[荧光光谱法测定不同品种鳖中微量元素锌的含量] 原子吸收光谱法测定人发中微量元素

　　摘要：在磷酸盐缓冲液中，当激发波长为２３０ ｎｍ时，苏丹Ⅱ溶液在４６３ ｎｍ处出现一个弱的荧光峰，Ｚｎ２＋溶液的加入使得该处的峰值增加，其增加值ΔＦ与Ｚｎ２＋浓度在０．９０８ ４～４５．４２２ μｇ／ｍＬ范围内呈现出良好的线性关系，回归方程为ΔＦ＝１５．９７Ｃ－４．９５８，相关系数ｒ为０．９９７ ６，检测限为０．５９７ ４ μｇ／ｍＬ。基于此建立了微量元素Ｚｎ２＋浓度测定的新方法，该法可用于鳖不同部位锌含量的测定。
　　关键词：荧光光谱；鳖；锌离子
　　中图分类号：Ｏ６５７．３９；Ｓ９１７．４文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）11－2328-03
　　
　　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｚｉｎｃ in Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ Ｔｕｒｔｌｅｓ ｗｉｔｈ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ｓｐｅｃｔｒｕｍ Ｍｅｔｈｏｄ
　　
　　ＨＵＡＮＧ Ｇｕｏ－ｘｉａ１，ＣＨＥＮ Ｔｉｅ－ｙｉｎｇ２，ＬＩ Ｊｕｎ－ｓｈｅｎｇ１，ＸＩＥ Ｚｈｉ－ｙａｎｇ３，ＬＩＡＯ Ｙｏｎｇ－ｃｏｎｇ３
　　（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｇｕａｎｇｘｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｌｉｕｚｈｏｕ ５４５００６， Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ；
　　２．Ｌｉｕｚｈｏｕ Ｐｒｏｄｕｃｔ Ｑｕａｌｉｔｙ Ｓｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎ Ｔｅｓｔｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｌｉｕｚｈｏｕ 5４５００１，Ｇｕａｎｇｘｉ， Ｃｈｉｎａ；
　　３．Ｇｕａｎｇｘｉ Ｇｕｉｇａｎｇ Ｆｉｓｈｅｒｙ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ Ｓｔａｔｉｏｎ，Ｇｕｉｇａｎｇ ５３７１００， Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ）
　　
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ａ ｗｅａｋ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｐｅａｋ ｅｍｅｒｇｅｄ ａｔ ４６３ ｎｍ ｉｎ ＳｕｄａｎⅡｓｏｌｕｔｉｏｎ ｕｓｉｎｇ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｂｕｆｆｅｒ ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｅｘｃｉｔａｔｉｏｎ ｗａｖｅ ｌｅｎｇｔｈ （Ｅｘ） ｗａｓ ２３０ ｎｍ． Ｔｏ ｔｈｅ ｓｙｓｔｅｍ， Ｚｎ２＋ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ０．９０８ ４～４５．４２ μｇ／ｍＬ ｗａｓ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎａｌ ｔｏ ｔｈｅ ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔｓ ｏｆ ０．５９７ ４μｇ／ｍＬ． Ｔｈｅ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｗａｓ ΔＦ＝１５．９７Ｃ－４．９５８，r＝０．９９７ ６． Ｔｈｉｓ ｎｅｗ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ａｐｐｌｉｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｚｉｎｃ ｉｎ ｔｕｒｔｌｅ’s ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｉｓｓｕｅｓ．
　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｓｐｅｃｔｒｕｍ； ｔｕｒｔｌｅ； ｚｉｎｃ
　　
　　锌是人体必需微量元素的一种，能促进机体的性发育、性功能、生殖细胞的生成［１］；锌还与促进大脑发育有关［２］，缺锌可致早期孕妇味觉及嗅觉异常，造成妊娠剧吐，导致胎儿生长发育停顿、早产等；另外还有促进淋巴细胞增殖和活动能力的作用，对维持上皮和黏膜组织正常、防御细菌、病毒侵入、促进伤口愈合、减少痤疮等皮肤病变等发挥作用［３］。目前锌离子含量测定主要有原子吸收光度法［４，５］、原子荧光光谱法［６］、分光光度法［７，８］、电化学法等［９，１０］。
　　广西黄沙鳖（Ｔｒｉｏｎｙｘ ｓｔｅｉｎｄａｃｈｎｅｒｉ）属于中华鳖西南品系黄沙鳖，为广西地区特有品种，是药食同源的滋补佳品［１１］。近年来黄沙鳖的仿生养殖取得了重要成果，但是对于黄沙鳖中营养价值的具体评价体系尚少见报道，试验通过测定黄沙鳖中锌的含量，并与中华鳖相比较，旨在进一步构建黄沙鳖营养评价体系以及加大人们对黄沙鳖营养价值的认识。
　　１材料与方法
　　１．１仪器与试剂
　　５３０１ＰＣ荧光分光光度计（日本岛津公司）；ＡＬ１０４电子分析天平（梅特勒－托利多）；ＨＨ－８电子恒温水浴锅（常州国华电器有限公司）；消化炉（上海洪纪仪器设备有限公司）；ｉＣＥ３５００原子吸收分光光度计（美国热电公司）。
　　８ μｇ／ｍＬ苏丹Ⅱ溶液，４５４．２２０ μｇ／ｍＬ ＺｎＳＯ４标准溶液，０．０３３ ３ ｍｏｌ／Ｌ Ｎａ２ＨＰＯ３－ＫＨ２ＰＯ３缓冲液。中华鳖、野生黄沙鳖、养殖黄沙鳖均由广西贵港市水产技术推广站提供；所用试剂均为分析纯，试验用水为去离子水。
　　１．２试验方法
　　在１０ ｍＬ具塞比色管中，依次加入１ ｍＬ Ｎａ２ＨＰＯ３－ＫＨ２ＰＯ３缓冲液（ｐＨ值５．４），１．５ ｍＬ ８ μｇ／ｍＬ苏丹Ⅱ及适量ＺｎＳＯ４，用去离子水定容至５ ｍＬ， 摇匀，于７０ ℃放置１５ ｍｉｎ，固定激发波长Ｅｘ＝２３０ ｎｍ，扫描发射光谱，记录４６３ ｎｍ处的荧光强度Ｆ和试剂空白值Ｆ０，计算ΔＦ＝Ｆ－Ｆ０。
　　２结果与分析
　　２．１苏丹Ⅱ－Ｚｎ２＋体系的荧光光谱
　　固定激发波长，扫描发射波长获得荧光光谱。当激发波长为２３０ ｎｍ时，苏丹Ⅱ－Ｚｎ２＋体系在４６３ ｎｍ处呈现一微弱的荧光峰，且该处的峰值随着Ｚｎ２＋浓度的增加而线性增加（图１），据此可以测定Ｚｎ２＋含量。
　　２．２试验条件的优化
　　２．２．１ｐＨ值影响在苏丹Ⅱ浓度2.4 μｇ／ｍＬ，Zn2+浓度27.250 μｇ／ｍＬ条件下，考察了体系缓冲液ｐＨ值（５．５～８．３）对ΔＦ的影响，其结果见图２，当ｐＨ值为６．４时ΔＦ值最大。另外还考察了缓冲液体积的影响，结果表明，在０．２～２．５ ｍＬ范围，当缓冲液体积为１ ｍＬ时，ΔＦ值较大。故选择ｐＨ值为６．４的缓冲液１ ｍＬ。
　　２．２．２苏丹Ⅱ用量影响如图３所示，在Zn2+浓度27.250 μｇ／ｍＬ，pH值6.4时，苏丹Ⅱ用量对体系有一定的影响，在０．８～４．０ μｇ／ｍＬ范围内体系的ΔＦ值呈现出先增大后减小的趋势，当其浓度为２．４ μｇ／ｍＬ时，体系的ΔＦ值最大，故选择苏丹Ⅱ浓度为２．４ μｇ／ｍＬ。
　　２．２．３温度的影响在苏丹Ⅱ浓度2.4 μｇ／ｍＬ，Zn2+浓度27.250 μｇ／ｍＬ，pH值6.4时，温度对体系的影响见图４，结果表明在３０～７０ ℃范围内ΔＦ值相对较大，而在６０ ℃时ΔＦ值最大，表明３０～７０ ℃范围比较适合本体系进行反应，而在６０ ℃时效果最佳。故选择反应温度为６０ ℃。
　　２．２．４体系稳定性在苏丹Ⅱ浓度2.4 μｇ／ｍＬ，Zn2+浓度27.250 μｇ／ｍＬ，pH值6.4时，考察了体系的稳定性，配制好样品后于不同时间对Ｆ值进行测定，同时测试剂空白，其结果见图５，由图５可知，当反应时间在３０ ｍｉｎ以内，随着时间的延长，ΔＦ值呈上升趋势，此后９０ ｍｉｎ内基本保持不变。故选择在３０ ｍｉｎ时测定ΔＦ值。
　　２．３共存离子对体系ΔＦ值的影响
　　按照试验方法，考察了共存物质对体系的影响。当Ｚｎ２＋浓度为２７．２５0 μｇ／ｍＬ时，相对误差在
　　±１０％之内，８０倍的Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｆｅ２＋、Ｃｕ２＋，１００倍的维生素Ｃ、烟酸、核黄素等对测定的干扰不大，故该法选择性较好。
　　２．４标准曲线的绘制
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文 　　在所选择的条件下，按照试验方法测得不同Ｚｎ２＋浓度的ΔＦ值，并绘制标准曲线。在０．９０８～４５．４２２ μｇ／ｍＬ范围内，ΔＦ值与Ｚｎ２＋浓度呈现良好的线性关系，其回归方程为ΔＦ＝１５．９７０Ｃ－４．９５８，相关系数ｒ为０．９９７ ６，检测限为０．５９７ ４ μｇ／ｍＬ。
　　２．５样品处理及测定
　　称取鳖不同组织样品各５．０ ｇ，置烘箱中于８０ ℃干燥２４ ｈ，粉碎，转至坩埚中，于电炉上加热碳化后转至马弗炉中５００～６００ ℃灼烧２～３ ｈ，待样品灰化完全时取出，加入１０ ｍL ５ ｍｏｌ／Ｌ硫酸，浸泡过夜，次日过滤，定容至１０ ｍＬ，同时做空白对照。各样品测定结果见表１，由表１可知，锌在不同组织中含量差异较大，各组织锌含量由大到小为肌肉＞肝脏＞裙边；同种组织不同品种间也存在差异，肌肉中锌含量顺序为养殖黄沙鳖＞养殖中华鳖＞野生黄沙鳖；肝脏中锌含量顺序为野生黄沙鳖＞养殖中华鳖＞养殖黄沙鳖；而裙边中锌的含量各品种间差异不大。造成以上差异的原因可能和鳖的生活环境、饮食习惯、生活习性等有关。
　　２．６方法比较
　　试验同时用原子吸收法对样品中锌含量进行了测定，并与荧光光谱法进行了比较。原子吸收法的样品处理如下：称取５．０ ｇ样品于消化管中，加入１０ ｍＬ浓硝酸和２．５ ｍＬ高氯酸，置于消化炉中加热至黄烟冒尽，溶液呈淡黄色时停止加热并取下消化管，冷却后加水定容至１０ ｍＬ，同时做试剂空白，待测。两方法的比较结果见表２。由表２可知，本法与原子吸收法的结果相差不大，说明本法可靠性强。
　　３小结
　　在ｐＨ值 ６．４的Ｎａ２ＨＰＯ３－ＫＨ２ＰＯ３缓冲体系中，当激发波长为２３０ ｎｍ时，苏丹Ⅱ溶液在４６３ ｎｍ处有一弱的荧光峰，随着Ｚｎ２＋的加入，该处的峰值线性增加，由此建立了测定微量元素Ｚｎ２＋的荧光光谱新方法。本法线性范围宽，检测限为０．５９７ ４ μｇ／ｍＬ的Ｚｎ２＋，抗干扰能力也比较强，８０倍的Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｆｅ２＋、Ｃｕ２＋，１００倍的维生素Ｃ、烟酸、核黄素等对测定的干扰均不大。该法用于黄沙鳖和中华鳖不同组织中锌的含量测定，结果发现，不同组织中含量差异较大，其中肌肉中锌含量最多，肝脏次之，裙边中含量最少，仅为肌肉中的１／３。不同品种鳖的同种组织中锌元素含量也存在一定差异。
　　参考文献：
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　　注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文
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