【小鼠骨髓细胞染色体标本制备】 小鼠骨髓细胞染色体绘图

课程名称： 细胞生物学实验 指导老师： 实验日期：

院（系）： 专业班级： 实验地点：

学生姓名： 学号：

实验项目名称: 小鼠骨髓细胞染色体标本制备

一、目的：

初步掌握小鼠骨髓细胞染色体制作方法。

二、原理：

小鼠→秋水仙素处理→骨髓细胞→低渗处理→固定→滴片→染色→观察

三、实验用品：

(1)试剂：200ug/ml秋水仙素溶液，0.075mol/L KCl低渗液、甲醇溶液、冰醋酸溶液、pH6.8磷酸缓冲液、Giemsa 原液、生理盐水。

(2)仪器：解剖板、解剖剪、大小镊子、吸管、离心管、注射器、离心机、培养皿、恒温水浴锅、量筒、预冷载玻片、酒精灯、普通天平、香柏油、二甲苯、擦镜纸。

(3)材料：小鼠

四、操作要点：

小鼠→秋水仙素2-3h →脱臼法处死→取四肢骨去肌肉（爪）→生理盐水洗净→剪碎入离心管→KCl 2ml→振荡器30s →加KCl 3ml→37℃水浴15min →甲醇:乙酸固定液1ml →手动混匀→静置1min →3000rpm 6min→弃上清液→加固定液3ml →手动摇匀→静置5min →3000rpm 6min→弃上清液→加固定液0.5ml →混匀→滴片（冰片 距离）→过火（勿过热）→干燥→入Giemsa 8min→水洗→干燥→镜检

五、观察人体细胞染色体标本片

六、结果与讨论：