[酶联免疫甲胎蛋白诊断试剂盒精密度评价] 三代酶联几周排除艾滋

　　[摘要] 目的 评价酶联免疫甲胎蛋白诊断试剂盒的精密度。 方法 比较6个厂家生产的酶联免疫甲胎蛋白诊断试剂盒的精密度，分析诊断试剂的精密度现状。 结果 6个厂家产品的精密度检测结果存在较大的差异，其中2个厂家的产品不能达到国家标准。 结论 各厂家产品精密度水平差距较大，部分产品的精密度性能指标无法满足临床需求，亟待改善。
　　[关键词] 甲胎蛋白试剂盒；精密度；酶联免疫；评价
　　[中图分类号] R446 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2012）07（c）-0127-02
　　甲胎蛋白是源于卵黄囊、未分化肝细胞和胎儿胃肠道的一种糖基化白蛋白，其分子量约为70 000 D[1]。当肝细胞发生癌变时，随着病情恶化，甲胎蛋白在血清中的含量会急剧增加。有报道称70%以上的原发性肝癌患者血清内可检测到高浓度的甲胎蛋白，而转移性肝癌的甲胎蛋白水平一般不是非常高，酒精性肝硬化、急性病毒性肝炎以及HBsAg携带者血清内的甲胎蛋白含量升高幅度更低一些[2]。因此，甲胎蛋白的定量检测被广泛用于原发性肝癌等疾病的辅助诊断，其检测的精密度是该定量检测产品的重要性能指标之一[3]。
　　精密度是用来考察试剂盒对同一样本重复测定时，能否得到无显著差异的结果的性能指标，通常用重复多次测量结果的变异系数（CV%）表示。一般情况下，评价精密度时，同一样本重复测定10次，测定结果的变异系数（CV%）应不高于15.0%[4]。酶联免疫甲胎蛋白诊断试剂盒（以下简称“甲胎蛋白试剂盒”）精密度的国家标准也是不高于15%（n = 10）[5]。笔者从市场上购买6种甲胎蛋白试剂盒，对其精密度进行测定评价，现报道如下：
　　1 材料与方法
　　1.1 材料与设备
　　1.1.1 材料 6种甲胎蛋白试剂盒，每种选取3个批号。以上产品均为国内常见的试剂盒。本文旨在讨论国内甲胎蛋白试剂盒的精密度现状，为避免歧义，所使用的甲胎蛋白试剂盒均采用代码标示：A、B、G、K、S、W。质控品采用BIORAD质控品367#。
　　1.1.2 试验设备 全自动加样器：e-Lisa；洗板机：iWO-960；酶标仪（高灵敏宽范围）：PHomo。
　　1.2 方法
　　选取A、B、G、K、S、W 6个厂家甲胎蛋白试剂盒，每个厂家选定3个批号，共组成18个试剂盒。选取同一个BIORAD 367#质控品（质控血清），按照说明书进行溶解备用。按照每个试剂盒的操作说明书进行操作，分别用18个试剂盒测定选定质控品的浓度值，每个试剂盒的测定重复10孔浓度值。综上得到180个浓度数据，按照“1.3”的方法对这180个数据进行分析。
　　1.3 对比评价
　　1.3.1 横向比较 每个厂家3个批号的甲胎蛋白试剂盒分别测定精密度，取其结果的平均值进行评价。
　　1.3.2 纵向比较 针对每个厂家3个批号的甲胎蛋白试剂盒测定同一质控品的30个浓度值进行精密度评价。
　　1.3.3 评价标准 横向比较和纵向比较采用相同的评价标准。精密度小于7%的甲胎蛋白试剂盒评价为优，精密度在7%～10%之间的甲胎蛋白试剂盒评价为良，精密度在10%～15%之间的甲胎蛋白试剂盒评价为中，精密度大于15%的甲胎蛋白试剂盒评价为差。
　　2 结果
　　横向比较，A、K两个厂家的甲胎蛋白试剂盒精密度评为优；W的甲胎蛋白试剂盒精密度评为良；B、S两个厂家的甲胎蛋白试剂盒精密度评为中；G的甲胎蛋白试剂盒精密度评为差，超过国家标准22%。
　　纵向比较，A、K两个厂家的甲胎蛋白试剂盒精密度评为优；S、W两个厂家的甲胎蛋白试剂盒精密度评为中；B、G两个厂家的甲胎蛋白试剂盒精密度评为差分别超过国家标准22%和32%。
　　3 讨论
　　横向比较的结果反映批内精密度性能。这种精密度主要体现同一批甲胎蛋白试剂盒连续测定结果的重复性。本研究中，两种甲胎蛋白试剂盒性能优，一种甲胎蛋白试剂盒性能良好，其他3种甲胎蛋白试剂盒性能一般，甚至出现不能满足国家标准的情况。纵向比较的结果反映批间精密度性能。这种精密度主要体现不同批次甲胎蛋白试剂盒连续测定结果的重复性。综合比较来看，两家企业的甲胎蛋白试剂盒精密度性能优越，可以满足临床辅助诊断需求；多数企业产品的批内精密度优于批间精密度，即他们生产的甲胎蛋白试剂盒批间精密度性能有所下降，产品B甚至出现了批内合格而批间不能满足国家标准的现象。使用精密度性能较差的甲胎蛋白试剂盒进行临床测定，其结果是不准确的，这样的测定结果无法满足临床连续监测同一患者病情变化的实际需求。
　　精密度是甲胎蛋白试剂盒的重要性能指标之一。精密度不好的原因是多方面的，包括试剂盒的原材料、生产工艺、分析操作等[6]。建议各生产厂家从源头入手，综合控制生产全过程，为临床提供更为可靠的诊断试剂。临床检验实验室在确定甲胎蛋白试剂盒品牌时，建议采用本文提供的方法对备选品牌进行随机抽样，详细测定比较其精密度。只有经过充分的比较验证才能选择到优质的产品，才能提供更为可靠的检验数据。
　　为确保临床检测的长期准确性，克服某些甲胎蛋白试剂盒精密度较差的现状，各实验室必须加强室内质控[7]。实验室可以根据自身情况绘制质控图，建立一系列甲胎蛋白检测质量保证体系，加强实验室管理，发现并找出试验失控的原因，制定纠正措施并保证出具数据的科学性和可靠性[8]。
　　[参考文献]
　　[1] Taketa K. Alpha-Fetoprotein in the 1990s In：Sell SS Serological cancer markers[M]. New Jersey：Humana Press，1992：31-46.
　　[2] Stuart KE，Anand AJ，Jenkins RL. Hepatocellular Carcinoma in the United States[J]. Cancer，1996，77（11）：2217-2222.
　　[3] 张春涛，黄颖，于婷，等. 2009 年度甲胎蛋白（AFP） 体外诊断试剂抽验质量分析[J]. 中国药事，2010，24（8）：809-811.
　　[4] 徐伟文. 体外诊断试剂研制常用技术指标之分析性能评估[J]. 分子诊断与治疗杂志，2010，2（2）：140-144.
　　[5] 国家食品药品监督管理局. 中国生物制品规程[Z]. 2000-08-02.
　　[6] 孙玉芬，秦国天. 国产ELISA试剂盒批间变异的分析[J]. 现代医药卫生，2003，19（7）：908-909.
　　[7] 张艳. 做好室内质控[J]. 中国实用医药，2011，6（10）：243.
　　[8] 邱明. EWMA控制图在ELISA室内质控中的应用[J]. 中外医学研究，2011，9（20）：160-161.
　　（收稿日期：2012-04-17 本文编辑：陈 俊）