珊瑚菜的化学成分及其生物活性研究(1)|珊瑚菜怎么吃

学生毕业设计(论文)与答辩成绩记录表

学院、函授站名称河北科技大学承德函授站

学生姓名设计(论文)题目

记录内容

答辩委员所提问题及答辩人对问题回答

评价内容

序号1234

评价项目自述部分创新部分回答部分资料部分

评价标准

语言简练，清晰明了，综合概述全面、准确、论点正确，分析归纳合理。

有创新意识，有独特见解，有一定的实用价值。回答问题果断，反映敏捷，说理清楚；有较强的分析问题和解决问题的能力；能回答难度较大的问题。资料齐全，符合学院毕业设计(论文)规范化要求。

合计

分值30105010

得分23843680

1.北沙参有何药理作用？答：(1)治肺热咳嗽(2)调节免疫功能

(3)抗癌、抗突变及抗肿瘤作用(4)抗真菌作用(5)解毒

(6)镇痛和镇静作用

2.从生物原料中提取分离活性物质的方法有哪些？

答：硅胶柱层析、凝胶过滤层析、薄层层析、结晶和重结晶等方法对其进行化学成分的分离提取和纯化，并利用波谱学方法，主要是氢谱、碳谱等波谱技术对得到的化合物进行结构鉴定。

3.通过毕业设计得到如何结论？

答：最终从样品中共分离得到了两个不同的化合物，其中一个化合物鉴定为豆甾醇，一个化合物鉴定为香柠檬内酯。

尹雪梅

学号

16

专业

指导教师

药学

夏万东

珊瑚菜的化学成分及其生物活性研究

答辩评委签名：钟正伟、夏万东、臧玉红

河北科技大学继续教育学院

毕业设计(论文)前期工作材料

学生姓名：院专

站：业：

学号：设计(论文)题目:

指导教师:材料目录

序号12345

名

称

数量11111

备注

毕业设计(论文)选题、审题表毕业设计(论文)任务书

毕业设计(论文)开题报告〔含文献综述〕毕业设计(论文)外文资料翻译〔含原文〕毕业设计（论文）中期检查表

河北科技大学继续教育学院毕业设计（论文）选题、审题表

院专

站业

河北科大承德函授站

药学

选题教师

教师姓名专业技术职务

夏万东正高

副高

中级√

申报课题名称

珊瑚菜的化学成分及其生物活性研究

珊瑚菜又名北沙参，其根入药，具有养阴润肺，现状渐危。北沙参的营养价值和药用价值极高，除具有较好的防癌抗癌作用，还具有抗菌、北沙参主要含香豆素类和糖类等化学成分。本试验选择珊瑚菜作为研

课题简介

究对象，主要采取了萃取、硅胶柱层析、凝胶过滤、薄层层析、结晶和重结晶、高效液相色谱等多种分离提取技术。

本实验选择山东莱阳北沙参作为研究对象进行活性物质的提取、分离和结构鉴定，期望从中能够发现新的有活性的化合物。

设计(论文)要

求

学生应具备相关课程扎实的理论知识。按照毕业设计任务书要求的进度，按时完成各项工作。提交查阅的所有文献资料及目录；提交开题报告（含文献综述）1份、外文资料翻译（原文及译文）1份；提交完整的实验记录（包括图表、数据）；提交撰写的毕业设计材料。

课题预计

工作量大小

大

适中√

小

课题预计难易程度

难

一般√

易

所在专业审定意见：

同意

负责人(签名)：注：本课题由

尹雪梅

同学选定，学号：

16

2011年8月12日

河北科技大学继续教育学院

毕业设计（论文）任务书

院站：专

业：

学生姓名:学

号:

设计(论文)题目：

起迄日期:2011年8月12日-2011年11月30日

设计(论文)地点:承德函授站指

导

教

师:

钟正伟专业负责人:

宋丽霞

任务书下达日期:2011年8月12日

1、本毕业设计(论文)课题应达到的目的：

通过本课题的研究，使学生能够从文献查阅、综述的撰写、外文翻译、实验方法的确定、实验研究的进行，直到毕业论文的整理完成，得到综合的训练，初步掌握科学研究的基本方法，具备基本的科研素质，为以后的工作打下比较扎实的基础。

2、本毕业设计(论文)课题任务的内容和要求(包括原始数据、技术要求、工作要求等)：

本课题任务的内容包括：

1.掌握从原料中提取和分离活性化合物的方法。2.能对新的有活性的化合物进行结构鉴定。

3.在上述研究的基础上撰写论文，要求实验数据真实可靠、完整，图表清晰规范，条理清晰，结论明确可信。本课题基本要求：

1.学生应具备相关课程扎实的理论知识和较强的实验操作能力。2.遵守实验室规章制度，遵守学校纪律，不无故缺勤。

3.实验过程中，应按要求规范操作，认真观察实验现象，如实做好实验记录，多思考，随时解决实验中出现的问题。4.节约水、电、试剂，爱护仪器设备。5.按照本任务书要求的进度，按时完成各项工作

3、对本毕业设计(论文)课题成果的要求(包括毕业设计论文、图表、实物样品等)：

1.提交查阅的所有文献资料及目录；

2.提交开题报告（含文献综述）1份、外文资料翻译（原文及译文）1份；3.提交完整的实验记录（包括图表、数据）；4.提交撰写的毕业设计材料

4、主要参考文献：

123

乔勇进,房用．珍贵的沙生药用植物－北沙参．植物杂志，2006年第01期，21余椿生．北沙参．食品与药品．2005年第7卷第4A期，43~44

李宝国,石俊英．HPLC法同时测定北沙参不同部位中3种香豆素的含量．山东中

医药大学学报，2005年第29卷第5期，383~385

45

清·吴瑭．温病条辨，卷一

林喆,赵亚,原中．北沙参的化学成分及药理作用研究进展．中国中医药信息杂

志，2007年7月第14卷第7期，91~92

67

Tan,R.X.;Zou,W.X.Nat.Prod.Rep.2001,448.

Ma,Y.M.,Li,Y.,Liu,J.Y.,Song,Y.C,Tan,R.X.Fitoterapia2004,

75,451.

89

Gunatilaka,A.A.L.J.Nat.Prod.2006,509.明·李时珍．本草纲目，第五十二卷

10李宝国,石俊英．近十年来北沙参的研究概况．时珍国医国药，2002年第13卷第5期，309~310.

5、本毕业设计(论文)课题工作进度计划：

起迄日期

工作内容

2011年8月12日~9月2日9月3日~9月13日9月14日~10月24日

确定课题，查阅文献，撰写文献综述，进行外文翻译确定实验研究方法开展实验

10月25日~11月30日整理数据，撰写论文11月30日

准备论文答辩

所在专业审查意见：学院、站意见：

同意同意

负责人：宋丽霞2011年8月15日主管院、站长：王永良

2011年8月15日

河北科技大学继续教育学院

毕业设计(论文)开题报告

题目：珊瑚菜的化学成分学生姓名：专

业：

尹雪梅

药学

学号：16

指导教师：夏万东

2011年11月15日

毕业设计(论文)开题报告

1．结合毕业设计（论文）课题情况，根据所查阅的文献资料，每人撰写2000字左右的文献综述：

珊瑚菜又名北沙参，其根入药，具有养阴润肺，益胃生津的功效，现状渐危。北沙参的营养价值和药用价值极高，除具有较好的防癌抗癌作用，还具有抗菌、保健皮肤以及增加冠状动脉血流量等生物活性。北沙参主要含香豆素类和糖类等化学成分。

一、北沙参的形态特征

北沙参为多年生草本，植株低矮，高5-25厘米。其根为直根系植物，主根细长，扎根深，可达40厘米以上，在主根上着生细小须根[1]，其主根和侧根区分十分明显，圆主开长可达70多厘米。叶密集，基生叶具柄，叶柄长约10厘米，基闻宽鞘状；叶片轮廊呈卵形或宽三角状卵形，长5-12厘米，三出式分或2回羽状分裂，裂叶质厚，卵圆钝或渐尖，边缘有粗锯齿，上面有光泽。复伞形花序顶生，总梗长4-10厘米，密生白色或灰褐色绒毛；无总苞；伞辐10-14，不等长；小总苞片8-12枚，线状披针形；花白色；萼齿5，细小；花瓣5，卵状披针形，先端内折；雄蕊5，与花瓣互生，花药带紫褐色；花柱基扁圆锥形，花柱短。果实为双悬果，呈圆球形或椭圆形，密被棕色刺状软毛，具木栓化果棱，5棱，翅状，有棕色毛。北沙参的种子细小，早扁圆状，一般千粒重24.5克左右。种子寿命较短，只有1年，贮藏保管好，可延至2年，但发芽能力降低，种子还具有低温后熟的特性。

二、北沙参的分布以及生存现状

近年来，随着城市和港口建设，需要大量用沙，因而生长珊瑚菜的水滩常被挖掘，生长环境遭到破坏，影响繁殖生长；加上药农连年挖根，因此资源逐渐减少，分布面积越来越窄。珊瑚菜主要分布于亚洲东部沿海的海湾沙岸上，我国主要分布于沿海地区，尤以海滨沙滩上分布甚广，比如：辽东半岛大连、金县、长海、新金、复县、庄河、盖县、锦西、兴城、缓中，河北北戴河，山东半岛威海、牟平、菜西、崂山，江苏北部连云港，浙江东南部舟山岛、环坏、瑞安，福建东部连江、马尾、长乐、海南文昌、万宁

和台湾淡水、新竹、彰化等地的海滨沙滩。日本、朝鲜、苏联也有分布。珊瑚菜喜温暖湿润，主根深入沙层，能抗寒，耐干埋；适宜在平坦的沿海沙滩或排水良好的沙土和沙质土壤中生长，对肥力的要求不严，忌粘土和积水洼池，抗碱性强，常和大海钻苔草、砂引草、葡工匐苦卖菜等植物混生，在沙滩上形成海滨植物群落。

三、北沙参的药理作用

北沙参果实含有珊瑚菜素、脂肪油，主要脂肪酸有伞形花子油酸、棕搁酸、大量亚油酸及微量异伞形花子油酸，鲜果实含欧前胡素和佛手柑内酯，温室生长的植株含有佛手柑内酯、欧前胡素等[2][3]。它的营养价值和药用价值极高，自古以来就作为一种重要的中药材而广为应用以及进行科学研究。(1)治肺热咳嗽

现代医学研究证明，沙参麦冬汤[4]治疗慢性咽炎、燥咳、肺结核、小儿

迁移性肺炎、小儿咳喘等病症均有较好的作用。

(2)调节免疫功能临床研究表明，沙参麦冬汤治疗阴虚症黄疽、沙参消渴方治疗两虚型搪尿病等有较好疗效[5]。(3)抗癌、抗突变及抗肿瘤作用

北沙参的正己烷、乙醚和乙酸乙酯提取物，均能够抑制

佛波酯引起的无机磷渗入HeLa细胞的磷酯中，并且证明，在体内具有抗癌作用[6][7][8]。北沙参的水或乙醇浸出液对三种致突变剂诱导的突变株回复突变有良好的抑制效果，表明北沙参中含有抗突变成分[5]。(4)抗真菌作用

采用肉汤稀释法测定北沙参中所含香豆素及聚炔类的最低抗菌浓度

(MIC)，结果表明，补骨脂素、佛手柑内酯以及花椒毒素等香豆素成分在400µg/mL浓度以下无抑菌活性。聚炔类成分falcarindiol具有很强的抗格兰氏阳性菌的活性(MIC：2.5～25.0µg/mL)；而另两种聚炔类成分(9Z)-十七碳-1，9-二烯-4，6-二炔-3，8，11-三醇和(10E)-十七碳-1，10-二烯-4，6-二炔-3，8，9-三醇的抑菌活性很弱(MIC：200～400µg/mg)[1]。(5)解毒

杏叶沙参解百药毒、止痛、治蛇虫咬，疗疮肿毒等，临床用于治疖痈[9]。

毕业设计(论文)开题报告

(6)镇痛和镇静作用近年来，奥山等研究了产于日本的北沙参的镇痛和镇静作用，结果表明北沙参的甲醇提取物经口服给药，能够延长戊巴比妥诱导的睡眠时间。进一步研究

表明，其中的聚炔类成分，以及香豆素类化合物，具有显著的镇痛作用[5]。

毕业设计(论文)开题报告

２．本课题要研究或解决的问题和拟采用的研究手段及途径：

北沙参以根条细长，均匀色白，质坚实者为佳。莱阳沙参的优良品质除当地水土因素外，还与精细加工有关。特别是出口沙参，在普通加工的基础上，再经拣、蒸、搓、刮等特殊工序而成。根条单枝细长顺直，头尾大小匀顺，皮纹细嫩，长30cm以上，直径0.3～0.4cm，体质坚实而脆，色白或淡黄而均匀，约20条扎成一小把，商品称“莱胡参”（即莱阳胡城产北沙参），或叫“小子沙参”。本实验选择山东莱阳北沙参作为研究对象进行活性物质的提取、分离和结构鉴定，期望从中能够发现新的有活性的化合物。

本论文实验中，先利用95%的乙醇对珊瑚菜进行提取蒸馏，得到珊瑚菜浸膏。再利用石油醚和乙酸乙酯萃取出该浸膏的有机相部分。运用硅胶柱层析、凝胶过滤层析、薄层层析、结晶和重结晶等方法对其进行化学成分的分离提取和纯化，并利用波谱学方法，主要是氢谱、碳谱等波谱技术对得到的化合物进行结构鉴定。最终从样品中共分离得到了两个不同的化合物，其中一个化合物鉴定为豆甾醇，一个化合物鉴定为香柠檬内酯。

河北科技大学继续教育学院

毕业设计(论文)外文资料翻译

院

专

姓

学站：业：名：号：河北科技大学承德函授站16号

J.Nat.Prod.1996,59,47-48外文出处：(用外文写)

附件：指导教师评语：

能较好完成规定的外文翻译，翻译较为准确。

签名：2011年8月25日

附件1：外文资料翻译译文

一个从拟盘多毛孢属菌分离出的新的达玛烷性化合物

摘要

一个新的倍半萜2a-hydroxydimeninol，作为最终的代谢产物从我们培养的一种真菌中分离了出来，它的结构是由波谱和X-射线晶体衍射分析来确定的。这种真菌属于拟盘多毛孢菌属，它是一类寄生在红豆杉中的真菌。

一、引言

研究发现紫杉酚和紫杉醇类化合物是由一种太平洋紫杉树的内生真菌[1]代谢而产生的。而对于这些红豆杉属植物的内生真菌产生的代谢产物人们已经进行了非常系统的研究。我们最近研究发现，当把从矮叶红豆杉的树皮和叶子中分离得到的两个拟盘多毛孢属的菌株培养在改良的S7培养基上时，它们能产生很多种化合物。这些化合物是通过将培养基粗提物进行硅胶柱层析，并用氯仿-甲醇(95:5)的溶剂系统进行洗脱来分离得到的。结合波谱和X-射线晶体衍射进行鉴定，这些代谢产物中，有一些化合物是一类新型的丁香烯环型倍半萜[2]类化合物。然而这其中的大部分极性化合物，却属于一类新的

达玛烷型倍半萜的衍生物，它们也正是本篇论文所研究的主题。

化合物1

化合物1（2α-hydroxydimeninol）：

化合物1在进行薄层层析时，当用香草醛-硫酸显色时，检测到的化合物1为一个紫红色的斑点。它首先是以黄色油状物的形态而被分离得到的，通过在水-乙醇中进行重结晶，可以获得便于X射线分析（1.25mg/L）的无色针状结晶（mp74℃）。从m/z235中损失的18个质量单位（H2O）是快原子轰击质谱法中显示的唯一的一个有意义的峰。红外光谱（KBr）中3496,3406,3243cm-1处的谱线同样也暗示着羟基官能团的存在。

通过对碳谱和质谱分析，发现该化合物中含有三个甲基，四个亚甲基，五个次甲基和三个季碳。其中一个季碳和一个次甲基碳同属于一个烯族体系。而CH2O,CHO,CHO2

中的每一个基团都可以在核磁共振光谱产生的普通中中轻而易举的找到。

从化合物1（2α-hydroxydrimeninol）晶胞中的单个分子经电脑分析后生成的透视图中可以看出，化合物2α-hydroxydrimeninol中不涉及有绝对构型。

高分辨率质谱在相对原子质量为234.1619处有一个突出的峰，显示分子式为C15H22O2（计算为234.1620）。同时它也与快原子轰击质谱法中显示的荷质比为235中损失的那18个质量单位（H2O）的那个唯一有意义的峰相吻合。因为在核磁共振光谱检测的谱图上只表明有一个明显的双键，所以只有当这个分子是四环化合物时才符合该分子式。可借助于PFG-HMQC[3]，PFG-HMBC[4]，和PFG-DQFCOSY[5]核磁共振光谱对其进行结构骨架的重建。然而含有两个氧的分子式不可能是正确的，因为在C-2和C-11之间不可能存在氧桥结构。此外，如果这个结构式中含有两个氧那就意味着这个分子中不会有羟基的存在，但是在红外光谱（KBr）3496，3406，3243cm-1处所产生的谱图中暗示着羟基官能团的存在。因此，该化合物真正的分子是应该是C15H24O3，而那个荷质比为235的点是由损失的水引起的。

这个含有三个氧的分子式以及它的结构都可以通过X-射线晶体衍射很清晰的展现出来（如图所示）。但是最初的分析是很难确定的，因为一个不对称晶胞中包含有化合物1和两个结晶水，而且最终的结构完美的聚合了。这三个分子的结构和构象在不对称晶胞中是相同的，通过NOE差异光谱实验检测出它们在固态中和在液态中的构象是一致的。

我们将化合物1命名为2α-hydroxydrimeninol。达玛烷型倍半烯萜类化合物存在于植物[6]，真菌[7]甚至海绵动物[8]中。尽管很多文献上报道isodrimeninols未被取代，C-2，C-3双取代以及C-3单取代，但这是第一次报道达玛烷型化合物只在C-2上有取代基。经未被取代的化合物的微生物氧化实验证明：如果一个化合物有2-OH官能团和2-hydroxypolygodial基团就说明它具有潜在的抗癌活性[9]。在达玛烷型化合物中，比如说polygodial和waburganal是人们众所周知的化合物。它们不但具有feeding-deterrent的性能而且在它们的第八位和第九位上还有与芳香族二醛等同的化学活性的取代基，它可以掩盖monoaldehydealcohol的化学活性。而化合物1就具有与上述两种达玛烷性化合物的这一功能类似的功能，或着说化合物1就可以做为一个先导化合物。

二、实验研究:

一般实验流程：

在JEOLJNM-α中的600MHz处记载着1HNMR和所有的二维NMR光谱，而BrukerAC-300在75.5MHz处则记载着13C-NMR光谱。几乎所有的FABMS和HMRS的测量值都建立在JEOLJMS-AX505WA质谱仪上，然而红外光谱是用NicoletImpact400来进行测量的。微米级熔点环境监测仪被用来测定该化合物的熔点，JASCODIP-370数字旋光计用于测定该化合物的旋光度。我们用Merck公司生产的20厘米长，0.25毫米厚的硅

胶60F254薄层色谱板测定TCL比移值，采用氯仿-甲醇（96：4）系统作为洗脱剂进行洗脱，最后该化合物可以在香草醛和硫酸（5%w/v）的甲醇溶液中溶解并且可以对其进行直观的分析。

2.1真菌材料:

实验的真菌是从生长于波兹曼和蒙大拿的矮叶红豆杉的树皮中得到的。这些真菌材料是从培养着几片叶子的培养基上经几次转移的菌丝体中挑选出来的。这些真菌属于拟盘多毛孢属。小的琼脂培养基被转移到包括以下成分的液体培养基中：1毫克生物素，1毫克硫胺素，1毫克钙补充剂，1毫克pyrodoxin，3.6毫克MgSO4，6.5毫克Ca(NO)2，1毫克Cu(NO)2，2.5毫克ZnSO4，5毫克MnCl2，2毫克FeCl3，5毫克苯基丙氨酸，100毫克苯甲酸钠盐，1克葡萄糖，3克果糖，6克蔗糖，1克醋酸钠，1克(Bacto)Soytone以及1毫升每公升1摩尔的KH2PO4，是该液体培养基在26℃的条件下培养46天，即可。

2.2提取与分离:

培养剂是经棉花过滤后的液体培养基中的液体（4L），该液体用CHCl2(2L)提取再用硅胶（2×3cm）进行分离提纯并真空浓缩后的质量为628毫克。将色谱柱中的极性调整为氯仿-甲醇（95：5）后接受洗脱剂的量每瓶约2.5ml。通过对每个小瓶中的液体用旋转蒸发仪进行旋蒸，发现有黄色油状物质的存在，经过称量该化合物的质量为56毫克。而该化合物在水-乙醇系统中可出现结晶现象，最后得到纯的化合物为50.05毫克。2a-Hydroxyisodrimeninol(l).：

比移值0.14。固态结晶，熔点74℃，[a]22D-18.5°(c0.88,MeOH);红外υmax(KBr)3550-3150,2927,1020cm-1;lH-NMR(CDCl3,TMS,600MHz)δ0.86(3H，s，H-15)，0.94(3H，s，H-14)，0.96(3H,s,H-13),1.21(lH,dd,J=12.2,11.8Hz;H-3a),1.23(lH,dd,J=12.4,11.8Hz;H-la),1.28(lH,dd,J=11.6,5.1Hz,H-5)1.81(lH,ddd,J=12.2,3.9,2.5Hz;H-3β),1.89(lH,dd,J=16.5,11.6Hz;H-6β),2.13(lH,ddd,J=12.4,3.9,2.5Hz;H-1β),2.14(lH,p.d,J=16.5Hz,H-6a),2.29(lH,p.s,H-9)3.90(lH,dddd,J=11.8,11.8,3.9,3.9Hz;H-2),4.17(lH,d,J=5.7Hz,H-12a),4.48(lH,d,J=5.7Hz,H-l2b),5.28(lH,d,J=2.4Hz,H-11),5.51(lH,p.s,H-7);13C-NMR(CDCl3,TMS,300MHz)δ14.9(q,C-15),22.4(q,C-14),23.5(t,C-6),33.1(q,C-13),34.5(s,C-4),35.0(s,C-10),48.6(t,C-1),49.1(d,C-5),51.1(t,C-3),61.1(d,C-9),64.5(d,C-2),68.6(t,C12)99.0(d,C-11),117.1(s,C-8),136.2(d,C-7);HREIMSm/z234.1619(calcdforC15H22O2:234.1620);FABMS(glycerolmatrix)m/z235([M+H]+-18,217,93.

2.3X-射线晶体衍射分析[10]：

化合物1的具体结构是用单晶X-射线晶体来鉴定的。化合物1的晶体类型属于斜方晶体系，它的各种数值为：

P212121(Z=4),α=10.275(2),b=16.021-(3)Ǻ,с=26.656(5)Ǻ,V=4388(2)Ǻ3,化合物1结构的测定应用了的是目前最直接最简单的方法。在X-射线晶体衍射中通过full-matrixleast-squares的方法在2,354处(I>2a-(I))进行测定，测定的结果是氢原子没有非单折射性，而且氢原子的单折射性位置与计算的结果相同。最后得到的结果中R因子是4.9%，用于反应的质量以SHELEX93为标准计算。

2.4致谢:

这项研究工作是在康奈尔NIHCA24487的大力支持下完成的再此表示诚挚的感谢！

2.5所提供的信息支持:

晶体学数据，原子坐标，化何物1的键长和键角，以及参考的现行的和正准备发行的资料。

参考文献

[1]Stierle,A.;

[2]

submitted

[3]Hurd,R.E.;John,B.K.J.Magn.Reson.1991,91,648.

[4]Wilker,W.;Leibfritz,D.;Kerssebaum,R.;Bermel,W.Magn.Reson.Chem.1993,31,2

87.

[5]Hurd,R.E.J.Magn.Reson.1990,87,422.

[6]Jacobsson,U.;Muddathir,K.Phytochemistry1992,31,4207.

[7]Ayer,W.A,;Craw,P.A.Can.J.Chem.1989,67,1371.

[8]Butler.M.S.;Capon,R.J.Aust.J.Chem.1993.46.1255.

[9]Tozyo,T.;Yasuda,F.;Nakai,H.;Tada,H.J.Chem.Soc.PerkinTrans.11992,1859.

[10]Atomiccoordinates,thermalparameters,bonddistancesandangles,andobservedand

calculatedstructurefactorshavebeendepositedwiththeCampidgeCrystallographicDataCentreandcanbeobtaineduponrequestfromDr.OlgaKennard,UniversityChemicalLaboratory,12UnionRoad,CampidgeCB2lEZ,UK.Strobel,G.;Stierle,D.Science1993,260,214.Pulici,M.;Sugawara,F.;Koshino,H.;Uzawa,J.;Yoshida,S.;Lobkovsky,E.;Clardy,J.

附件2：外文原文

河北科技大学继续教育学院学生毕业设计（论文）中期检查表学生姓名尹雪梅

课题名称

选题情况难易程度

工作量

任务书

符合规范化

的要求开题报告

外文翻译

质量

学习态度、

出勤情况

工作进度

中期工作汇

报及解答问

题情况好快√偏难较大有有优一般按计划进行√良√√√中差慢学号16指导教师夏万东珊瑚菜的化学成分及其生物活性研究适中合理√√无无差偏易较小优√良中差

中期成绩评定：良

所在专业意见：

同意

负责人：2011年10月15日

河北科技大学继续教育学院毕

学生姓名：院

专

题站：业：目：业尹雪梅论学号：文16号河北科技大学承德函授站药学珊瑚菜的化学成分指导教师：评阅教师：夏万东2011年11月30日

毕业设计（论文）成绩评定表姓

专

题名业目尹雪梅药学珊瑚菜的化学成分及其生物活性研究学号16成绩82

指

导

教

师

评

语

及

成

绩文章结构比较合理，条理清晰，有一定的逻辑性，语言流畅、表达清楚。该论文内容较为全面、具体，评述得当，有一定的实用性。具有一定的药学理论基础和专门知识。但作者自己的观点不够明确，文中个别地方文字和标点的使用尚缺规范。指导教师：夏万东

2011年12月10日

评

阅

教

师

评

语

及

成

绩

答

辩

小

组

评

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见论文结构合理，文章层次分明，语言较为流畅、准确，图表清晰、比较规范，达到毕业论文规范化要求。评阅教师：钟正伟2011年12月10日该生态度端正、尊重老师，能比较流利、能较恰当地回答与论文有关的问题。答辩小组组长：夏万东2011年12月10日同意学院答辩委员会主任：王永良

2011年12月10日

注：该表一试两份，一份归档，一份装入学生毕业设计说明书（论文）中。

北沙参为伞形科濒危植物珊瑚菜（Glehnialittoralis）的干燥根。它不但具有极高的营养价值和药用价值，还具有较好的防癌抗癌作用。北沙参主要含香豆素类和糖类化学成分，其他还有挥发油、生物碱、磷脂、氨基酸、微量元素及佛手柑内酯等。本实验选择山东莱阳北沙参作为研究对象进行活性物质的提取、分离和结构鉴定，期望从中能够发现新的有活性的化合物。

本论文实验对其95%的乙醇浸膏的石油醚和乙酸乙酯萃取出的有机相部分运用硅胶柱层析、凝胶过滤除杂、薄层层析分离、结晶和重结晶等方法进行化学成分的分离提取和纯化,并利用波谱学方法对其进行结构鉴定，最终从样品中共分离了2个不同的化合物。

关键词北沙参分离提取层析波谱技术豆甾醇香柠檬内酯

毕业论文

目录

1前言...........................................................................................................................................1

1.1生物学特性..........................................................................................................................1

1.2药材性状..............................................................................................................................1

1.3药理作用和临床应用.......................................................................................................12实验部分...................................................................................................................................3

2.1实验材料与方法..................................................................................................................3

2.1.1实验材料..........................................................................................................................3

2.1.1.1实验样品......................................................................................................................3

2.1.1.2试剂..............................................................................................................................3

2.1.1.3显色剂..........................................................................................................................3

2.1.1.4仪器及设备..................................................................................................................3

2.1.2实验方法..........................................................................................................................3

2.1.2.1硅胶柱层层析..............................................................................................................3

2.1.2.2凝胶过滤层析..............................................................................................................4

2.1.2.3薄层层析......................................................................................................................4

2.1.2.4重结晶..........................................................................................................................4

2.1.3实验过程..........................................................................................................................4

2.1.3.1拌样..............................................................................................................................4

2.1.3.2装柱..............................................................................................................................4

2.1.3.3洗脱..............................................................................................................................4

2.1.3.4化合物结构鉴定..........................................................................................................5

2.2实验结果与讨论..................................................................................................................6

2.2.1实验结果..........................................................................................................................6

2.2.1.1化合物1.......................................................................................................................6

2.2.1.2化合物2.......................................................................................................................6

2.2.2总结..................................................................................................................................7结

致论.........................................................................................................................................8谢.........................................................................................................................................9参考文献...................................................................................................................................10

毕业论文

1引言

1.1生物学特性

北沙参植株低矮，高度在20-30厘米之间，叶密集，基生，成卵形或宽三角形卵形，三出式羽状分裂或2-3回羽状深裂，鞘状长叶柄红紫色，茎上部叶片卵形，叶边缘具三角形圆锯齿，叶表面浓绿，有光泽，略带革质，叶背面分布明显掌状叶脉，色淡，生有灰褐绒毛。北沙参为复伞形花序，生长于植株顶端，花小白色。北沙参的果实为双悬果，近似球形或椭圆形，密被棕色刺状软毛，具木栓化果棱，5棱，翅状。北沙参的种子细小，早扁圆状，一般千粒重24.5克左右。种子寿命较短，只有1年，贮藏保管好，可延至2年，但发芽能力降低，种子还具有低温后熟的特性。北沙参为直根系植物，其主根和侧根区分十分明显。主根细长，扎得深，可达40厘米以上，在主根上着生细小须根[3]。

1.2药材性状

北沙参以根条细长，均匀色白，质坚实者为佳。莱阳沙参的优良品质除当地水土因素外，还与精细加工有关。特别是出口沙参，在普通加工的基础上，再经拣、蒸、搓、刮等特殊工序而成。根条单枝细长顺直，头尾大小匀顺，皮纹细嫩，长30cm以上，直径0.3～0.4cm，体质坚实而脆，色白或淡黄而均匀，约20条扎成一小把，商品称“莱胡参”(即莱阳胡城产北沙参)，或叫“小子沙参”[2]。北沙参果实含有珊瑚菜素、脂

[7][8]肪油，主要脂肪酸有伞形花子油酸、棕搁酸、大量亚油酸及微量异伞形花子油酸，鲜果实含欧前胡素和佛手柑内酯，温室生长的植株含有佛手柑内酯、欧前胡素等。它的

营养价值和药用价值极高，自古以来就作为一种重要的中药材而广为应用及研究。

1.3药理作用和临床应用

(1)治肺热咳嗽现代医学研究证明，沙参麦冬汤治疗慢性咽炎、燥咳、肺结核、小儿迁移性肺炎、小儿咳喘等病症均有较好的作用。

(2)调节免疫功能临床研究表明，沙参麦冬汤治疗阴虚症黄疽、沙参消渴方治疗

北沙参的正己烷、乙醚和乙酸乙酯提取物，均两虚型搪尿病等有较好疗效[5]。(3)抗促癌、抗突变及抗肿瘤作用

能够抑制佛波酯引起的无机磷渗入HeLa细胞的磷酯中，并且证明，在体内具有抗促癌作用。北沙参的水或乙醇浸出液对三种致突变剂诱导的突变株回复突变有良好的抑制效果，表明北沙参中含有抗突变成分[5]。

(4)抗真菌作用采用肉汤稀释法测定北沙参中所含香豆素及聚炔类的最低抗菌浓度(MIC),结果表明,补骨脂素、佛手柑内酯以及花椒毒素等香豆素成分在400µg/mL浓度

[4]

以下无抑菌活性。聚炔类成分falcarindiol具有很强的抗格兰氏阳性菌的活性(MIC：

2.5～25.0µg/mL)；而另两种聚炔类成分(9Z)-十七碳-1,9-二烯-4,6-二炔-3,8,11-三醇和(10E)-十七碳-1,10-二烯-4,6-二炔-3,8,9-三醇的抑菌活性很弱(MIC：200～400µg/mg)。

(5)解毒杏叶沙参解百药毒、止痛、治蛇虫咬，疗疮肿毒等，临床用于治疖痈[6]。

近年来，奥山等研究了产于日本的北沙参的镇痛和镇静作用,

[5][1](6)镇痛和镇静作用结果表明北沙参的甲醇提取物经口服给药，能够延长戊巴比妥诱导的睡眠时间。进一步研究表明，其中的聚炔类成分，以及香豆素类化合物，具有显著的镇痛作用。

2实验部分

2.1实验材料与方法

2.1.1实验材料

2.1.1.1实验样品

北沙参（Glehnialittoralis），采集于山东莱阳。

2.1.1.2试剂

石油醚、乙酸乙酯、丙酮、无水乙醇、香草醛、浓硫酸、蒸馏水、甲醇、氯仿、无水硫酸钠等。

2.1.1.3显色剂

香草醛显色剂：2.5g香兰素（香草醛）、100ml蒸馏水、40ml浓硫酸、50ml无水乙醇。

硫酸显色剂：95%硫酸和无水乙醇（25:475）。

碘显色剂：碘与硅胶1:1混合。

2.1.1.4仪器及设备

高效液相色谱仪、BUCHIR-210旋转蒸发仪、水浴锅B-491、真空泵V-700、薄层层析硅胶板、GF254自制硅胶板、SephadexLh-60凝胶、飞利浦电吹风机、电子万用炉、电子天平、TN型托盘式扭力天平（100g,0.01g）、ZF7三用紫外分析仪、BrukerAM-400和BrukerDRX-500核磁共振仪、VGAutoSpec-3000质谱仪、手动加压球、分液漏斗、玻璃漏斗、锥形瓶、加压泵、电磁式空气压缩机、镊子、直尺、玻璃棒、滤纸、棉花、毛细管等。

以下为合作实验室有机波谱分析仪器：Bio-RadFTS-135红外光谱仪，UV-210紫外分光光度计，VGAutoSpec-3000质谱仪，BruckerAM-400和DRX-500核磁共振仪。

2.1.2实验方法

在本实验中我们使用了硅胶柱层析、凝胶过滤层析、制备薄层层析和重结晶等多种分离提取的方法。提纯化合物后，采用质谱、红外光谱、紫外光谱等波谱技术来鉴定这些化合物的结构。

2.1.2.1硅胶柱层析

硅胶柱层析其吸附本质属于物理吸附。被分离化合物及溶剂分子与吸附剂表面分子的分子间力的相互作用所产生。吸附强弱及先后顺序都大体遵循“相似者易于吸附”原理[12]。被分离的物质与吸附剂，洗脱剂共同构成吸附层析中的三个要素，彼此紧密相连。

2.1.2.2凝胶过滤层析

凝胶过滤层析（Gelfiltrationchromatography，GFC）是把凝胶粒子（通常称为

凝胶过滤介质）作为固定相，根据料液中溶质相对分子质量的差别进行分离的一种液相层析法，又叫分子筛层析[9]。

2.1.2.3（制备）薄层层析

薄层层析(ThinLayerChromatography)是将吸附剂、载体或其他活性物质均匀涂铺在平面板（如玻璃板、金属片等）上，形成薄层（常用厚度为0.25毫米左右）后，在此薄层上进行层析分离的分析方法，薄层层析常用TLC表示。此法特别适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质[10]。

2.1.2.4重结晶

结晶（Cystallization）是从液相或气相生成形状一定、分子（或原子、离子）有规则排列的晶体（Crystal）的现象[11]。重结晶（recrystallization）是将晶体溶于溶剂或熔融以后，又重新从溶液或熔体中结晶的过程，又称再结晶。重结晶可以使不纯净的物质获得纯化，或使混合在一起的盐类彼此分离。

2.1.3实验过程

2.1.3.1浸膏的制备

称量准备用来盛置浸膏的瓶子的重量，加入浸膏后再称量总体重量，从而得到样品浸膏的重量。

向乙醇浸膏中添加蒸馏水，摇匀，然后加入石油醚或乙酸乙酯进行萃取：将混合液体放置于分液漏斗中，静置24小时，最后得到石油醚/乙酸乙酯部分和水溶性部分。重复进行一次，合并水溶性部分，置于锥形瓶中，保存于冰箱中。石油醚/乙酸乙酯溶部分减压浓缩后即为所要得到的样品。

2.1.3.2拌样

将样品与硅胶按重量比1：1充分混合，使样品充分吸附于硅胶上，待溶剂挥发完全后准备上样。

2.1.3.3装柱

上柱有干法上柱和湿法上柱两种。本论文实验中采用的是干法上柱。即把硅胶粉末直接装入柱中，轻轻敲打柱子两侧，至硅胶界面不再下降为止，再填入硅胶至合适高度，然后用循环水泵抽一下，同时用橡胶塞子不断敲打玻璃柱，以使硅胶中的空气排除和使硅胶表面平整。装好柱后，加入洗脱剂将柱子冲洗流实。

2.1.3.4上样

把拌好的样品通过长直筒加到已经装好的层析柱中，然后将下面的活塞打开。先用滴管加洗脱剂，当样品层全部润湿后，再采用倾倒法加入洗脱剂。为避免溶剂夹带样品过快下行需等溶剂的上液面和样品层的上表面之间产生一段距离时再加压。

2.1.3.5洗脱

洗脱剂须根据被分离物质与所用的吸附剂性质加以考虑。以硅胶作为吸附剂时常用

的混合洗脱剂有：石油醚-乙酸乙酯；石油醚-丙酮；氯仿-乙酸乙酯；氯仿-丙酮；氯仿-甲醇等等。

2.1.3.6化合物的结构鉴定：

通过1H-NMR，13C-NMR等方法确定该化合物的结构。

北沙参分离提取流程如图2-1

北沙参95%乙醇提取物（浸膏）

有机溶剂萃取

有机溶剂部分水部分

硅胶柱层析

洗脱剂：（石油醚/乙酸乙酯）

组分1组分2

反复使用各种柱层析制备薄层

单体化合物

有机波谱技术

确定结构

图2-1北沙参分离提取流程图

2.2实验结果与讨论

2.2.1实验结果

2.2.1.1化合物1

洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯15：1（V/V）时，由大层析柱洗脱下层析液，静置一段时间后出现结晶。通过重结晶，得到无色针状晶体。荧光不显色，碘显色，香草醛显

蓝紫色。点板如下图：图2-2化合物1薄层层析图HO

图2-3化合物1的结构图

2.2.1.2化合物2

洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯5：1（V/V）时，由大层析柱洗脱下层析液，静置一段时间后出现结晶，通过重结晶，得到白色针状晶体。254nm紫外光下显蓝色，碘显色，

香草醛显蓝色。点板如下图：

图2-4化合物2薄层层析图

3O图2-5化合物2的结构图

2.2.2总结

实验中应注意的问题：

（1）要注意薄层层析Rf值的选择，一般选择为0.5左右。

（2）凝胶过滤时，洗脱剂流速不能太快。

（3）在实验前要根据样品的重量选择好层析柱的规格。

（4）在制作制备薄层GF254板时，要求表面平整，厚薄均匀。

结论

北沙参主要含香豆素类和糖类化学成分。果实含有珊瑚菜素、脂肪油等。本试验主要是对野生北沙参的化学成分进行了提取分离，并对提取出的化合物进行了结构鉴定，从而得出关于北沙参的药用价值的有用结论，为其进一步的科学利用提供依据。提供一定的理论依据。

本实验主要是通过95％乙醇萃取，硅胶柱层析，凝胶过滤，薄层层析，结晶，重结晶等技术对北沙参的化学成分进行了提取分离。最后对提取分离出的化合物进行结构鉴定。经鉴定其中两种化合物为豆甾醇和香柠檬内酯。

致谢

本论文的实验和撰写工作是在我的老师悉心指导下完成的。老师渊博的知识，严谨的治学态度，敏捷的思维将使我终生受益。

在将近两个月的实验过程中，得到了很多老师和同学的帮助。感谢大家在实验过程中和平日的生活中给予的指导、帮助和关心。

最后，还要感谢在我的大学生活中，对我的学习和生活有过帮助的所有老师和同学们。

参考文献

1

62~63

2

3

4

5余椿生．北沙参．食品与药品．2005年第7卷第4A期，43~44乔勇进,房用．珍贵的沙生药用植物－北沙参．植物杂志，2006年第01期，21清·吴瑭．温病条辨，卷一林喆,赵亚,原中．北沙参的化学成分及药理作用研究进展．中国中医药信息杂耿增岩,乔逸,杨晓青．北沙参的研究进展．现代中医药，2006年第26卷第6期，志，2007年7月第14卷第7期，91~92

6

7明·李时珍．本草纲目，第五十二卷李宝国,石俊英．近十年来北沙参的研究概况．时珍国医国药，2002年第13卷第5期，309~310

8李宝国,石俊英．HPLC法同时测定北沙参不同部位中3种香豆素的含量．山东中医药大学学报，2005年第29卷第5期，383~385

9谭仁祥．植物成分分析．北京：科学出版社，2002年2月第1版，76~8610何华，倪坤仪.现代色谱分析.北京：化学工业出版社，2004年2月第1版，1~3711孙彦．生物分离工程．北京：化学工业出版社，1998年10月第1版，243~26412YuanZ,KadotaS,LiX.BiphenylFerulatefromGlehnialittoralis.ChemLett,2002,13(9)：865~866

毕业设计（论文）成绩评定表姓

专

题名业目尹雪梅药学珊瑚菜的化学成分及其生物活性研究学号16成绩82

指导

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评

语

及

成

绩文章结构比较合理，条理清晰，有一定的逻辑性，语言流畅、表达清楚。该论文内容较为全面、具体，评述得当，有一定的实用性。具有一定的药学理论基础和专门知识。但作者自己的观点不够明确，文中个别地方文字和标点的使用尚缺规范。指导教师：夏万东

2011年12月10日

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见论文结构合理，文章层次分明，语言较为流畅、准确，图表清晰、比较规范，达到毕业论文规范化要求。评阅教师：钟正伟2011年12月10日该生态度端正、尊重老师，能比较流利、能较恰当地回答与论文有关的问题。答辩小组组长：夏万东2011年12月10日同意学院答辩委员会主任：王永良

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注：该表一试两份，一份归档，一份装入学生毕业设计说明书（论文）中。