【流动注射在线分离测定测定碘酸根与碘离子及尿中碘形态的研究】碘离子测定
i 8d e %g %>$h -e /($, j e +%*d $($@) =*) =
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第B +卷第3期
B ++3年3月
中国地方病学杂志
>/e 9’B ++3
@$(9B +’. $93
检测方法" !
&&流动注射在线分离测定#$%与#
及尿中碘形态的研究
张亚平’蓝天水’陈惠琴
福建省龙岩市卫生防疫站’福建龙岩%() *+++,
摘要" 目的!
&&
建立一种分离测定#检测人尿中碘的形态’探讨人摄入碘酸钾后$%和#离子的分析方法’
&
是否有#$%离子直接从尿中排出-方法
采用流动注射在线离子交换分离技术与尿碘在线消化流动注射分析技
建立了流动注射在线
&
检测尿中碘形态’并以. /结果术结合’01$%化学还原法等实验验证尿中#$%存在状况-
&&
以尿碘流动注射分析法(测定尿中#有机碘的分析方法’232型强碱性阴离子交换树脂微型柱分离’4#5, $%6#6&
进样频率*对#方法检出限>? +次7’9:;(
尿中#离子占尿碘总量的均值为:有机碘占尿碘总量的均值为E 实验发现并的尿样中未检出#3D >;’D >;C $%C &&
证明尿液对#结论$%是较强的还原体系’#$%在尿中不能稳定存在-&&和#分离效果好-人摄入碘酸钾碘盐后尿中无#$%形态排出-关键词" 流动注射分析C 在线离子交换分离C 碘酸根离子C 尿!
&
方法操作简便’检测快速6灵敏度高6#$%
中图分类号" $) ! 3%D **
&
&
文献标识码" 5! 文章编号" ! 3+++F *:>>(B ++3, +3F ++*) F +*
&I %P O JS N OU L N O IV WR X Q Y N O Z I [K N Q OY N K HN Q O \[H P O ]I^I _P L P K N Q OP O JI \_I L N M I O K P X G H IJ I K I L M N O P K N Q OQ RS T ^K U J WQ R N Q J N O I ^_I [N I ^N OU L N O I
F ’A F ’i F ‘05. a b /c d e @5. f d /e g 8h d 0j . 0h d k d e
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&
&
&
&
&
食用加碘酸钾碘盐是碘缺乏病防治的主要措
&&
施’人摄入的碘酸根#$%离子须在体内转为#离子
&
才被生理利用’是否有部分#$%离子在体内未转化
&
形态条件下检测#通常可测定碘的催化分光光$%’度法6气相色谱法6离子色谱法6电化学分析法等的&应用都遇到困难’故人尿中有否#$%排出的实验研究尚未见文献报告-
而直接由尿中排出’使碘酸钾碘盐碘的生物利用度这是目前人们关注的问题-由于低于碘化钾碘盐碘’
尿液成分复杂’尿中碘含量甚微’要在不改变尿中碘
收稿日期" ! B +++F +2F +>
基金来源" 国家:九五; 医学科技攻关基金资助项目(! :) F +*F +3, C
卫生部疾控司资助项目(3:::F +:,
作者简介" 张亚平(男’副主任技师-! 3:>:F , ’
本研究采用自制的阴离子交换树脂微型柱和以
3
自行研究组装的尿碘流动注射分析(装置! 4#5,
&&
为柱后检测系统’建立了微量#$%和#离子的流动
注射在线分离测定方法’并以此对人尿中碘的形态及含量进行了研究检测’为了解人摄入碘酸钾碘盐
&后#$%的生理利用率提供了参考数据-
T %6T
U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U
第! 期
+与+及尿中碘形态的研究张亚平#等" 流动注射在线分离测定*, -*
! 材料与方法
! " ! 分离测定原理在已有的尿碘流动注射在线消化催化光度分析系统的载流送样流路接上自制的在所选载流洗脱条件的流阴离子交换树脂微型柱#
+
动注射过程#微体积样品$中的*离子被保留%&) ’(
+
在此阴离子交换树脂上#而*, -离子被洗脱送入后
载流-溶液使用1&:9&&’D =C F 碘酸钾碘系列#
溶液#流速! 其余操作方法同. 47; (D #>? @(; N O */法3
+
! 4%41尿中是否存在*, -离子的验证方法
取尿样-加&! 4%414! 化学还原验证法54&; (47
溶液&及&D 47&; (4&! 7; E D ; E (FG @((F>? G H , -
继流路的尿碘在线消化. 尿碘在*/系统得到检测#
线消化. ! #123*/的技术原理见参考文献0! " 1材料
溶液&混匀为/样#放置! 以*47&; (7; N O 后#K . *P
并取同一尿样-加水! 混匀/法测定#4&; (4&; (为Q 样#平行测定#
+*, -碘量3
! 414! 仪器5
自行研制组装的尿碘自动分析装置0! 2
#
组件包括中科院信通科仪公司流动注射分析仪及高精度温控器#611型光栅分光光度计#789微机装载自行设计的尿碘. */计算机工作站#
装置流路系统及分析性能见参考文献0! #123! 4141微型阴离子交换柱5将实验室常用于制备去离子水的6! 6型强碱性阴离子交换树脂用研钵压磨碎细#再用分样筛筛取粒径&418:&4-7; ; $
旧制9&:7&目) 部分为交换柱填料3在直径! 6; ; 的有机玻璃棒钻制接头螺纹及填充管道制成柱体#柱内填充树脂的管道长度有1%; ; 1; ; $
下文分别称1%; ; 柱 1; ; 柱) 1种#管径均为-47; ; #填料两端各为一薄层玻璃棉及带内径&46; ; 聚四氟乙
烯管的塑料螺丝封定3
! 414-试剂5*, -+
离子分离测定的洗脱载流液为
-=>? @(溶液#其余. */用试剂溶液见参考文献
0! #12A 分别以B *#B *, -配制碘浓度! &&’C D ; (
的碘标准贮备液A &4&! 7; E (D F >? G H , -溶液A &47; E (D FG @(溶液3实验用水为比电阻值大于1&&&I J 的去离子水3
! " -尿样我市多年来全面供应碘酸钾碘盐防治碘缺乏病#采集食用含碘酸钾碘--4! :764&; C D I C 碘盐人群的尿样进行检测3! " %方法! 4%4! 测定方法
! 4%4! 4! 尿总碘含量测定$称. */法) 5尿液直接进样#. */流路中无离子交换柱#测定结果为样液中总碘浓度3测定方法见参考文献0! #12#
方法中同浓度的*+碘与*, -+碘信号峰高一致0-23
! 4%4! 41*, -+与*+的分离及*, -+
测定$
离子交换. */法#称*K . */法) 5在. */载流经进样阀后与消
化液流合并前的流路中接上串联的! 1; ; 柱$在前) 和1%; ; 柱$在后) #进样阀动作时间为1&L
3标准! 4%4141尿样的*, -+
加标验证法5取尿样-4&; (在17R 室温下加9&&’C D F 碘酸钾碘标准液! 4&; (混匀制成加入碘酸钾碘量! 7&’C D F 的@样#
以*K . */法分别测定加标混匀立即进样$@!
) 和放置1&; N O 后进样$@1) 的结果#检验*, -+
在尿液中的稳定性#并以. */法测定总碘计算碘回收率3
! 4%414-人大剂量内服碘酸钾溶液前后采尿检测验证法5对男女受试者各! 名#采集临饮服碘酸钾溶液前的尿样后#饮入浓度为%&; C D F 碘的碘酸钾溶液1&&; ($碘量8&&&’C ) #采集饮服后第一次排出尿#分别以*K . */#. */法测定3
! 4%414%尿液体系的表观氧化还原电位测定5取尿液于! &; (烧杯中#插入以S &1型铂电极为指示电
极
1" ! 流动注射在线分离方法实验
14! 4! 离子交换柱条件5在*K . */系统中实验得
6! 6型强碱型阴离子交换树脂对*
+
离子有强吸着作用#可完全保留样液中的*+不被洗脱流出#而*, -+
被洗脱流出3采用! 1; ; 柱$前) 与1%; ; 柱$
后) 串联接于流路#前柱起离子色谱分离的保护柱作用#减除尿液成分对后柱分离性能的改性#使*K . */检
测信号更稳定3
14! 41洗脱条件5本方法中载流液同时起*, -+
离
子洗脱作用#选择-=>? @(溶液为洗脱载流液#可在进样后! 47; N O 得到峰形良好的*, -+检测峰#
而对9&&’C D F*+
离子标准溶液反复进样#均无*K . */
信号3再试验-=>? @(+-=>? 1
H , %溶液为洗脱载流液#*+
离子标液进样检测仍无峰信号#即比>? @(
载流液有更强交换能力的大量的二价阴离子H , %
1+也不能将*+洗脱出交换柱#表明本法对*, -+和*
+
中国地方病学杂志第#5卷[? D [
\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\
分离完全! 分离抗干扰"
#$%$&’() ’*方法指标
准确度, 在实验#$%$&$%方法的检出限与精密度+条件下! 测得碘酸钾碘的检出限为-. 以02&4! /13
峰高吸光度的2为5%55. 07894$%6:/16次测定! 相对标准偏差为%85$55&! ;
碘) %! ? @" ’*检测系统的测定准确度见参考文献>峰高吸光度2与碘酸#$%$&$#标准曲线的绘制, *4钾碘浓度2关系54B#55. 0A /1线性回归方程为A
G
而交换柱后检定的不受H I ’F &! K N F &还原影响所
得的碘量2即*样结果4认为是尿中有机碘的量"
采集D 位%#$#$#尿样中碘形态检测结果, #岁学生的尿样D 份! 碘检测结果为总碘%D ? $
0T B 6%$:. /1’() ’*法中还原验证法的*样组U -此两组结果配对V 检0! B6#$6. 0! . /1S 样组U-/1验差异无显著意义2结果分V C %$56%! WX 5$&54!
G
析认为这些尿中未检出’分离柱后所得的F &离子! 占各尿碘总量的碘信号结果应为尿中有机碘的量!
C&$? D -E:6%$-55*! 相关系数为5$
$6-D E #$? -
G
和’G
混合的标准溶
液! 用’() ’*法测定结果见表%
" 以假尿溶液2%#$-/01H I A J G ? $5-/012H K ? 4#
K L F ? G %$:? /01M #
N F ? G#-/01尿素4外加’F &G
测定无干扰" 本实验的下述各对尿样的’() ’*法检测实验在临结束前! 以655. /01’G
离子标准溶液进样!
其无峰信号! 表明此时交换柱仍保留阻止’G 漏过的分离性能"
表%’F &
G
和’G
混合标准溶液’() ’*测定结果
’F &G 和’G 混合量2. /014测定值’F &
G 回收率’F &
G 碘’
G 碘2. /0142=4%-5%-5%? D $
655
-
#; #人尿中不同形态碘的检测
#$#$%应用H I K N F &化学还原验证法检验’F &
G
,
在酸性溶液中H I K N F &可将5
BE:价态的无机碘还原至’G 离子形态! 经’() ’*法检测得5$-O P J 01
K A J 5$-5O J 及5$5%-O P J 01H I K N F &5
$-5O J 分别加于-5+#55+655. /01碘酸钾碘标准溶液&
$5O J 中! 可在%5O Q R 内将’F &G 完全转化为’G
而检测无信
号峰! 并且此&样液用) ’*法测定含碘量结果分别为&:; #! %? D ; ? ! ? ? -; 6. /012体积稀释理论值分别为&:$-! %-5! ? -5. /014! 表明所加的H I K N F &不影响本实验交换柱后) ’*系统对碘的检测准确度" 对尿样直接进样的’() ’*法检测得到的峰信号为
’F &G 碘及尿样中除’G 外其它可被同时洗脱或携出
的形态碘合并结果! ’() ’*法中再采用H I K N F &化
学还原验证法可根据*+S 样信号峰高的差值检定
5B%6$#=!789为2:; :8-$:4="从尿样的’F &
G
加标验证法实验发现’F &G
可较快地被尿中物质还原转化为’G ! 为进一步检验’F &G 在尿中是否存在及其外加后仍可被转化现象! 利用本文方法检测尿碘
分析速度快的特点! 采集%:B#? 岁男性D 人+
女性6人的尿样立即先以’() ’*法进行实验检测! 再以) ’*法测总碘浓度2
表#! 样号%BD 为男性的尿样+
总碘%5&$%B :
WX 5$:54! 表明尿样中未检出’F &G
离子T 交换柱后碘2认为是有机碘4U-B
离子量占各尿碘总量的:D $6=B%55=!7
89为2
碘%-5. /01立即进样以’() ’*法检测! 加标和进样整个过程不超过&5Y ! 得’F &G 被尿液成分还原为’G 的转化率
Z %2计算式>%-5G 2A
G S 4@%55=0%-54为5$6=B%55=!789为26#; D 8&D ; &4=!加标#5O Q R 后进
样检测得此转化率Z #为#&$&=B%55=!789
为2
标检验证实了尿液成分对’F &G
有较强较快的还原
作用! ’F &G
在尿液体系中不能稳定存在"
#$#$&#名受试者一次性饮服D 555. /碘量的碘酸
钾溶液前后采尿检测的结果为, 总碘饮服前%&D ; :. /012男4! %
女4! 均未测出可检定量的’F &G ! 仍表明无’F &G
在尿液中排出"
#$#$? 尿液表现氧化还原电位测定结果,
上述尿样呈现还原剂的电位2表&4!
表明尿液为还原性环境! 这为前述’F &G
离子在尿液中不能稳定存在的实验事实提供了原因的辅助证明"
T /4T
U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U U
第+期
J 与J 及尿中碘形态的研究张亚平K 等M 流动注射在线分离测定@>. @
表! 尿中碘形态检测实验结果
样号+! . /01234+5+++! +. +/
总碘" %’交换柱后碘" %’#$&#$&. +2632! 26/0116/! 456++/! 6! 2456+0! 16. +. 26++5. 6++506. ! 0! 610/261! 1! 6+/3264
70/16! //62. +6! ! 06/416/7070! ! 60700+641! 6//! 6+70
%’(" #$&70. . 6. . . 65! +63! ! 6. 21627070+16. 70. /620+65. 56070
" %’) #$&70. 060. ! 63! ! 60! 56+226. 7070+06170. +60/464. 56070
" %’*#$&+
70. 163. 06. 1360/! 6+4! 60+/46++. . 6. +! 562+/. 6+//6/2260. . 65+! 563
" %’*#$&!
70. 062. +60! 561! 56+2264++06+26+/560. +60/5600! 6! . 561/56.
" -’, +
+55446+436. 146. 306. 3464561++6+! 464/614+6/3+61436. +460
" -’, !
+554464+55+55+554461! . 6. 406. 3. 6/24654/[1**********]. 65
表. 表观氧化还原电位测定结果
溶液体系5650%" ’9:; &*/!
565+%9:; &?@>. 5655. 3%9:; &AB C =>.
56! -硫酸肼尿样+3份
酸度+%9:; &CD 5653%9:; &CD 5651%9:; &CD
6+5E C ! 061. F262+’E C "
G 16. 3H5610’I E C "
测定电位" 8’
+6! 405614. 56! 5556++. J565. +F5653+G 565! 5H565. /I
J
还原环境K 人摄入碘酸钾碘盐后K @>. 在体液的还原J 环境中被全部转化K 未能以@因>. 形式在尿中排出K
而碘酸钾碘盐的生物利用度与碘化钾碘盐应是相同的L 对! ! 份尿样的检测还得出尿中有机碘占尿碘总
J
量的比例均值为3尿中无机碘的形态为@离M 0-K 子K 占尿碘总量的比例均值为4+M 0-L
参考文献I G
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华预防医学杂志K ! 555K . /" /’O ! /5P ! /+6
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光光度测定法G 中国地方病学杂志K I 6+440K +/" /’O ! /. P ! /26N 陈惠琴K 陈吉祥K 等6尿中微量碘的自动分析法Q 流动G . I 张亚平K
注射分析G 中国地方病防治杂志K I 6+441K ++" /’O ! /+P ! /. 6N G /I 徐
锦K 张亚平K 陈志辉K 等M 尿碘在线消化流动注射自动分析装置的应用G I M 中国地方病学杂志K ! 555K +4" /’O ! 45P ! 4+6N
本文在国内首先报告了对尿中碘形态分析的检测方法K 并对实际尿样的碘形态实验研究检测得尿
J
液中无可检定量的@本实验70%K #$&碘’>. 存在"
J
还证明了尿液体系对@可迅>. 是较强的还原环境K J J 速将@根据尿液是由体内血液在肾脏透>. 转为@K
J
析滤过形成的K 可由此认为体内血液亦为@>. 的强
下
! 55+年
期要目
第! 期
第! 5卷
氟化物对人多形核白细胞=>R 活力的影响
! 毒素致胎儿软骨细胞凋亡的观察S P
大骨节病病区粮水对猴软骨糖胺多糖代谢的影响氟对鸡甲状腺组织结构的影响氟中毒对大鼠骨自由基含量的影响