【GC法测定阿奇霉素原料中三氯甲烷的残留量】自来水中为什么会残留三氯甲烷

　　【摘要】目的建立毛细管气相色谱法测定阿奇霉素中三氯甲烷残留量的方法。方法色谱柱为DB624石英　　毛细管柱，载气为氮气，柱温采用程序升温，检测器为ECD检测器，以N,N二甲甲酰胺为溶剂。结果三
　　氯甲烷检测浓度的线性范围为06～60 μg/ml，平均回收率为995%，定量限为098pg。3批样品中三
　　氯甲烷残留量均符合规定。结论本方法简单、准确、可用于阿奇霉素原料中三氯甲烷残留量的测定。
　　【关键词】气相色谱法；阿奇霉素；三氯甲烷
　　作者单位：050011石家庄,河北省食品药品检验院阿奇霉素(Azithromycin)是由红霉素衍生的15元大环内
　　酯类广谱抗生素，具有优于母体化合物的生物活性和药理特性。阿奇霉素制备工艺中用到了三氯甲烷，
　　根据《中国药典》2010年版［1］的规定，应建立三氯甲烷的测定方法，考察样品中三氯甲烷的残留量，
　　并应符合三类溶剂残留限度要求。本文参考相关文献［2，3］介绍的方法，建立了毛细管气相色谱法测
　　定阿奇霉素中三氯甲烷残留量的方法。可为药品标准增订残留溶剂检查项提供科学依据。
　　1仪器与试药
　　Agilent 6890型气相色谱仪，SartoriusBP211 d型电子天平。三氯甲烷对照品和色谱纯N,N二甲基甲酰
　　胺均购自美国Sigma公司。阿奇霉素(国内S公司，批号：20110601、20110602、20110603)。载气为高纯
　　氮气(纯度大于99999%)。
　　2方法和结果
　　21色谱条件色谱柱为DB624毛细管柱(60 m 530 μm 3 μm)，柱温：80℃维持5 min，以35℃/min的
　　速率升至220℃，维持10 min；分流进样方式，分流比为10∶1，进样口温度为180℃；采用ECD检测器，
　　检测器温度为300℃，尾吹25 ml/min；载气为氮气，流速为45 ml/min，进样量为1 μL。
　　22溶液的制备
　　221对照品溶液精密称取三氯甲烷对照品约12 mg，置200 ml容量瓶中，用N,N二甲基甲酰胺稀释至
　　刻度，摇匀，精密量取10 ml，置100 ml容量瓶中，用N,N二甲基甲酰胺稀释至刻度，摇匀，作为对照
　　品溶液。
　　222供试品溶液精密称取本品约10 g，置10 ml容量瓶中，加N,N二甲基甲酰胺溶解并稀释至刻度
　　，摇匀，即得。
　　23系统适用性试验取“22”项下的对照品溶液和供试品溶液，按“21”项下的色谱条件注入气相
　　色谱仪，记录色谱图。结果三氯甲烷的理论板数为30029，溶解介质(N,N二甲基甲酰胺)不干扰三氯甲
　　烷的测定。
　　24线性关系取三氯甲烷对照品，分别用N,N二甲基甲酰胺配置成浓度为06、12、60、120、
　　240、600 μg/ml的溶液，按“21”项下的色谱条件注入气相色谱仪，记录色谱图，以峰面积(A)
　　为纵坐标，浓度(C)为横坐标，进行线性回归，线性方程为：A=102589 c+88077，相关系数为：r=0
　　9999，线性范围为：06～60 μg/ml。
　　25精密度试验取三氯甲烷对照品和一批阿奇霉素原料药(批号：20110601)，按“22”项下的方法制
　　备对照品溶液和供试品溶液，对照品溶液制备1份，供试品溶液平行制备6份，按“21”项下的色谱条
　　件注入气相色谱仪，对照品溶液连续进样6次，三氯甲烷对照品溶液峰面积的RSD为10%，按外标法计算
　　三氯甲烷的残留量，结果3批样品中三氯甲烷均未检出。表明精密度良好。
　　26定量限试验精密称取三氯甲烷对照品，加入N,N二甲基甲酰胺逐级稀释制成适宜浓度的对照品溶液
　　，按“21”项下的色谱条件注入气相色谱仪，当信噪比约为10时计算三氯甲烷的定量限，结果定量限
　　为098pg。
　　27回收率试验分别称取同一批阿奇霉素原料药(批号：20110601)各约05 g，共9份，精密称定，分别
　　置5 ml容量瓶中，分别加入006 mg/ml的对照品溶液040 ml、050 ml、060 ml，各3份，再分别
　　用N,N二甲基甲酰胺溶解并稀释至刻度，摇匀，按“21”项下的色谱条件注入气相色谱仪，按外标法
　　以峰面积计算，三氯甲烷的平均回收率为995%，RSD分别为06%。
　　28样品中三氯甲烷的残留量测定取三氯甲烷对照品和3批样品，按“22”项下的方法制备对照品溶液
　　和供试品溶液，按“21”项下的色谱条件注入气相色谱仪，按外标法以峰面积计算三氯甲烷的残留量
　　，结果3批样品中三氯甲烷均未检出。
　　3讨论
　　DB624是中极性毛细管柱，适用于多核芳烃、酚、酯、碳氢化合物、药物及醇等，比较适合用于残留溶
　　剂分析。在该研究条件下三氯甲烷和溶解介质可达到有效分离，且峰形好，灵敏度高，重现性好。
　　《中国药典》2010年版性状项下规定：阿奇霉素在甲醇、丙酮、三氯甲烷、无水乙醇或稀盐酸中易溶，
　　在乙腈中溶解，在水中几乎不溶。由于本文采用直接进样方式，尝试用DMF和DMSO作溶剂，样品在两溶剂
　　中的溶解性均较好，选择沸点较低的DMF作溶解介质。DMF对三氯甲烷有较好的溶解与提取能力，因其沸
　　点高(1528℃)，在色谱柱上保留时间长，可使挥发性较强的三氯甲烷(沸点为61～62℃)先出峰，并且
　　选择程序升温大大缩短了分析时间。
　　本方法三氯甲烷的定量限为098 pg，灵敏度完全可以满足阿奇霉素中三氯甲烷残留量测定的需要。本
　　实验测得3批样品中三氯甲烷均未检出，说明该原料药后续工艺中对三氯甲烷的去除较为完全，工艺较好
　　。
　　参考文献
　　［1］国家药典委员会中华人民共和国药典(二部)北京:化学工业出版社，2010:6165.
　　［2］宋更申,郭毅,付焱,等 毛细管气相色谱法测定盐酸美金刚原料中三氯甲烷的残留量中国药
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　　［3］宋更申，姜建国，刘红莉，等 顶空气相色谱法测定美罗培南中有机溶剂的残留量中国药房，
　　2010，21(5)：447448.