【海枫藤花粉块的离体萌发试验研究】花粉萌发

　　摘要通过对海枫藤花粉块的离体萌发试验研究结果表明:不同蔗糖浓度、不同激素、不同花期海枫藤花粉块的萌发率不同,以蔗糖浓度为10%,含15mg/L 6-BA,初花期的花粉块萌发率最高。
　　关键词海枫藤;花粉;离体萌发
　　中图分类号S567.1文献标识码A文章编号 1007-5739(2009)11-0030-02
　　
　　海枫藤(Marsdenia officinalis Tsiang et P.T.Li)属萝摩科植物,主要分布在我国浙江、湖北、四川等省区,全株可药用,有舒经通络、散寒、除湿、止痛等功效,为云南彝族地区常用草药。目前国内还没有对海枫藤花粉块萌发研究的报道,本试验旨在探讨海枫藤花粉块萌发所需的培养基成分和海枫藤活力测定应选择的花粉块。
　　1材料与方法
　　
　　1.1材料的采集与处理
　　供试材料采集自云南省昆明市石林县奎山镇双龙乡山地林中,将采集到的花枝进行扦插备用。
　　
　　1.2花粉块离体萌发的方法
　　1.2.1不同蔗糖浓度对花粉块萌发的影响。采用蔗糖液体培养基,以蒸馏水作为空白对照。将在刚开的花中解剖得到的20个花粉块置于含蔗糖液的载玻片上,蔗糖处理浓度分别为0%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%。将载玻片放入盛有湿滤纸的培养皿中再盖一个较大的培养皿,置于30℃恒温箱中培养,自接种后每3h用显微镜检测1次,共8次。观察中以萌发花粉管为具有生活力的标志,统计萌发花粉管的数量,计算出萌发率。花粉萌发率(%)=(已萌发的花粉数目/花粉粒总数)×100%。
　　1.2.2不同植物激素对花粉块萌发的影响。采用液体培养基,以蒸馏水为空白对照。将上述材料中在刚开花中解剖得到的20个花粉块置于含培养基的载玻片上(培养基成分见表2),将载玻片放入盛有湿滤纸的培养皿中再盖一较大的培养皿,置于30℃恒温箱中培养,自接种后18h用显微镜检测,统计萌发花粉管数量,计算出萌发率。花粉萌发率(%)=(已萌发的花粉数目/花粉粒总数)×100%。
　　1.2.3不同花期花粉块的萌发试验。采用上述2个试验中筛选出的对花粉块萌发最好的培养基,以蒸馏水为空白对照。在生长正常的植株上摘下未开的花、微开的花、刚开的花、开后1d的花、开后2d的花、开后3d的花若干,从花药囊中解剖出20块花粉块置于含培养基的载玻片上,将载玻片放入盛有湿滤纸的培养皿中,再盖一较大的培养皿,置于30℃恒温箱中培养,自接种后每3h用显微镜检测1次,共8次,测量长出的每1个花粉管的长度,统计每种萌发花粉管的数量,计算出萌发率。花粉萌发率(%)=(已萌发的花粉数目/花粉粒总数)×100%。
　　
　　2结果与分析
　　
　　2.1不同蔗糖浓度对花粉块萌发的影响
　　海枫藤具有腋生的聚伞形花序,花被由5个花萼和5个花瓣组成,雌蕊由2个心皮组成,5个雄蕊的花丝联合形成1个柱状结构,由肉质的柱头和雄蕊在花中联合形成合蕊柱结构。每个花粉囊里载有1对花粉块,花粉块肾形,成对的花粉块由2个转运柄连接到1个棕色的着粉腺上(见图1)。每个花粉块中约含有花粉100粒左右,花粉除有花粉壁外还有由蜡质的花粉块壁包裹。花粉块中花粉的萌发见图2。
　　从表1可看出,海枫藤花粉块在蔗糖浓度为10%且培养时间为15~24h时萌发率最高,为20.38%,低于10%比高于10%更有利于花粉的萌发,在不含蔗糖的对照中花粉萌发率为0。蔗糖是花粉萌发的营养物质和能量来源,不同的蔗糖溶液对花粉萌发的影响也就不相同。
　　
　　2.2不同植物激素对花粉块萌发的影响
　　从表2可看出,海枫藤花粉块在蔗糖10%+硼酸0.1%+氯化钙5mg/L+6-BA 15mg/L的培养基中萌发率最高,为43.30%。在适宜的糖、硼酸和氯化钙浓度条件下,除15mg/mL 6-BA外,其他激素对花粉萌发率没有显著作用。
　　
　　2.3不同花期对花粉块萌发的影响
　　从表3可看出,刚盛开的花即初花期花粉的萌发率最高,为47.30%,初花期前的花粉块尚未完全发育成熟,故萌发率较低,初花期后的花粉块由于营养和其他环境因素的影响,萌发率有微小的降低,但降低的速度较缓慢。
　　
　　3结论与讨论
　　
　　花粉的生活力受到遗传因素和环境因素的影响,海枫藤的花粉可能由于有耐久的花粉和花粉块壁的保护,能较长时间保持生活力,这应该是提高传粉效率的一种适应。研究发现,不同蔗糖浓度、不同激素、不同花期海枫藤花粉块的萌发率不同,以蔗糖为10%,含15mg/L 6-BA,初花期的花粉块萌发率最好。但是此法需要一定的温度,为了使试验结果更准确可信需要一定的重复试验。在所有海枫藤花粉块的萌发过程中还表现出一个规律,即只有与转运柄相连接的相邻部位才有顶破花粉块壁伸出来的花粉管,中间的花粉粒依次从相同的方向伸出花粉管,而其余部位均没有花粉管伸出(见图2),而形成这一现象的原因还有待于进一步研究。
　　
　　4参考文献
　　
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