建立三叉神经痛慢性缩窄环术大鼠模型的体会_三叉神经痛立即止痛

　　摘要:目的 建立三叉神经痛慢性缩窄环术大鼠模型,并总结经验。方法 经口腔入路暴露并结扎眶下神经，建立三叉神经痛慢性缩窄环术大鼠模型。观察术后不同时段大鼠对机械刺激的反应阈值(疼痛阈值)及相关的痛觉行为变化。结果 手术组术后14 d,在眶下神经支配区域内,大鼠出现痛觉超敏现象,与术前及对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 大鼠眶下神经的慢性环扎损伤可导致三叉神经痛出现。
　　关键词：三叉神经痛;动物模型;慢性缩窄环术;大鼠
　　中图分类号：R745.1 R255.2 文献标识码：A 文章编号：16721349（2012）08097302
　　Experience from Establishing Rat Animal Model of Trigeminal Neuralgia
　　Zhang Guiping，Cao Xiaolan // The Affiliated Hospital，Shandong University of Traditional Chinese Medicine (Jinan 250011)
　　Abstract:Objective To establish rat animal model of trigeminal neuralgia for the basic research on the mechanism and therapy.Methods An unilateral chronic onstriction injury(CCI) was produced by placing loose chromic gut ligatures around the infraorbital nerve (ION)，which was exposed by an oral way.The behavioral reactions and the mechanical response threshold (pain threshold) were observed at different times after operation.Results An allodynia to mechanical stimulation on the territory of ligated ION was found from the 14 days after operation in the operative group.There was significant difference in pain threshold，compared with the preoperation and the control group(P＜0.05).Conclusion A rat animal model of trigeminal neuralgia can be established by chronic constriction injury to the infraorbital nerve.
　　Key words:trigeminal neuralgia;animal model;chronic constriction injury;rat
　　三叉神经痛是累及面部三叉神经一支或几支感觉分布区的反复发作的阵发性剧烈疼痛,其病因及发病机制尚不十分明确,为深入探讨病因以及研究更好的治疗方法,建立一种操作简单、可重复利用的动物模型是非常必要的。以往的研究发现三叉神经的脱髓鞘病变是其主要病理基础，眶下神经(infraorbital nerve，ION)慢性缩窄环术(chronic constriction injury，CCI)三叉神经痛模型,其致痛机制与目前比较公认的脱髓鞘病变比较贴近，成功的模拟了三叉神经痛。本实验根据国外制作大鼠CCIION模型的先进经验和国内现有报道，建立了三叉神经痛慢性缩窄环术大鼠模型，旨在探讨中医药治疗三叉神经痛的有效性和安全性，为中医药治疗三叉神经痛提供理论依据。
　　1 材料与方法
　　1.1 实验动物和分组 成年雄性SD大鼠,由山东中医药大学实验动物中心提供,体质量200 g～250 g，健康活泼者入选。共入选20只，根据随机分组原则分为两组，手术组：进行右侧眶下神经的ION环扎术；对照组:进行右侧眶下神经的ION假手术，即只分离眶下神经而不进行环扎。
　　1.2 动物模型的建立 参照丁丽华等［1］所提供的方法制成右侧眶下神经慢性缩窄环术三叉神经痛模型。具体如下：10%水合氯醛（0.3 mL/100 g）大鼠腹腔内注射，麻醉满意后仰卧固定，于口腔内右侧龈颊边缘平第一磨牙水平，向口鼻方向纵向切开约1 cm 长切口，暴露眶下神经，分离周围组织，用两根4.0 铬肠线疏松结扎眶下神经，两线相距2 mm。压迫标准：肉眼可见结扎线使神经的直径略微变细，但不能完全阻断其传导，且神经外膜的血液循环必须通畅。打结时可见大鼠面部微微抽动，术后4.0丝线缝合切口。所有操作均在无菌条件下进行，术前、术后无需应用抗生素。
　　1.3 大鼠行为学检测 结扎或暴露大鼠右侧眶下神经后，手术后每天对各组大鼠进行机械刺激反应阈值测试。在大鼠鼻区中央的触须部位及周围有毛皮肤(眶下神经在面部的感觉支配区)手持刺激棒缓慢给予机械性刺激，机械刺激反应阈值是由感觉测试器（vonfreyfilament）来测定。纤丝使用强度是由细至粗，每一强度的细丝共刺激６次。动物的阳性反应包括:①攻击行为。大鼠可表现出快速抓咬刺激物，咬啮或咀嚼动作，有时发出异常声音。②回避反应。经刺激即表现为快速的后退动作，大鼠为避免面部进一步被接触，蜷缩身子向笼壁靠拢，或将头面部藏在身下，躲避刺激物。③非对称性的面部搔抓，表现为至少连续 3次搔抓面部刺激区域的动作，通常合并后退动作。出现以上 3种反应中任意1项或 1项以上即认为是刺激实验阳性，使大鼠产生阳性反应细丝强度最小值即为疼痛反应阈值。观察两组大鼠手术前后对于不同强度细丝刺激产生痛觉反应阈值的变化。