马氏珠母贝 插核手术对马氏珠母贝各部位氨基酸的影响

　　摘要：利用氨基酸自动分析仪，比较分析马氏珠母贝插核贝和未插核贝外套膜、内脏团和闭壳肌的蛋白氨基酸组成含量。结果表明，①未插核贝外套膜、闭壳肌和内脏团氨基酸总含量（质量分数，干样）分别为（１３．０１±０．０２）％、（１０．８７±０．０６）％、（１０．４１±０．１３）％，插核贝分别为（１１．３１±０．０１）％、（１４．７８±０．１０）％和（１０．２６±０．０９）％；②各部位中Ａｓｐ、Ｇｌｕ和Ｇｌｙ含量高于其他氨基酸。外套膜各氨基酸含量，除Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、Ｔｙｒ和Ｐｈｅ无显著变化外，未插核贝Ｔｈｒ、Ｖａｌ和Ｃｙｓ低于插核贝，其余氨基酸高于插核贝，且存在显著性差异。闭壳肌中，除Ｃｙｓ和Ｐｒｏ基本无变化外，未插核贝各氨基酸含量均低于插核后，差异显著（Ｐ＜０．０５）。而内脏团中，除Ｇｌｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ和Ｌｙｓ未插核贝高于插核贝，Ｇｌｙ和Ａｌａ低于插核贝，且存在显著性差异（Ｐ＜０．０５）外，其余氨基酸插核贝和未插核贝均差异不显著（Ｐ＞０．０５）。
　　关键词：马氏珠母贝；插核；外套膜；内脏；闭壳肌；氨基酸
　　中图分类号：Ｑ１７６文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）10－2081-03
　　
　　Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｂｅａｄ Ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ ｏｎ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄ ｉｎ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ Ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ Ｐｉｎｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ
　　
　　ＭＡ Ｘｉａｏ－ｔｉａｎ１ａ，ＢＡＩ Ｙａｎｇ１ａ，ＬＩＵ Ｊｕａｎ－ｈｕａ１ａ，ＭＩＡＯ Ｄｏｎｇ－ｌｉａｎｇ１ａ，ＪＩ Ｌｉ－ｌｉ２，ＳＯＮＧ Ｗｅｎ－ｄｏｎｇ１ｂ
　　（１ａ．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ； １ｂ．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｏｃｅａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｚｈａｎｊｉａｎｇ ５２４０８８， Ｇｕａｎｇdong，Ｃｈｉｎａ；
　　２． Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｄｏｎｇｈｕａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０１６２０， Ｃｈｉｎａ）
　　
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｂｅａｄ ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ ｏｎ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｉｎ ｍａｎｔｌｅ， ｖｉｓｃｅｒａｌ ｍａｓｓ ａｎｄ ａｄｄｕｃｔｏｒ ｍｕｓｃｌｅ ｏｆ Ｐｉｎｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ ｗａｓ ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄ Ａｕｔｏｍａｔｉｃ Ａｎａｌｙｚｅｒ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ①Ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｏｆ ｍａｎｔｌｅ， ｖｉｓｃｅｒａｌ ｍａｓｓ ａｎｄ ａｄｄｕｃｔｏｒ ｍｕｓｃｌｅ ｏｆ Ｐ. ｍａｒｔｅｎｓｉｉ ｔｒｅａｔｅｄ out ｂｅａｄ ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ ｗｅｒｅ（１３．０１±０．０２）％， （１０．８７±０．０６）％， （１０．４１±０．１３）％， ｗｈｉｌｅ ｏｆ ｔｈｏｓｅ ｗｉｔｈ ｂｅａｄ ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ ｗｅｒｅ （１１．３１±０．０１）％， （１４．７８±０．１０）％ ａｎｄ （１０．２６±０．０９）％， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． ②Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ａｓｐ， Ｇｌｕ and Ｇｌｙ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｏｔｈｅｒ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ． Ｉｎ ｍａｎｔｌｅ， ｅｘｃｅｐｔ Ｓｅｒ， Ｍｅｔ， Ｔｙｒ ａｎｄ Ｐｈｅ，ｗｈｉｃｈ ｈａｄ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｃｈａｎｇｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｏｓｅ ｗｉｔｈ ｏｒ ｗｉｔｈｏｕｔ ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ， ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｔｈｒ，Ｖａｌ ａｎｄ Ｃｙｓ ｏｆ ｓｈｅｌｌｆｉｓｈ ｗｉｔｈｏｕｔ ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ ｗａｓ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｗｉｔｈ ｉｎｓｅｒｔｉｔｉｏｎ； ｗｈｉｌｅ ｔｈａｔ ｏｆ ｏｔｈｅｒｓ ｗｅｒｅ ｈｉｇｈｅｒ． Ｉｎ ｖｉｓｃｅｒａｌ ｍａｓｓ， ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ（Ｐ＜０．０５） ｉｎ ｓｈｅｌｌｆｉｓｈ ｎｏｔ ｔｒｅａｔｅｄ ｂｙ ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ ｅｘｃｅｐｔ Ｃｙｓ ａｎｄ Ｐｒｏ． Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ， ｉｎ ａｄｄｕｃｔｏｒ ｍｕｓｃｌｅ， Ｇｌｕ， Ｖａｌ， Ｉｌｅ ａｎｄ Ｌｙｓ ｏｆ ｓｈｅｌｌｆｉｓｈ ｗｉｔｈｏｕｔ ｂｅａｄ ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ（Ｐ＜０．０５）； ａｓ Ｇｌｙ ａｎｄ Ａｌａ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ； ａｎｄ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｈａｄ ｎｏ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ．
　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｐｉｎｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ； ｂｅａｄ ｉｎｓｅｒｔｉｔｉｏｎ； ｍａｎｔｌｅ； ｖｉｓｃｅｒａｌ ｍａｓｓ； ａｄｄｕｃｔｏｒ ｍｕｓｃｌｅ； ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ
　　
　　马氏珠母贝（Ｐｉｎｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ），又称合浦珠母贝，属暖水性海洋贝类，主要分布在广东、广西和海南，是我国南方沿海地区的主要经济贝类［１］。其所产出的珍珠称南珠，粒大、圆润、光彩迷人，深受广大消费者喜爱，近年来市场需求也越来越大。随着人工插核育珠技术的成熟，已可成功培育优质珍珠。人工插核是先将珠核植入贝体，再往珠核上移植外套膜细胞小片，小片分裂增殖形成珍珠囊由分泌细胞分泌珍珠质，形成珍珠。马氏珠母贝是滤食性动物，靠闭壳肌开合进食。插核后，由于贝体产生排异反应，很可能会引起贝体基本组分的变化，插入的珠核可能被从创口中挤出来［２］，未被挤出的珠核则经过２０ ｄ休养期后，顺利分泌珍珠质。本文利用氨基酸自动分析仪，研究插核和未插核马氏珠母贝外套膜、内脏团和闭壳肌氨基酸组成和含量的变化，以期为珍珠的形成机制、改进插核技术及培育优质珍珠提供参考。
　　１材料与方法
　　１．１材料与仪器
　　材料：马氏珠母贝采自湛江徐闻养殖基地（２００只），平均贝重（４５±１０）ｇ，贝龄２年。取１００只贝，当天进行插核手术，将经插核处理和未经插核处理的马氏珠母贝暂养２０ ｄ。海水取自湛江东海岛，砂滤；试验期间保持水温２３～２５ ℃，ｐＨ值８．１２～８．３５，盐度１．０２０～１．０２５（盐度不足可用海水晶调兑），２４ ｈ不间断充气，保持溶氧。投喂扁藻，每天２次，密度为８．５×１０５～１．１×１０６ ｃｅｌｌ／ｍＬ，上午９∶00换水，每天检查贝体３次，及时清除死贝，以免污染水质。暂养结束后，开壳后快速解剖，分离外套膜、内脏团和闭壳肌，清洗并装袋，－２０ ℃冷冻备用。
　　仪器：日立Ｌ－８９００氨基酸自动分析仪。
　　１．２试验方法
　　将样品解冻，匀浆，在８０ ℃烘干至恒重。即得插核贝外套膜、内脏团和闭壳肌，未插核贝外套膜、内脏团和闭壳肌，共６组样品，每组样品每只贝３个重复。准确称取样品０．１００ ０ ｇ，经６ ｍｏｌ／Ｌ ＨＣｌ于１１０ ℃含氮气密封反应釜中水解２０ ｈ。
　　１．３氨基酸自动分析仪测定条件
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文 　　流动相：柠檬酸－柠檬酸钠缓冲液（ｐＨ＝２．２、３．５、５．５、７．０）；分析时间：３０ ｍｉｎ；反应柱柱温：１３５ ℃；分离柱柱温：５２ ℃；缓冲液：流速１．２００ ｍＬ／ｍｉｎ；茚三酮：流速０．７００ ｍＬ／ｍｉｎ。每组样品重复确定３次，单个氨基酸相对标准偏差（ＲＳＤ）小于１０％（按照ＧＢ／Ｔ ５００９．１２４－２００３测定）。测定的结果以样品干重百分数表示，样品含量＝（测定数值／样品干重）×１００％。
　　１．４数据统计
　　实验数据通过ＳＰＳＳ １３．０统计软件分析处理，利用配对ｔ检验（Ｐａｉｒｅｄ－Ｓａｍｐｌｅ Ｔｅｓｔ）检验插核前后外套膜、闭壳肌和内脏团氨基酸组成及含量的差异显著性。描述性统计值使用平均值±标准差表示，Ｐ＜０．０５为具有显著性差异。
　　２试验结果
　　经Ｌ８９００日立氨基酸自动分析仪检测，从插核和未插核马氏珠母贝外套膜、内脏团和闭壳肌中分别检出１７种氨基酸，色氨酸已被破坏，其中酸性氨基酸２种，非极性氨基酸７种，必需氨基酸７种，半必需氨基酸２种，各氨基酸的含量见表１。从氨基酸组成来看，插核和未插核贝各部位氨基酸组成基本一致，均为Ｇｌｕ含量最高，Ａｓｐ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ和Ａｒｇ较为丰富，Ｃｙｓ、Ｍｅｔ和Ｈｉｓ含量较低。从插核和未插核贝各部位的氨基酸含量来看：外套膜中，除Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、Ｔｙｒ和Ｐｈｅ外，插核贝外套膜各氨基酸含量均与未插核贝差异显著（Ｐ＜０．０５），插核手术使Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ和Ｐｒｏ含量降低，Ｔｈｒ，Ｖａｌ和Ｃｙｓ升高。闭壳肌中，除Ｃｙｓ和Ｐｒｏ外，插核贝各氨基酸含量均升高，且与未插核贝差异显著（Ｐ＜０．０５）。而内脏团中，插核手术仅导致Ｇｌｙ和Ａｌａ显著升高（Ｐ＜０．０５），Ｇｌｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ和Ｌｙｓ降低（Ｐ＜０．０５），未插核贝和插核贝其它各氨基酸含量变化不显著（Ｐ＞０．０５）。从总氨基酸含量来看，插核贝闭壳肌中最高，其次为外套膜，插核手术导致马氏珠母贝外套膜氨基酸含量降低，闭壳肌氨基酸升高，内脏团略微降低。
　　３讨论
　　马氏珠母贝为海水珍珠贝，其氨基酸组成与淡水育珠蚌三角帆蚌、非育珠蚌毛蚶、黄螺、花蛤基本相同，含量与企鹅珍珠贝全脏器氨基酸含量［３］相似，低于淡水育珠蚌三角帆蚌［４］，高于非育珠蚌毛蚶、黄螺、花蛤等［５］。经氨基酸自动分析仪检测，未插核马氏珠母贝的３种组织中，闭壳肌氨基酸含量最高，其次为外套膜，这是由不同组织具有不同的生理功能造成的。这与段德麟［６］报道的虾夷扇贝中闭壳肌氨基酸含量最高一致。据小林新二郎［７］研究，闭壳肌由横纹肌和平滑肌组成，前者有贝壳的开闭运动，后者有闭壳作用，能保持一定程度的收缩和紧张状态，所以其蛋白质含量集中。外套膜是肌肉质，善于伸缩，有三层结构，外侧上皮组织、内侧上皮组织和结缔组织，外侧上皮细胞有很强的分泌能力，其分泌的粘液即为壳角蛋白的前体。由此可见，闭壳肌和外套膜是贝体储存和积累蛋白质的主要场所。
　　邱安东等［８］的研究表明：不同ｐＨ值可影响三角帆蚌外套膜珍珠质分泌，中性水体，合成和分泌旺盛，酸性和碱性水体，珍珠质分泌细胞合成和分泌能力减弱；不同ｐＨ还影响外套膜表面蛋白质含量，酸碱性水体中外套膜外表皮细胞内蛋白质最少。不同浓度硫酸铜对三角帆蚌外套膜也有不同程度的损害［９］。可见，外界刺激会影响贝体不同组织的功能。而马氏珠母贝经插核手术，造成贝体创口，降低了贝体新陈代谢、免疫力和外套膜分泌细胞的活力，其分泌能力也相应降低，致使外套膜氨基酸含量降低。插核后，贝体产生排核现象，增大闭壳肌的收缩性，王恒庆等［１０］研究表明术后马氏珠母贝蛋白总含量增加。插核后，外套膜氨基酸含量降低，闭壳肌含量升高，内脏团基本未变。
　　珍珠层是由壳角蛋白和霰石形成的复合体，大量文献表明壳角蛋白可控制ＣａＣＯ３晶体的生长［１１－１５］，外套膜对贝壳和珍珠的形成及质量有至关重要［７］。本研究显示插核手术导致外套膜氨基酸含量降低，其原因还可能是氨基酸被转运到内脏的初生珍珠囊或次生珍珠囊，进而转运到贝壳和珍珠中。石安静等［16］对三角帆蚌珍珠囊的形成研究表明：在休养期中３０ ｄ左右，可生成次生珍珠囊，分泌珍珠质。本文测得插核手术导致外套膜Ｇｌｕ、Ａｓｐ和Ｇｌｙ显著降低，而研究中表明壳角蛋白富含Ａｓｐ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ和Ｇｌｕ［１７］，其可能在珍珠的可形成过程中起重要作用［１８］。
　　马氏珠母贝氨基酸决定贝的营养水平，同时也影响贝壳和珍珠的形成及珍珠的质量。了解插核手术对马氏珠母贝各部位氨基酸组成和含量的影响，可为进一步理解贝体各组织的生理功能、培育优质珍珠及研究马氏珠母贝贝体和珍珠层间氨基酸转运提供参考。
　　参考文献：
　　［１］ 邓陈茂，童银洪，符韶． 马氏珠母贝的研究进展［Ｊ］． 现代农业科技，２００９（２）：２０４－２０６．
　　［２］ 张元培，韩德举．名优珍珠养殖及饰品加工［Ｍ］． 北京：中国农业出版社，１９９６．１２２．
　　［３］ 吴晓萍，周春霞，章超华，等． 企鹅珍珠贝全脏器的营养成分分析与评价［Ｊ］． 食品科学，２００７，２８（７）：３８５－３８８．
　　［４］ 周海燕，刘振华，刘承初，等．采珠后三角帆蚌肉和外套膜的营养成分分析［Ｊ］． 食品工业科技，２００６（１１）：１７０－１７３．
　　［５］ 高振忠． 几种贝类的蛋白质氨基酸［Ｊ］． 氨基酸杂志，１９９３（３）：１８－２０．
　　［６］ 段德麟，王远红，汪贻生． 四种扇贝氨基酸和脂肪含量分析［Ｊ］． 营养学报，１９９４，１６（４）：４３３－４３５．
　　［７］ 小林新二郎，渡部哲光，著， 熊大仁，译． 珍珠的研究［Ｍ］． 北京：农业出版社，１９９６：６５－６６．
　　［８］ 邱安东，石安静． 不同ｐＨ值对三角帆蚌珍珠质分泌的影响［Ｊ］． 动物学报，１９９９，４５（４）：３６１－３７０．
　　［９］ 肖永清，石安静． 硫酸铜对三角帆蚌的珍珠质量及外套膜与珍珠囊与珍珠囊细胞的影响［Ｊ］． 水生生物学报，２０００，２４（３）：２６３－２７０．
　　［１０］ 王恒庆，杜晓东，邓岳文，等． 马氏珠母贝育珠前处理和术后休养期软体动物生化组成的变化［Ｊ］． 广东海洋大学学报，２００７，２７（６）：２７－３０．
　　［１１］ ＩＷＡＯ Ｋ， ＴＥＴＳＵＲＯ． Ｂｉｖａｌｖｅ ｓｈｅｌｌ ｓｒｅｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ ｏｒｇａｎｉｃ ｍａｔｒｉｘ［Ｊ］． Ｍａｔｅｒｉａｌｓ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｃ， ２００６， ２６（４）：６９２－６９８．
　　［１２］ ＦＡＢＩＯ Ｎ，ＢＡＴ Ａ Ｇ，ＬＩＡ Ａ，ｅｔ ａｌ． Ｍｏｌｌｕｓｋ ｓｈｅｌｌ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ： Ｍａｐｐｉｎｇ ｔｈｅ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ｏｒｇａｎｉｃ ｍａｔｒｉｘ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇ ａ ｓｉｎｇｌｅ ａｒａｇｏｎｉｔｉｃ ｔａｂｌｅｔ ｉｎ ｎａｃｒｅ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｔｒｕｃｒｕｒａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，２００６，１５３（２）：１７６－１８７．
　　［１３］ ＦＵＲＵＨＡＳＨＩ Ｔ． Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ａｒａｇｏｎｉｔｉｃ ｍｏｌｌｕｓｃａｎ ｓｈｅｌｌ ｐｒｏｔｅｉｎｓ［Ｊ］． Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ， ２０１０， １５５（２）：１９５－２００．
　　［１４］ ＳＡＭＡＴＡ Ｔ，ＨＡＹＡＳＨＩ Ｎ，ＫＯＮＯ Ｍ，ｅｔ ａl． Ａ ｎｅｗ ｍａｔｒｉｘ ｐｒｏｔｅｉｎ ｆａｍｉｌｙ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｎａｃｒｅｏｕｓ ｌａｙｅｒ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｉｎｃｔａｄａ ｆｕｃａｔａ［Ｊ］． ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ，１９９９，４６２（２）：２２５－２２９．
　　［１５］ 张刚生，李浩璇，陈益兰． 珍珠层中的蛋白质及其碳酸钙相互作用研究进展［Ｊ］． 广西科学，２００２，９（４）：３０６－３１１．
　　［１６］ 石安静，张矛． 三角帆蚌珍珠囊形成的研究［Ｊ］． 水产学报，１９８５，９（３）：２４７－２５３．
　　［１７］ ＴＲＡＶＩＳ Ｄ Ｆ，ＦＲＡＮ ＯＩＳ Ｃ Ｊ，ＢＯＮＡＲ Ｌ Ｃ，ｅｔ ａｌ． Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｏｒｇａｎｉｃ ｍａｔｒｉｃｅｓ ｏｆ ｉｎｖｅｒｔｅｂｒａｔｅ ｍｉｎｅｒａｌｉｚｅｄ ｔｉｓｓｕｅｓ １［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９６７，１８（５－６）：５１９－５５０．
　　［１８］ ＬＥＥ Ｓ Ｗ，ＣＨＯＩ Ｃ Ｓ． Ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｏｒｇａｎｉｃ ｍａｔｒｉｃｅｓ ａｎｄ ｂｉｏｍｉｎｅｒａｌｓ （ｍｙｏｓｔｒａｃａｌ ｐｒｉｓｍ ａｎｄ ｆｏｌｉａ） ｏｆ ｔｈｅ ａｄｕｌｔ ｏｙｓｔｅｒ ｓｈｅｌｌ， Ｃｒａｓｓｏｓｔｒｅａ ｇｉｇａｓ［Ｊ］． Ｍｉｃｒｏｎ，２００７，３８（１）：５８－６４．
　　
　　注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文