菠菜体内亚硝酸盐累积规律研究 亚硝酸盐对人体的危害

　　菠菜为藜科一二年生草本蔬菜。原产波斯，曾被阿拉伯人誉为“蔬中之王”，唐朝时由尼泊尔传入我国。菠菜耐寒性强，在我国各地均有栽培，栽培方式多样，如越冬茬栽培，秋茬栽培，春茬栽培，夏茬栽培，日光温室栽培等，目前已做到了四季栽培，周年供应。菠菜的类型有圆叶菠菜和尖叶菠菜，而以尖叶菠菜更受到大众的欢迎，因其主根肉质，粉红色，有甜味，叶肉稍薄，纤维较少，品质较佳。
　　硝态氮是植物吸收的主要氮源之一，以硝酸盐的形式广泛存在于环境中。硝酸盐，在微生物的作用下被还原为亚硝酸盐。亚硝酸盐本身并非致癌物，但它在适宜条件下与胺(特别是仲胺和酰胺)作用可合成亚硝胺或亚硝酰胺，此物为强致癌物(彭青，陈宏，1998)。在已发现的120多种亚硝胺化合物中，验证有75％的亚硝胺具有致癌性(陈振德，1989)。
　　随着社会的进步，人们生活水平的提高，食品安全受到广泛的关注，农产品、尤其是蔬菜的质量，已成为各级政府及群众关心的头等大事。亚硝酸盐是影响蔬菜质量的重要因素之一，在人体内会引起高铁血红蛋白症，还能与人体次级胺结合形成亚硝胺有致癌作用。
　　亚硝酸盐污染较严重的是叶菜类，而叶莱类中菠菜的污染最为严重。本试验以氮肥种类、氮肥施用量、光照度、贮藏温度等为主要影响因素，对菠菜体内亚硝酸盐含量及其日变化规律、衰减速率等进行了研究，以图探索菠菜植株体内亚硝酸盐的累积规律，为菠菜的无公害生产提供参考。
　　材料与方法
　　试验材料
　　供试土壤
　　土壤处理　去除30cm温室表层土壤，铺设2层聚氯乙烯塑料薄膜，移入30cm露地表层土壤作为试验用土壤。
　　土壤采集　定植前用对角线法取土(0～30cm)，采20个点的土样，在塑料袋里混匀剔除石块等异物。农化性状见表1。
　　供试灌溉水
　　供试灌溉水用自来水，其亚硝酸盐含量为2mg/L。
　　供试品种
　　供试品种为日本大叶菠菜，由山西晋生种子实业有限公司提供。
　　供试氮肥种类
　　硝酸钾：由山西省文水县化工厂提供，纯度为99％：
　　尿素：由上海公私合营新中化工厂提供，纯度为99.98％：
　　碳酸铵：由上海公私合营新中化工厂提供，纯度为99.99％。
　　试验方法
　　供试样品及测试项目和方法
　　◆种子处理为提高发芽率，播种前浸种12h，搓去粘液，捞出沥干，于恒温箱20℃催芽，露白后播种。
　　◆播种方法及播种量采用条播法，行距15cm，开沟深度5～6cm，播前先浇水，然后将种子直播于沟内，覆土轻轻镇压，播后保持土壤湿润。播种量是10kg/667m2。
　　◆田间管理　越冬菠菜出苗后在不影响正常生长的前提下，适当控制浇水使根系向纵深发展。2～3片叶后，生长速度加快，要随浇水施用硝酸钾、尿素、碳酸铵各30g/m2、20g/m2、1Og/m2，然后浅中耕、间苗、除草。时刻保持地表见干见湿。
　　◆样品采集及预处理
　　样品采集：当菠菜长至15～20cm时开始采集样品，每个处理的样品各采集3份(即每小区各采1份)，以减小实验误差。
　　样品预处理：将采集的新鲜菠莱用塑料袋带回实验室，立即用自来水冲洗干净，再用蒸馏水冲洗一次，晾去表面水分，用四分法取可食部分，切碎，按比例加入一定量水，用捣碎机制成匀浆，在称取试样时，扣除加水量。
　　◆测定方法
　　N元素：凯氏定氨法；
　　P元素：钒钼蓝比色法；
　　K元素：采用原子吸收分光光度仪测定；
　　硝态氮：酚二磺酸比色法；
　　铵态氮：靛酚蓝比色法；
　　亚硝酸盐(水中)：GB/T　7493－87；
　　亚硝酸盐(菠菜)：GB/T　15401－94。
　　试验设计
　　◆氮肥施用量对菠菜体内亚硝酸盐含量的影响
　　试验方法：本试验采用硝酸钾、尿素、碳酸铵三种氮素肥料，每种肥料分别以三个处理浓度(30g/m2、20g/m2、10g/m2)随水冲施，上午10：00施肥，次日10：00对各处理进行测定各小区采两份试样然后取其平均值。
　　菠菜体内亚硝酸盐含量的测定(GB/T　15401－94)：将采集的新鲜菠菜用塑料袋带回实验室，立即用自来水冲洗干净，再用蒸馏水冲洗一次，晾去表面水分，用四分法取可食部分，切碎，按比例加入一定量水，用捣碎机制成匀浆，然后准确称取匀浆10g，放入200mL烧杯中，加入5mL饱和硼砂溶液和100mL(70～80℃)热水：置沸水浴中，加热15min，并不断摇动。取出后冷至室温，再加入10mL亚铁氰化钾溶液，乙酸锌10mL和2g活性炭粉，然后定量转入200mL容量瓶中，用水定容。用折成槽纹的滤纸过滤，得无色清亮提取液，722分光光度计测定。
　　◆氮肥种类对菠菜体内亚硝酸盐含量的影响
　　试验设计采用3因素、3水平，设9个处理，3次重复，共27个小区，小区面积为1m2，各处理分别是硝酸钾30g/m2、硝酸钾20g/m2、硝酸钾10g/m2；尿素30g/m2、尿素20g/m2、尿素1Og/m2；碳酸铵30g/m2、碳酸铵20g/m2、碳酸铵10g/m2，氮素肥料随水冲施。同一氮肥种类的3个不同处理浓度在同一时间测其菠菜体内亚硝酸盐的含量，取其平均值作为参数。
　　◆贮藏温度对菠菜体内亚硝酸盐含量的变化
　　试验方法：采用硝酸钾(30g/m2)处理的菠菜作为本试验的检测试样，每小区各采两份，一份当天于实验室测定，另一份作为贮藏材料次日测定。
　　贮藏条件：分三个贮藏温度处理，冰箱密封贮藏0℃、10℃和自然密封贮藏25℃，贮藏24h。