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敬钊缨毛蛛 [Lys4突变对敬钊缨毛蛛毒素-V钠通道活性的影响]

发布时间:2019-02-16 04:09:10 影响了:

  摘要:敬钊缨毛蛛毒素-V(jingzhaotoxin-V,JZTX-V)是从敬钊缨毛蛛粗毒中纯化到的一种新型河豚毒素不敏感型钠通道抑制剂,为了深入研究该毒素的结构与功能关系,应用芴甲氧羰基(Fmoc)固相多肽化学合成方法合成了用丙氨酸(Ala)替代JZTX-V第4位赖氨酸残基的突变体K4A―JZTX,V,合成线性多肽经反相高效液相色谱分离纯化后进行谷胱甘肽氧化复性,复性产物分别用MALDI-TOF/TOF质谱进行相对分子质量的鉴定,用膜片钳电生理方法进行电压门控钠通道抑制活性分析,研究结果表明,Lys4被Ala取代后,K4A-JZTX-V对大鼠背根神经节细胞膜上表达的河豚毒素敏感型(TTX-S)钠通道的抑制活性与天然JZTX-V基本相当,提示Lys4与JZTX-V对TTX-S钠通道的抑制活性关系不大;而K4A-JZTX-V对河豚毒素不敏感型(TTX-R)钠通道的抑制活性却比天然JZTX-V下降了约8.3倍,说明Lys4是JZTX-V与河豚毒素不敏感型钠通道抑制活性相关的氨基酸残基。
  关键词:敬钊缨毛蛛毒素-V;固相多肽合成;突变体;氧化复性;膜片钳
  中图分类号:Q25;Q343
  文献标识码:A
  文章编号:1007-7847(2008)01-0020-04
  Effects Of Lys4 Mutation On S0dium Channels Activity Of JZTX-V
  
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