单核苷酸多态性【雌激素受体单核苷酸多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症遗传易感性研究】

　　[摘要] 目的 探讨雌激素受体单核苷酸的多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症（ICP）遗传易感性的相互关系。 方法 应用PCR和RFLP技术，对我院2009年8月～2011年10月收治的200例ICP患者（ICP组）及200例非ICP患者（对照组）产妇的雌激素受体α（ERα）基因多态性进行分析。 结果 ICP组ERα Pvu Ⅱ 酶切后基因型PP、Pp、pp的基因频率以及等位基因P与p的基因频率与对照组差异无统计学意义（P ＞ 0.05）；ERα Xba Ⅰ 酶切后基因型XX、Xx、xx基因频率以及等位基因X与x的基因频率与对照组差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。两组ERα基因的Pvu Ⅱ和Xba Ⅰ的联合基因型分布差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。 结论 雌激素受体单核苷酸的多态性与ICP的发病无明显相关。
　　[关键词] 妊娠期肝内胆汁淤积症；雌激素受体；基因多态性
　　[中图分类号] R714.25 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2012）07（c）-0051-02
　　Study on the association between the single nucleotide polymorphism of estrogen receptor and intrahepatic cholestasis of pregnancy
　　XIE Xiangqun HUANG Xiaojing CHEN Meidi ZHANG Dongmei QIU Bing
　　Department of Burn, the 2nd People′s Hospital of Shenzhen, Guangdong Province, Shenzhen 518000, China
　　[Abstract] Objective To investigate the relationship of genetic predisposition between estrogen receptor single nucleotide polymorphisms and intrahepatic cholestasis of pregnancy (ICP) susceptibility. Methods 200 cases of estrogen receptor alpha (Erα) gene polymorphism patients with ICP (ICP group) and 200 cases without ICP (control group ) were analyzed by PCR and RFLP technology from August 2009 to October 2011 in our hospital. Results The frequency of ERα in ICP group with genotype PP, Pp, PP after Pvu Ⅱ restriction had no statistically difference with that of the control group (P > 0.05 ), so was the allele P and p gene frequency. The frequency of ERα in ICP group with genotype XX, Xx, xx after XbaⅠ restriction had no statistically difference with that of the control group (P > 0.05), so was the allele X and x gene frequency. There was no statistical difference in ERα gene between the Pvu Ⅱ and XbaⅠ joint genotype (P > 0.05). Conclusion The ERa gene polymorphism is not associated with the risk of ICP.
　　[Key words] Intrahepatic cholestasis of pregnancy; Estrogen receptor; Gene polymorphism
　　妊娠期肝内胆汁淤积症（ICP）是妊娠中晚期特有的严重危害围生儿健康的并发症[1]。有研究认为，雌激素对于ICP的发病起着关键作用。而雌激素是通过与雌激素受体（ER）结合在人体内发挥作用，ER的表达由于编码基因的多态性而造成的个体差异可能导致遗传易感性的不同。因此，笔者通过研究ER基因，主要是ERα基因的多态性，来探讨其与ICP发病的相关关系，现报道如下：
　　1 资料与方法
　　1.1 一般资料
　　将我院2009年8月～2011年10月收治的200例ICP患者纳入ICP组，另外选取同期住院的200例非ICP患者纳入对照组。ICP的诊断标准参照《中华产科学》的标准。ICP组孕妇平均年龄（27.0±8.2）岁，对照组孕妇平均年龄（26.0±8.8）岁。两组孕妇均居住在我市，且为汉族，单胎妊娠；无病毒性肝炎或其他肝胆疾病；除ICP组患ICP外，无其他妊娠并发症；相互之间无亲缘关系；两组孕妇年龄等一般资料差异无统计学意义（P ＞ 0.05），具有可比性。
　　1.2 方法
　　1.2.1 样本收集 采集孕妇静脉血3 mL于抗凝离心管中，混匀后置于–20℃保存。
　　1.2.2 DNA的提取 使用基因组DNA试剂盒（来自美国G&T公司）提取。
　　1.2.3 ERα基因的扩增 应用PCR限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）法进行扩增。设计引物，上游引物：5′-CTGCCACCCTATCTGTATCTTTTCCTATTCTCC-3′；下游引物：5′-TCTTTCTCTGCCACCCTGGCGTCGATTATCTGA-3′。反应体系50 μL，其中10 mmoL/L的Tris-HCl（pH 9.0），2.5 mmol/L的MgCl2，50 mmol/L的KCl以及引物各0.25 μmoL/L，dNTP各200 μmoL/L，Taq DNA酶1 U，模板DNA 300 ng。94℃预变性5 min；循环条件为95℃ 10 s，61℃ 30 s，72℃ 90 s，循环35次；最后72℃ 10 min。