[微波辅助提取葛根黄酮工艺的优化] 心纳葛根黄酮软胶囊
摘要：为了优化微波辅助提取葛根黄酮的工艺，通过单因素试验和正交试验研究微波辅助提取葛根黄酮的最佳工艺条件。结果表明，微波辅助提取葛根黄酮的最佳工艺条件为液料比３５∶１（Ｖ／ｍ，ｍＬ：ｇ），提取时间１３ ｍｉｎ，微波温度７５ ℃，乙醇体积分数５０％，此条件下葛根黄酮的提取率最高，为７．３１％。
关键词：葛根；黄酮；微波法；工艺优化
中图分类号：Ｓ５６７；Ｒ２８４．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）16－3572-03
Optimization of Microwave-Assisted Extraction Process of Flavonoids from Radix Puerariae
ＬＩ Ｘｉｎｇ－ｙｕａｎ1，2，ＣＨＥＮ Ｇｕｏ－ａｎ1
（１． Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｈｕａｎｇｇａｎｇ Ｐｏｌｙｔｅｃｈｎｉｃ Ｕnｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｈｕａｎｇｇａｎｇ ４３８００２，Ｈｕｂｅｉ，Ｃｈｉｎａ；
２． Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｈｕｂｅｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｗｕｈａｎ ４３００６４，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｗｅｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｒａｄｉｘ ｐｕｅｒａｒｉａｅ ｂｙ ｍｉｃｒｏｗａｖｅ－ａｓｓｉｓｔｅｄ ｍｅｔｈｏｄ． Ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｗａｓ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｂｙ ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ｔｅｓｔｓ ａｎｄ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ， ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｔｏ ｒａｗ ｍａｔｅｒｉａｌ ｒａｔｉｏ， ３５∶１（Ｖ/ｍ，ｍＬ∶ｇ）； ｍｉｃｒｏｗａｖｅ－ａｓｓｉｓｔｅｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ， １３ ｍｉｎ； ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ， ７５ ℃； ｅｔｈａｎｏｌ ｖｏｌｕｍｅ ｆｒａｃｔｉｏｎ， ５０％． Ｔｈｅ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅｓｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗａｓ ７．３１％．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｒａｄｉｘ ｐｕｅｒａｒｉａｅ； ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ； ｍｉｃｒｏｗａｖｅ－ａｓｓｉｓｔｅｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ； ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ
葛根为豆科葛属植物野葛的干燥根，在中国主产于河南省、湖南省、浙江省和四川省等地［１－３］，是常用的中药材，治疗外感发热、项背强痛、口渴、麻疹不透、热痢、泄泻、高血压、颈项强痛等，具有较高的药用价值，属于卫生部公布的既是食品又是药品的物品［４－６］。现代药理研究表明，葛根素、金雀异黄素、葛根素木糖甙、大豆甙、大豆甙元等黄酮类化合物是葛根的主要有效成分［２，６，７］，具有扩张冠状动脉和脑动脉、降低血压、增加缺血组织的血液供应量、降低心肌氧耗量、减轻心肌缺血等功效；此外，葛根黄酮对更年期妇女生殖和内分泌系统、心血管系统、骨骼等方面也有积极调节作用［８－１１］。目前常用的黄酮提取方法有溶剂提取法、微波辅助提取法、超声波辅助提取法、酶解法、超临界流体萃取法等。近年来，微波辅助提取法在天然植物成分提取方面得到了广泛应用。由于微波具有穿透力强、加热效率高、选择性高等特点，微波辐射可以大大加快反应速度，具有省时、高效、节能、易操作等优点，而且由于以水或乙醇为溶剂，所以还能降低提取成本和减少污染，是一种快速、高效的分离技术［１２－１４］。故近年来微波辅助提取法在天然植物成分提取方面得到了广泛应用。研究采用微波辅助提取法提取葛根黄酮，通过正交设计优化提取工艺，以便探索葛根黄酮微波辅助提取法的最佳条件。
１ 材料与方法
１．１ 材料
１．１．１ 原料 葛根购自黄冈市当地药材市场，由黄冈职业技术学院生物技术制药教研室鉴定。
１．１．２ 仪器与试剂 芦丁购自中国食品药品检定研究所，ＸＨ－１００Ａ微波催化合成／萃取仪购自北京祥鹄科技发展有限公司，ＵＶ－１６０Ａ紫外可见分光光度计购自日本岛津株式会社，ＳＨＢ－Ⅲ循环水式多用真空泵购自郑州长城科工贸有限公司，ＲＥ５２ＣＳ旋转蒸发仪购自上海荣生仪器厂，中药粉碎机购自江阴市伟翔药化机械厂。
１．２ 方法
１．２．１ 葛根黄酮的提取 选用无破损的葛根块若干，用水洗净后再自然干燥，用中药粉碎机粉碎，过６０目筛，备用。称取１ ｇ葛根粉置于１５０ ｍＬ锥形瓶中，加入合适体积分数的乙醇溶液，搅拌均匀后浸泡５ ｍｉｎ，然后在ＸＨ－１００Ａ微波催化合成／萃取仪中按试验设计条件用８００ Ｗ进行微波辅助提取，过滤提取液，最后将滤液定容于１００ ｍＬ的容量瓶中，待测。
１．２．２ 葛根黄酮提取率的测定 精密称取１０ ｍｇ芦丁，加体积分数为９５％的乙醇溶液溶解，置于２５ ｍＬ容量瓶中，加体积分数为９５％的乙醇溶液定容，摇匀静置。取１２．５ ｍＬ上述溶液于５０ ｍＬ容量瓶中，定容，制成０．１ ｍｇ／ｍＬ芦丁对照品溶液。精密吸取芦丁对照品溶液１．０、２．０、３．０、４．０、５．０、６．０ ｍＬ，分别置于２５ ｍＬ容量瓶中，各加入体积分数为９５％的乙醇溶液至６．０ ｍＬ，然后分别加入１ ｍＬ ５０ ｇ／Ｌ ＮａＮＯ２溶液摇匀，放置６ ｍｉｎ；加入１ ｍＬ １００ ｇ／Ｌ Ａｌ（ＮＯ３）３溶液摇匀，放置６ ｍｉｎ；加入１ ｍｏｌ／Ｌ ＮａＯＨ溶液１０ ｍＬ，加去离子水定容至２５ ｍＬ，摇匀，静置１５ ｍｉｎ，于５０６ ｎｍ波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，以芦丁浓度为横坐标，得标准曲线（图１）。通过线性回归，得吸光度与芦丁浓度的关系为Ａ＝０．０２９ ７Ｃ－０．００２ ０，ｒ＝０．９９９ ８；式中，Ａ——吸光度；Ｃ——芦丁浓度，μｇ／ｍＬ。