如何筛选农杆菌阳性克隆 [携带大片段ＢＩＢＡＣ克隆在不同农杆菌中的遗传稳定性研究]
发布时间：2019-02-16 04:12:15 影响了： 人
摘要：大片段克隆在农杆菌中的稳定性是利用可转化大片段载体进行农杆菌介导遗传转化的关键问题。选用插入片段分子质量分6.1为150kb和50kb的BIBAC克隆，测定了在3种农杆菌AGL-1，EHA105和LBA4404中的遗传稳定性。从第1、3、5次继代培养的农杆菌中抽提的质粒及酶切结果显示，由于农杆菌背景质粒的干扰，难以判断质粒的降解与否。将农杆菌质粒再转化到大肠杆菌宿主中，发现来自农杆菌ACL-1和EHA105的质粒出现了明显的降解，片段变小，而来自农杆菌LBA4404的质粒没有变化。结果表明，大片段BIBAC质粒在不同农杆菌菌株中的稳定性不同，在农杆菌LBA4404中比较稳定，适合用于遗传转化。
关键词：大片段基因文库；根癌农杆菌；遗传稳定性
中图分类号：Q75
文献标识码：A
文章编号：1007-7847(2006)04―0291-04 本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文