每升大肠杆菌重组蛋白毫克【重组人谷氧还蛋白１在大肠杆菌中表达条件的优化、纯化及活性检测】
发布时间：2019-02-16 04:12:19 影响了： 人
摘 要：为进一步研究谷氧还蛋白1(Grx1)的生物学功能及作用机制，将已构建的pRSETA-Grx1融合蛋白表达栽体在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达，并优化表达条件，用SDS-PAGE和凝胶影像分析。结果表明，当菌体密度OD600为1．0时开始诱导，加入终农度0．5 mmol／L IPTG，37℃，110±5 r／min振荡培养5 h，重组蛋白为可溶性，表达量达30％以上。用Ni-NTA树脂亲和层析纯化重组蛋白，获得蛋白质纯度达90%以上；Western印迹结果表明，该蛋白具有免疫活性；MTT结果显示，终浓度为10mg／L Grxl重组蛋白具有保护细胞抵御500μmol／L H2O2作用(P 本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文