ＨＢＶ　Ｘ基因转化人肝细胞的实验研究:基因X

　　摘要：选取已稳定转染HBV X基因的QSG7701细胞(pCMV X/QSG7701)，并以稳定转染空质粒pRc/CMV2的QSG7701细胞(pRcCMV2/QSG7701)及未转染的QSG7701细胞为对照，用免疫荧光方法检测pCMV X/QSG7701细胞中HBX蛋白的分布；用RT-PCR方法和免疫细胞化学法分别检测细胞中c―Mvc表达：用光镜及电镜观察细胞形态学变化，进一步研究乙肝病毒(HBV)X基因对永生化非瘤性人肝细胞0SG770l的转化作用。研究发现，乙肝病毒X(HBX)蛋白主要分布在细胞膜及细胞浆；c-Myc mRNA及c-Myc蛋白在3种细胞中均有表达，但转染了X基因的细胞中c。Myc的表达水平较其他两组明显升高(P＜0.01)：光镜和电镜下观察发现pCMVX，QSG细胞的胞核较大，核膜增厚，核仁肥大且增多，核／浆比例失调，可见少量多核巨细胞。pRc-CMV2，QSG7701细胞与QSG7701细胞核浆比正常，染色质分布均匀，胞核大小及形态正常。结果表明，HBV X基因成功转染了QSG7701细胞，HBV X蛋白主要分布于转染细胞的细胞膜和细胞浆中。HBX可能通过上调转染细胞中c-Myc蛋白的表达而使细胞具备恶性化生长的倾向。
　　关键词：乙肝病毒；X蛋白；转化；人肝细胞
　　中图分类号：R575/3
　　文献标识码：A
　　文章编号：1007－7847(2008)02－0179－05 本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文