板蓝根与大青叶【板蓝根和大青叶类药材腺苷含量的测定】
2006年7月第28卷 第7期中成药
Chinese Traditi onal PatentM edicine July 2006Vol . 28 No . 7
中通过调节胶囊灌装机的填充杆高度, 可使装量达到设计装量。
6. 4 测定相对临界湿度实验, 先根据文献H 2S O 4、48
H 2S O 4、44
[3]
采用54
H 2S O 4拟形成29. 55、40. 52、
48. 52的相对湿度, 经实验测定, 3种浓度硫酸形成的相对
湿度相差不大, 在25
～30之间, 因此采用文献[4]中不同
盐的饱和水溶液得到不同的相对湿度, 结果较理想。
图2 不同相对湿度下吸湿百分率
6 讨论
6. 1 由于本品的提取物量大, 可加入辅料的量较少, 为改善
6. 5 本产品在10万级洁净区中生产, 洁净区的温度控制在18～24°C, 相对湿度控制在30
～45, 小于本品的临界相
对湿度62, 可保证产品质量。但由于本品的吸湿性很强,
因此在内包装中还需放入袋装干燥剂, 内包装采用高密度聚乙烯瓶, , 以保证产品质量。, 1][M].上海:上海科学技术出版社, 1988, 99. [], 贾玉蓉, 魏 波. 不同辅料对中药冲剂吸湿性的影响
[J ].华西药学杂志, 1993, 8(3) :80.
[3] 刘中秋, 周 华, 苏子仁, 等. 生脉成骨胶囊制剂成型工艺研究
[J ].中成药, 1998, 20(4) :224.
[4] 丁志平, 乔延江. 不同粒径黄连粉体的吸湿性实验研究[J ].中
该药粉的流动性和吸湿性, 曾考虑将其制成颗粒, 经过实验, 湿法制粒烘干后装胶囊, 流动性和吸湿性均明显改善, 但由于颗粒间的空隙比较大, 胶囊的装量仅能达到0. 38g/粒, 这样每日服用的胶囊数会增加, 而采用提取物粉末加辅料直接装胶囊的工艺, 可简化工艺流程。
6. 2 筛选润滑剂实验中, , 程中易结成小球, 增加生产流程。
6. 3 处方提取物加入筛选出的辅料, 装胶囊, 装量较设计装
量增加, 可能是由于辅料改变了粉体的堆密度造成, 但生产
国实验方剂学杂志, 2004, 10(3) :527.
板蓝根和大青叶类药材腺苷含量的测定
郭 力, 梁恒兴, 赵 斌, 范时根
(成都中医药大学药学院, 四川成都611730)
关键词:腺苷; 板蓝根; 高效液相色谱法
摘要:目的:首次提出以腺苷作为板蓝根、大青叶、南板蓝根等药材及其制剂的质量控制指标, 采用高效液相色谱法测定了其腺苷含量。方法:采用A llti m a C 18色谱柱(5μm, 150mm ×4. 6mm ) ; 流动相:甲醇2水(8∶92) ; 流速:1mL /min; 柱温:30°C; 检测波长:260n m 。结果:该方法的线性范围为0. 1712～0. 8560μg 。平均加样回收率为97. 18可靠方法。
中图分类号:R284. 1 文献标识码:B 文章编号:100121528(2006) 0721064202 板蓝根和大青叶是公认的具有抗病毒的有效中药, 在临床中广泛使用。尽管对它们已作了很多研究, 但其有效成分及其作用机理尚未有确切的结论, 几十年来大青叶和板蓝根
[1, 2]药材及其制剂的质量监控一直未能解决。文献报道中有
, RSD 为
1. 74。结论:实验表明, 该方法灵敏度高、操作简便、重现性好、效率高。为全面评价此类药材和制剂质量提供了一个
多采用水作为提取溶剂, 而靛蓝和靛玉红具有很强的脂溶性, 有人对水提取液的靛蓝、靛玉红作了含量测定, 结果发现其提取率仅为1. 5
92. 4
～3. 5。此外, 浓缩过程的损失率高达
; 在通过提取、浓缩、醇沉、收膏等操作后, 其转移率仅
[4, 5]
～13。
人主张它们的质量控制指标应选靛蓝、靛玉红。但也有人认为“抗内毒素试验表明:靛蓝和靛玉红不具有抗内毒素活
[3]性。”而它们的水溶性成分却具有很强的抗病毒、抗菌、抗
为3. 3
文献报道, 板蓝根和大青叶中含有的水溶性成分腺苷, 具有抗炎作用[5, 6], 与板蓝根和大青叶的功能主治一致。但目前尚未有板蓝根和大青叶中腺苷含量测定的相关报道。
内毒素、增强机体免疫作用。目前含板蓝根和大青叶的制剂
收稿日期:2005201221
作者简介:郭 力(1964～) , 男, 成都中医药大学副教授, 主要从事中药新药开发研究工作。E 2mail:gli64@t om. com 。
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腺苷的含量测定方法有薄层扫描法、薄层2紫外法、紫外分光光度法及高效液相色谱法等。高效液相色谱法具有简便、快速、灵敏、重现性好等特点。通过试验, 建立了腺苷含量测定的高效液相色谱法, 为板兰根、大青叶及其制剂的质量控制提供了较为实用的检测方法。
1 仪器与试药
HP1100高效液相色谱仪(G1310A Is oPu mp; G1314A DAD 检测器; Che m stati on 数据处理软件) , 梅特勒2托利多AE240电子天平, 腺苷对照品(中国药品生物制品检定所提
3. 2 标准曲线的制备 精密称取腺苷对照品10. 7mg, 置25mL 量瓶中, 加甲醇溶解并稀释至刻度, 摇匀, 作为对照品贮
备液。再分别精密量取对照品贮备液1, 2, 3, 4, 5mL 置25
mL 量瓶中, 用30甲醇溶解并稀释至刻度, 摇匀, 分别吸取10μL 注入液相色谱仪, 记录色谱图, 测定峰面积值, 并以峰
面积值(A ) 对进样量(C ) 进行回归, 得回归方程:
A =3001. 8C -15. 006, r =0. 9996。试验结果表明:进样量
在0. 1712～0. 8560μg 范围内, 腺苷的峰面积值与进样量有良好的线性关系。
3. 3 供试品溶液的制备
3. 3. 1 药材供试品溶液的制备 取各药材粉末1～2g, 精
供, 批号:8792200001) , DL 2360超声波清洗器(宁波市石浦海天电子仪器厂) 。
甲醇为色谱纯, 水为重蒸馏水, 其它试剂均为分析纯。板蓝根、大青叶、南板蓝根、青黛药材均购于四川省中药材公司, 经鉴定, 均符合《中国药典》相关规定; 板蓝根注射液(山西晋新双鹤药业责任公司生产, 批号为:200303267) 。
2 色谱条件
密称定, 置具塞锥形瓶中, 精密加入甲醇25mL, 称定重量, 超声处理m in, , , 用30甲醇补, , 2 精密吸取板蓝根
1置5mL 量瓶中, 用30甲醇稀释并定容至, 摇匀, 即得。
3. 4 精密度试验 取同一板蓝根样品供试液, 重复进样5
色谱柱:A llti m a C 18(5μm, 6) ; 甲醇2水(8∶92) ; ::
260n m 进样量:103 试验方法
3. 1 测定波长的选择 用二极管阵列检测器对腺苷标准品
次, 测定腺苷的峰面积值。RSD 为0. 91(n =5) 。
3. 5 稳定性考察 取同一板蓝根样品供试液, 分别于第0, 2, 4, 6, 8h 进样, 记录峰面积值, 结果表明在8h 内, 腺苷峰
溶液进行扫描, 扫描范围为200～400n m, 结果发现腺苷在
260n m 处有一最大吸收(见图1) , 故选择260n m 作为测定
面积值无明显变化, RSD 为1. 45(n =5) 。
3. 6 重复性考察 取同一批板蓝根样品, 按“供试品溶液制
波长
。备”项下操作, 进样测定, 记录腺苷峰面积值, 并进行计算, 结果RSD 为1. 34
(n =5) 。
3. 7 回收率试验 取已知含量的板蓝根粗粉6份, 分别精
密加入对照品溶液, 按“供试品溶液制备”项下操作, 进样测定, 记录峰面积值, 计算回收率均在95
RSD 为1. 74
～105之间,
, 平均回收率为97. 18。
4 样品测定
图1 腺苷波长扫描图
取板蓝根、大青叶、南板蓝根、青黛的供试品溶液和对照品溶液各10μl, 分别进样, 用外标一点法计算含量, 色谱图见图2, 结果见表1
。
图2 腺苷含量测定高效液相色谱图
A 对照品 B 板蓝根 C 大青叶
D 南板蓝根 E 青黛 F 板蓝根注射液 1腺苷
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表1 四种药材腺苷含量测定结果(n =3)
药材名称
腺苷含量
0. 0330. 0450. 073
5. 3 采用本实验方法对板蓝根注射液中腺苷作了测定(见
图2F ) , 结果发现其腺苷含量为0. 14mg/mL,表明腺苷可作为其指标性成分, 以控制其质量。
5. 4 本实验首次对板蓝根和大青叶类药材中腺苷含量作了
板蓝根(RD I X I S AT D I S )
大青叶(F OL I U M I S ATI D I S )
南板蓝根(RH I Z OMA ET RAD I X BAPHCACANTH I S
CUSI A E ) 青黛(I N D I G O NAT URAL I S )
板蓝根注射液(每mL 含生药0. 5g )
测定, 提出了以腺苷含量作为此类药材的指标性成分, 为此类药材和制剂的质量控制提供一个新的思路。参考文献:
[1] 张润珍, 张玉文. 板蓝根的研究进展[J ].中草药, 2000, 31(6) :
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[3] 张汉明, 戈, 乔传卓. 靛
无
0. 14mg/mL
5 讨论
5. 1 《中国药典》中冬虫夏草腺苷含量测定采用磷酸缓冲盐
溶液作为流动相, 流动相配制复杂, 而且对色谱柱的损害较大。而本实验采用甲醇2水系统作为流动相, 有机相占用比例仅8
, 对色谱柱损害很小, 并能够达到满意的分离效果,
腺苷和样品中的其它组分可达到基线分离, 分离度大于1. 5; 以腺苷峰计算, 理论褡板数(N ) 为5000以上, 拖尾因子(T ) 在0. 95～1. 05之间。
5. 2 测定的几种药材中, , [J ].药学实践杂(5) :347.
4. [J ].中国中药杂
志, 15(7) :30232.
[5] 徐汝明, 陆 阳, 陈泽乃. 紫外分光光度法测定贝母中腺苷的含
次之, 、蓼, , 2～3d, 至叶腐烂、茎脱皮时, , , 充分搅拌, 至浸液由深绿色转为紫红色时, 捞出液面泡沫, 至烈日下晒干, 即得, 故青黛制备中是取用的水不溶性部分, 而腺苷是水溶性成分, 故青黛中几乎不含腺苷。
量[J ].中国中药杂志, 1996, 21(9) :5562557.
[6] H ir oshi A Robert E W , Granger D N. Leukocyte adherence in rat 2
mesenteric venules:efficts of adenosine and methotrexate [J ].Gas 2
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[7] 曾 志, 杨东晖, 宋力飞, 等. 高效液相色谱指纹图谱应用于板
蓝根的鉴定[J ].分析化学研究简报, 2002, (7) :8492852.
复方五仁醇胶囊入血成分分析及制剂中相关成分含量测定
窦志华, 丁安伟, 王陆军, 罗 琳, 张 兵, 施 忠
(1. 南京中医药大学, 江苏南京210029; 2. 南通市第三人民医院, 江苏南通226006; 3. 南通大学, 江苏南通226006)
关键词:复方五仁醇胶囊; 含药血清; 入血成分; 分析; 含量测定
中图分类号:R927. 2 文献标识码:B 文章编号:100121528(2006) 0721066202 目前, 多数中药制剂是以测定一个或几个体外成分的含量为质量控制指标, 是否是药效的代表性成分尚待商榷。中药虽成分众多, 但只有那些被消化吸收进入血液的成分或其代谢产物才有产生药效的可能, 中药药效成分研究应该以服用药物后的血清(即含药血清) 为入手点[1], 中药及其制剂质量控制指标也应该以真正能够被吸收入血的成分为对象
[2]
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成, 其中五味子为君药, 是一种治疗急慢性肝炎的科研制剂[3], 该制剂组方简单, 疗效确切。先期发表的论文建立了该制剂中五味子乙素的含量测定方法[4], 此次我们选定其为对象, 进行以含药血清成分分析为指导制订质量控制标准的尝试。
1 实验材料1. 1 仪器
Agilent 1100Series 高效液相色谱仪(G1311A Quaternary Pu mp, G1379A Degasser, G1313A Aut osa mp ler, G1314A Varia 2
。
复方五仁醇胶囊由五味子、柴胡、叶下珠、三七4味药组
收稿日期:2005210231
基金项目:江苏省中医药局中医药科学技术研究专项课题(编号H05173) ; 江苏省南通市社会发展科技计划项目(编号S4006) 作者简介:窦志华(1966～) , 男, 江苏南通人, 副主任中药师, 博士研究生, 主要从事中药炮制与复方研究工作。3通讯作者:丁安伟, 教授, 博士生导师, 电话:[1**********]8, E 2mail:daw@njutcm. edu . cn
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