[HPLC法测定复方选净散中水杨酸和苯甲酸的含量]珊瑚癣净水杨酸含量
[摘要] 目的 采用HPLC法测定复方选净散中水杨酸和苯甲酸的含量。 方法 采用Diamonsil C18色谱柱（250 mm × 4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇-0.05 mol/L磷酸氢二钠溶液（用磷酸调pH至3.9）（55∶45），柱温为30℃，流速为0.8 mL/min，检测波长233 nm，以外标法峰面积定量。 结果 水杨酸、苯甲酸分别在0.035 9～0.299 3 mg/mL（r = 0.999 8），0.035 8～0.298 0 mg/mL（r = 0.999 3）范围内有良好的线性关系，平均回收率分别为100.14%（RSD = 0.77%）和99.95%（RSD=0.95%）（n = 9）。 结论 本方法简便、准确，可快速测定复方选净散中水杨酸和苯甲酸的含量，可为质量控制提供依据。
[关键词] 高效液相色谱法；水杨酸；苯甲酸
[中图分类号] R917 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2012）07（a）-0115-03
Determination of Salicylic acid and Benzoic acid in Fufangxuanjingsan by HPLC
ZHANG Jing YAN Hui FEI Jia SUN Shiguang▲
Department of Pharmacy, the General Hospital of Beijing Military Region, Beijing 100700, China
[Abstract] Objective To establish the HPLC method for the content determination of Salicylic acid and benzoic acid in Fufangxuanjingsan. Methods Diamonsil-C18 column (250 mm × 4.6 mm, 5 μm) was used with the mobile phase of amixture of methanol and 0.05 mol/L KH2PO4 (55∶45) (adjusted to pH 3.9 with H3PO4) as mobile phase; the flow rate was 0.8 mL/min; the column temperature was 30℃; the detection wavelength UV 233 nm. Results The calibration curves of Salicylic acid and Benzoic acid was linear relationship in the range of 0.035 9 - 0.299 3 mg/mL (r = 0.999 8), 0.035 8-0.298 0 mg/mL (r = 0.999 3). The average recoveries (n = 9) was 100.14% (RSD=0.77%) and 99.95% (RSD=0.95%) respectively. Conclusion The established method is simple, quick and accurate for the simultaneous separation and determination of Salicylic acid and Benzoic acid in Fufangxuanjingsan.
[Key words] HPLC; Salicylic acid; Benzoic acid
复方选净散是我院自制的外用抗真菌散剂，具有软化角质及止痒、止汗、抗菌，杀菌等作用，主要用于治疗足癣、手癣、体癣及皮肤寄生的真菌疾患等。《中国药典》2010年版采用酸碱滴定法对水杨酸和苯甲酸进行含量测定[1]， 高效液相色谱法同时测定其他制剂中水杨酸、苯甲酸的含量已有报道[2]，为了更准确有效地测定复方选净散中水杨酸、苯甲酸的含量，本文采用HPLC法测定，操作简便、快速、准确，为该药品的质量控制提供依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器
岛津高效液相色谱仪，二元梯度泵，紫外检测器，SIL-20A自动进样器，LC-solution色谱工作站（日本岛津）；Sartorius电子天平。
1.2 试药
水杨酸原料药（含量100%，北京燕京药业有限公司，批号：20110720、20110721、20110755）、苯甲酸（含量99.5%，镇江前进化工有限公司）；甲醇为色谱纯；磷酸氢二钠为分析纯；水为纯化水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱Diamonsil C18（250 mm × 4.6 mm，5 μm）（Dikma公司）；流动相：甲醇-0.05 mol/L磷酸氢二钠溶液（用磷酸调pH至3.9）（55∶45）；检测波长为233 nm；流速为0.8 mL/min；柱温为30℃。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取水杨酸对照药材、苯甲酸对照药材各60 mg，置100 mL棕色量瓶中，加流动相适量使溶解，稀释至刻度，摇匀，得对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备
精密称取水杨酸对照药材、苯甲酸对照药材各60 mg，置100 mL棕色量瓶中，加流动相适量使溶解，稀释至刻度，摇匀，得对照品溶液。
2.4 阴性样品溶液的制备
按处方配比制备缺少水杨酸、苯甲酸的阴性样品，按供试品溶液制备方法制备成阴性样品溶液。
2.5专属性试验
取水杨酸、苯甲酸对照品溶液、供试品溶液和阴性空白样品溶液，在色谱条件下分别进样10 μL，记录色谱图，结果见图1。由图谱可知，水杨酸保留时间（t）为5.7 min、苯甲酸保留时间（t）为8.5 min，阴性空白样品在水杨酸、苯甲酸出峰时间区域没有干扰峰出现，故对水杨酸、苯甲酸的测定无干扰作用。结果理论板数以水杨酸计可达10 000以上。水杨酸与苯甲酸峰的分离度大于2。