四种检测法在乙腈沉淀法去除血清蛋白中的比较 志贺菌四种血清型

　　[摘要] 目的 比较四种方法在乙腈沉淀法去除血清蛋白中的检测效果，建立一种能快速检测去蛋白率的方法。 方法 用乙腈沉淀法去除血清蛋白，分别应用四种不同的检测分析方法，方法Ⅰ通过真空冻干；方法Ⅱ通过真空干燥；方法Ⅲ通过设立对照调零；方法Ⅳ通过挥干乙腈，分析血清蛋白的去除率。 结果 方法Ⅰ和方法Ⅱ耗时长、设备要求高；方法Ⅲ耗时最短、方法简便；方法Ⅳ耗时较短、但容易产生实验误差，方法Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的蛋白去除率结果比较，差异无统计学意义（P > 0.05），与方法Ⅳ比较，差异有统计学意义（P 0.05) compared with method Ⅳ, which had statistically significant difference (P < 0.05). Conclusion Method Ⅲ is the best analysis of measurement and analysis method, and can be used to understand the removal quickly and easily.
　　[Key words] Acetonitrile precipitation; Serum proteins; Protein removal rate
　　研究表明血清中有20多种高丰度蛋白质，占血清总蛋白的80%以上，而对疾病诊断有密切关系的蛋白含量甚微[1]。在检测过程中血清高丰度蛋白质不仅会掩盖许多重要低丰度蛋白质，还会相对减小低丰度蛋白质的上样量，使得低丰度蛋白质的难分离纯化[2]。在进行蛋白组研究中，对血清样本进行预处理，去除血清中的高分子量、高丰度蛋白质，排除它们对低丰度蛋白质的掩盖作用，促进低丰度蛋白质的检出很有必要。目前常用的去蛋白技术有蛋白质沉淀法、亲和技术、色谱技术等[3]。蛋白质沉淀法是一种快速蛋白质去除方法，乙腈沉淀法能去除血清中高丰度蛋白, 是一种简便、经济、有效的前期处理方法[4]。快速检测出乙腈的去蛋白率在研究中显得十分必要，本研究旨在探索一种新的快速的检测方法检测其去蛋白率。
　　1 材料与方法
　　1.1 材料
　　血清标本来源于GIBCO 公司生产的小牛血清；乙腈（ACN）为美国sigma公司生产；吸光度检测仪为ND-1000分光光度计；Block Heaters GL-50为海门市其林贝尔仪器有限公司生产；高速冷冻离心机为Eppendorf公司产品；真空冷冻冻干系统为美国Themo公司产品。
　　1.2 方法
　　从-80℃取出血清于4℃条件下解冻，解冻后，用超纯水稀释成5倍和25倍共3个待测血清样本。每个样品进行4次平行试验，每个待测浓度按四种分析方法进行分析检测，分别计算每种分析方法的去蛋白率。见表1。