冷沉淀与血浆的区别【亚甲蓝病毒灭活新鲜冰冻血浆制备冷沉淀的可行性研究】
【摘要】 目的 评价分析亚甲蓝灭活后血浆制备冷沉淀的可行性。 方法 通过对同源血浆亚甲蓝病毒灭活前后制备冷沉淀FⅧ和Fbg含量的比较得出结论。 结果 用亚甲蓝病毒灭活新鲜冰冻血浆制备的冷沉淀，FⅧ和Fbg的含量均有明显降低。 结论 用于制备冷沉淀的新鲜血浆不易进行亚甲蓝病毒灭活。
【关键词】
亚甲蓝；病毒灭活；冷沉淀；可行性
Feasibility study on cryoprecipitate made from fresh frozen plasma inactivated virus by methylene blue
SUN Shu-li, LI Jie, YU Jian-hua. Weihai Blood Center; Weihai Women and children hospital
【Abstract】 Objective
Study on feasibility of cryoprecipitate made from fresh frozen plasma inactivated virus by methylene blue. Methods Tested FⅧ and Fbg in Cryoprecipitate, contrasted cryoprecipitate made from fresh frozen plasma with cryoprecipitate made from homologous fresh frozen plasma inactivated virus by methylene blue. Results FⅧand Fbg were decreasing obviously in cryoprecipitate made from fresh frozen plasma inactivated virus by methylene blue compared with FⅧand Fbg in cryoprecipitate made from homologous fresh frozen plasma.
【Key words】
methylene blue； inactivated virus； cryoprecipitate； feasibility
冷沉淀因富含凝血因子Ⅷ(FⅧ)、纤维蛋白原(Fbg)等，而被广泛用于治疗儿童甲型血友病、血管性血友病、纤维蛋白原缺乏症等，且疗效明显。冷沉淀中FⅧ和Fbg的含量是直接影响其治疗效果的重要因素［1］。目前，因我国血液检测传染性标志物的主要方法是酶联免疫检测，血清转换窗口期、病毒变异以及低病毒载量的慢性携带等均可造成漏检，给输血带来一定的风险。采取有效措施，在保证冷沉淀输注安全的同时，又保证其有效性显得尤为重要。通过对亚甲蓝病毒灭活新鲜冰冻血浆制备冷沉淀质量的检测，评价分析亚甲蓝灭活后血浆制备冷沉淀的可行性。现总结如下。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂 日本sysmex CA530血凝仪；Dade德灵血凝试剂Fbg批号：540938、乏FⅧ批号：546547、APTT批号：547116、CaCl2批号：539446；威高WG-LRH-I型冷沉淀血浆制备仪；德国贺利氏大容量离心机。山东淄博中保康医疗器具有限公司生产的病毒灭活柜及配套病毒灭活血浆袋。
1.2 方法
1.2.1 冷沉淀原料血浆的制备 联袋采集CPDA-1抗凝血液400 ml/袋，并分离新鲜血浆(200 ml/袋)。随机抽取新鲜血浆60袋，每袋准确均分为100 ml2，分别作为A组、B组。A组立即置于-50℃速冻机中速冻，-30℃保存备用，即新鲜冰冻血浆组；B组用MB/光化学法进行病毒灭活后，再置于-50℃速冻机中速冻，-30℃保存备用，即病毒灭活新鲜冰冻血浆组。整个过程于采血后6 h内完成。
1.2.2 冷沉淀的制备 将上述A、B组冰冻后血浆在相同的条件下，按常规方法制备A组和B组冷沉淀，及时置于速冻机中速冻保存备用。
1.2.3 留样与检测 将上述A、B组冷沉淀取出，置37℃水浴融化，称重，然后留样各2 ml，用血凝仪快速测定其FⅧ和Fbg的含量。 FⅧ采用一期法测定，Fbg采用凝固法。
1.3 统计学处理
检测数据以均数±标准差( x ±s )表示，两样本均数比较采用 t 检验, P ［2］。(见表1)
3 讨论
亚甲蓝病毒灭活新鲜冰冻血浆制备的冷沉淀，FⅧ和Fbg含量均有显著降低，Fbg的降低程度较FⅧ更明显。Fbg的损失量达50%左右，FⅧ的损失量在35%左右。与报道一致［3］。分析原因是Fbg与亚甲蓝的亲和性较大，亚甲蓝与Fbg结合使其活性降低。FⅧ活性降低主要与延迟血浆速冻时间有关。
采用亚甲蓝病毒灭活新鲜冰冻血浆制备冷沉淀，虽然可以降低输注冷沉淀传染病毒的风险，但因FⅧ和Fbg含量损失过大，直接影响冷沉淀输注的有效性。因此，本人认为制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆不易进行亚甲蓝病毒灭活。尽快找到并推广适合冷沉淀的病毒灭活方法是亟待解决的问题。
参 考 文 献
［1］ 黄虹,陆典瑞,胡继征.冷沉淀制备工艺改良.临床输血与检验,2007,9(2):144.
［2］ 全血及成分血质量要求. 中华人民共和国国家标准GB18469-2001. 中华人民共和国国家国家质量监督检验检疫总局.
［3］ Yousef H, Neurath D, Freedman M, et al. Cryoprecipitate produetion:the use of additives to enhance the yield. Clin Lab Haematol,2006,28(4):237-240.