【快速石蜡包埋组织切片的制备】 石蜡组织切片
发布时间:2019-08-03 09:37:38 影响了: 人
快速石蜡包埋组织切片的制备
——煮沸固定切片法
一、固定 切取大小适宜(厚度
二、 脱水
(1)将已经煮沸固定的组织快取出,用刀片将其厚度修切至
(2)再向该试管中重新加入5~8ml丙酮并煮沸2min。如此重复3~4次。
三、 浸蜡 将已经丙酮脱水的组织块由试管中取出,用吸水纸去除其表面液体,随即置入75~80℃熔化的石蜡中,待组织块下沉、不再出现气泡时(约需30S),即可包埋。
四、 包埋、切片和染色
(1)用热镊子将预制的蜡块表面熔化,埋入已经浸蜡的组织块。
(2)待埋入组织块的蜡块表面凝固后,即用载玻片轻压蜡块表面片刻,使蜡块表面平整。
(3)将蜡块置入冰水中,使其变硬。
(4)迅速切片,裱片后用吸水纸去除载玻片上的水分。
(5)将载玻片用火焰烘干(勿距火焰太近)。
(6)迅速进行HE染色。
五、注意事项
(1)为了尽量缩短制片时间,必须预先做好有关准备工作,备齐取材用具、试管、固定液、丙酮、酒精灯、火柴(或其他引火器)、包埋用蜡块、载玻片和染色试剂等,放在固定部位待用。
(2)全部制片过程一般在20~25min内完成。
(3)制片后剩余组织块应做石蜡包埋切片染色,进一步诊断。
(4)含脂肪较多的组织,须经多次丙酮处理。
(5)含脂肪较多的组织,须经多次丙酮处理。
(6)丙酮、乙醇、二甲苯等为易燃物,进行上述各项流程时,2m距离内不得存在明火。加温脱水和浸蜡过程必须应用隔水温箱,不得使用干烤箱操作。