peroxidation by aqueous extracts of two Tylopilus strains