[长根菇鳞柄变种菌丝培养条件的研究]灵芝菌丝粉

　　摘要：长根菇鳞柄变种［Ｏｕｄｅｍａｎｓｉｅｌｌａ ｒａｄｉｃａｔａ （Ｒｅｌｈ．：Ｆｒ．） Ｓｉｎｇ． ｖａｒ. ｆｕｒｆｕｒｒａｃｅａ（Ｐｅｃｋ） Ｐｅｇｌｅｒ ｅｔ Ｙｏｎｇ］是一种生长在茶园里、具有广阔开发前景的珍稀食用菌，为了人工驯化栽培长根菇鳞柄变种，试验对长根菇鳞柄变种菌丝生长的最适碳源、氮源营养及碳氮比进行了探讨。结果表明，长根菇鳞柄变种菌丝生长的最适碳源是果糖，最适氮源是（ＮＨ４）２ＳＯ４和牛肉膏，最适碳氮比是２０∶１；同时，长根菇鳞柄变种菌丝适宜在中性偏酸的环境下生长。
　　关键词：长根菇鳞柄变种；菌丝；生长
　　中图分类号：Ｓ６４６．９；Ｑ９４５．１６文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）14－2889-02
　　
　　Study on the Hypha Culture Conditions of Oudemansiella radicata var. furfurracea Variety
　　
　　ＦＡＮ Ｙｏｕ－ｆｕ，ＣＨＥＮ Ｙｅ，ＰＥＮG Ｑｉｎ，ＺＨＡＮ Ｓｈｏｕ－ｆａ
　　（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｊｉｕｊｉａｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｊｉｕｊｉａｎｇ ３３２０００， Ｊｉａｎｇｘｉ， Ｃｈｉｎａ）
　　
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｏ domesticated Ｏｕｄｅｍａｎｓｉｅｌｌａ ｒａｄｉｃａｔａ（Ｒｅｌｈ．：Ｆｒ．） Ｓｉｎｇ． ｖａｒ. ｆｕｒｆｕｒｒａｃｅａ（Ｐｅｃｋ） Ｐｅｇｌｅｒ ｅｔ Ｙｏｎｇ that grow in tea garden with broad development prospects， ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃａｒｂｏｎ ｓｏｕｒｃｅｓ， and C/N ｏｎ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｓｔｒａｉｎ Oudemansiella radicata var. furfurracea variety ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ． Ｔｈｅ ｆａｖｏｒａｂｌｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ were ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ， wｉｔｈ ｆｒｕｃｔｏｓｅ ａｓ ｃａｒｂｏｎ ｓｏｕｃｅ，（ＮＨ４）２ＳＯ４ ａｎｄ ｂｅｅｆ ｃｒｅａｍ ａｓ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｓｏｕｒｃｅ， C/N ２０∶１． Meanwhile， such variety grew well in neutral partial acid environment.
　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｏｕｄｅｍａｎｓｉｅｌｌａ ｒａｄｉｃａｔａ （Ｒｅｌｈ．：Ｆｒ．） Ｓｉｎｇ． ｖａｒ. ｆｕｒｆｕｒｒａｃｅａ（Ｐｅｃｋ） Ｐｅｇｌｅｒ ｅｔ Ｙｏｎｇ； hypha； ｇｒｏｗｔｈ
　　
　　我们在进行赣西北野生大型真菌资源调查过程中，在修水县的幕阜山区茶园中发现了大量在春季出现的野生茶蔸菇（当地群众的叫法），并为当地老百姓大量采食，其味道鲜美，食用价值较高。茶蔸菇经初步鉴定，为伞菌目（Ａｇａｒｉｃａｌｅｓ）、白蘑科（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａｔａｅｅａｅ）、奥德蘑属（Ｏｕｄｅｍａｎｓｉｅｌｌａ Ｓｐｅｇ．）的长根菇鳞柄变种［Ｏｕｄｅｍａｎｓｉｅｌｌａ ｒａｄｉｃａｔａ（Ｒｅｌｈ．：Ｆｒ．）Ｓｉｎｇ．ｖａｒ． ｆｕｒｆｕｒｒａｃｅａ（Ｐｅｃｋ）Ｐｅｇｌｅｒ ｅｔ Ｙｏｎｇ］［１－７］。目前， 长根菇已进行了人工栽培，但对长根菇鳞柄变种人工驯化栽培未见报道。试验对长根菇鳞柄变种菌丝培养条件进行了探讨，为进一步人工驯化栽培长根菇鳞柄变种提供理论依据。
　　１材料与方法
　　１．１材料
　　供试长根菇鳞柄变种菌株于２００９年５月在江西省修水县征村茶园采集野生长根菇鳞柄变种子实体、经组织分离获得母种。
　　１．２方法
　　经组织分离后转接的长根菇鳞柄变种菌丝生长良好，菌落圆形，菌丝致密，绒毛状，边缘整齐，气生菌丝不强，爬壁能力强。分别针对长根菇鳞柄变种菌丝的生长和营养（不同碳源、氮源、碳氮比、ｐＨ值）关系进行处理。基础培养基为马铃薯２００～２５０ ｇ，葡萄糖２０ ｇ，蛋白胨１ ｇ，琼脂２０ ｇ，水１ ０００ ｍＬ。常规方法灭菌，基础培养基中接入活化菌丝，置于２５ ℃培养箱中培养，每天观察１次，记录每天菌丝的生长量，共观察记录５ ｄ。每个处理１０个重复，取其平均值，作为数据分析的依据［８－１０］。
　　１．２．１碳源试验以基础培养基２０ ｇ的葡萄糖含碳量为基准，分别用相等含碳量的果糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、甘露醇、红糖、可溶性淀粉代替基础培养基中的葡萄糖，操作步骤同前，比较不同碳源对长根菇鳞柄变种菌丝生长的影响。
　　１．２．２氮源试验以基础培养基１ ｇ的蛋白胨含氮量为基准。分别用相等含氮量的ＮＨ４ＮＯ３、（ＮＨ４）２ＳＯ４、ＫＮＯ３、ＮａＮＯ３、酵母膏、牛肉膏代替基础培养基中的蛋白胨，操作步骤同前，比较不同氮源对长根菇鳞柄变种菌丝生长的影响。
　　１．２．３Ｃ／Ｎ试验在基础培养基中添加不同质量的蛋白胨（蛋白胨含碳量忽略不计），配成C/N分别为１０∶１、２０∶１、３０∶１、４０∶１、５０∶１、６０∶１、７０∶１、８０∶１的培养基，操作步骤同前，比较不同C/N对长根菇鳞柄变种菌丝生长的影响。
　　１．２．４ｐＨ值试验在基础培养基中，用1 ｍｏｌ／Ｌ
　　HCl和1 ｍｏｌ／Ｌ NaOH调节培养基的ｐＨ值分别为４、５、６、７、８、９，操作步骤同前，比较不同ｐＨ值对长根菇鳞柄变种菌丝生长的影响。
　　１．２．５数据处理对试验所得数据用ＳPSS１３．０软件进行统计分析。
　　２结果与分析
　　２．１不同碳源对长根菇鳞柄变种菌丝生长的影响
　　不同碳源对长根菇鳞柄变种菌丝生长的影响结果见图１，由图１可以看出，长根菇鳞柄变种菌丝对单糖的利用以果糖为最佳，在果糖中菌丝长势好、色白、菌丝致密；而对葡萄糖利用较好。对双糖中的麦芽糖也能很好地利用，但对蔗糖和乳糖利用较差；虽然在红糖中萌发快，但长势一般，且菌丝生长稀疏，这可能是红糖的化学成分较复杂等原因引起的。对可溶性淀粉和甘露醇的利用一般。由此可见，长根菇鳞柄变种菌丝对单糖的利用比双糖要好。利用效果高低排序为果糖＞麦芽糖＞红糖＞葡萄糖＞甘露醇＞可溶性淀粉＞蔗糖＞乳糖。因此，长根菇鳞柄变种菌丝生长的最佳碳源为果糖。
　　２．２不同氮源对长根菇鳞柄变种菌丝生长的影响
　　氮元素是真菌合成蛋白质、核酸的必要原料，对菌丝的生长发育至关重要。试验选择７种原料作氮源进行比较，结果见图２，从图２可见，长根菇鳞柄变种菌丝在供试的７种不同氮源培养基中生长差异较大，其中在有机氮源培养基中比在无机氮源培养基中的长势要好。前者菌丝致密、绒毛状，边缘整齐，气生菌丝不强，爬壁能力强，并且在牛肉膏培养基中菌丝长势较好，其次为蛋白胨、酵母膏；在４种无机氮源培养基中，（ＮＨ４）２ＳＯ４中的菌丝生长最好，其次为ＮＨ４ＮＯ３，ＮａＮＯ３、ＫＮＯ３中的菌丝长势较差。这个结果表明，硫对长根菇鳞柄变种菌丝的生长具有一定的积极影响，具体机制需要进一步证实。因此，长根菇鳞柄变种菌丝生长的最佳氮源为（ＮＨ４）２ＳＯ４和牛肉膏。
　　２．３不同Ｃ／Ｎ对长根菇鳞柄变种菌丝生长的影响
　　培养基中各类营养物质之间的浓度配比直接影响真菌菌丝的生长繁殖，其中碳氮比（Ｃ／Ｎ）的影响较大，Ｃ／Ｎ还影响着真菌的活力、寿命。不同Ｃ／Ｎ对长根菇鳞柄变种菌丝生长的影响结果见表１，由表１可看出，当Ｃ／Ｎ为１０∶１时，菌丝长势较好，边缘较整齐，菌丝较致密，生长速度一般；Ｃ／Ｎ为２０∶１时，菌丝长势好，边缘整齐，菌丝致密，生长速度快；Ｃ／Ｎ为３０∶１时，菌丝长势较差，边缘较整齐，菌丝较致密，但生长速度较快；Ｃ／Ｎ为４０∶１～６０∶１时，菌丝长势较差，边缘不整齐，但菌丝致密，生长速度一般；Ｃ／Ｎ为７０∶１～８０∶１时，菌丝长势差，边缘不整齐，菌丝稀疏，生长速度慢。因此，综合来看，长根菇鳞柄变种菌丝生长的最适Ｃ／Ｎ为２０∶１。
　　２．４不同ｐＨ值对长根菇鳞柄变种菌丝生长的影响
　　不同ｐＨ值对长根菇鳞柄变种菌丝生长的影响结果见图３，由图３可看出，长根菇鳞柄变种菌丝生长对ｐＨ值的适应范围较广，ｐＨ值在４～９范围内菌丝均可生长，但生长速度有明显差异。当ｐＨ值为６时，菌丝生长速度最快，日生长量达到３ ｍｍ；当ｐＨ值大于6时，菌丝生长速度随ｐＨ值增大而减小；观察发现，ｐＨ值为１３时，菌丝不再生长。说明长根菇鳞柄变种菌丝适宜在中性偏酸的环境下生长。
　　３小结
　　对长根菇鳞柄变种菌丝生长的培养条件研究结果表明，在以果糖为碳源、以（ＮＨ４）２ＳＯ４和牛肉膏为氮源、碳氮比为２０∶１、ｐＨ值为６的培养条件下，有利于长根菇鳞柄变种菌丝的生长。本研究仅对长根菇鳞柄变种菌丝培养条件进行了比较，有关长根菇鳞柄变种人工驯化栽培方面的技术需要进一步的探讨。
　　
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