食心虫防治专用药剂【桃小食心虫产卵的寄主选择特性】

　　摘要：为了解桃小食心虫产卵对果实的选择特性，采用固相微萃取（ＳＰＭＥ）与气质联用（ＧＣ－ＭＳ）测定不同苹果挥发性成分。选取易受桃小食心虫危害的金冠苹果具有代表性的挥发物质（乙醛、丁醛、丁醇、己醇、糠醛、庚酸、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸戊酯、乙酸己酯、丙酸丙酯）的不同浓度进行桃小食心虫引诱试验。结果表明，０．１和１．０ ｍｇ／ｍＬ的乙酸乙酯、０．１ ｍｇ／ｍＬ的乙酸丁酯、１．０ ｍｇ／ｍＬ的乙酸戊酯、６．０和６０．０ ｍｇ／ｍＬ的乙酸己酯、０．１ ｍｇ／ｍＬ的丙酸丙酯具有显著的效果；并利用正交试验方法得出几种效果较好的混合配比。再利用人工气候箱进行产卵引诱试验，得出０．１ ｍｇ／ｍＬ乙酸乙酯、１．０ ｍｇ／ｍＬ乙酸丁酯、１０．０ ｍｇ／ｍＬ乙酸戊酯、５．０ ｍｇ／ｍＬ乙酸己酯、０．１ ｍｇ／ｍL丙酸丙酯的混合配比为试验的最佳引诱物质。
　　关键词：桃小食心虫；寄主选择性；引诱；产卵
　　中图分类号：Ｓ４３６．６２１．２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）11－2236-04
　　
　　Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ Ｈｏｓｔ Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ Ｃａｒｐｏｓｉｎａ ｎｉｐｏｎｅｎｓｉｓ Oｖｉｐｏｓｉｔｉｏｎ
　　
　　ＷＡＮＧ Ｘｉａｏ－ｍｉｎｇａ，ＷＡＮＧ Ｈｏｎｇ－ｐｉｎｇｂ，Ｌ?� Ｓｈｕ－ｘｉａａ，YANG Feng-yiａ，ZHANG Zheａ
　　（ａ．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ； ｂ．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｓｈｅｎｙａｎｇ １１０８６６，Ｃｈｉｎａ）
　　
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｏｖｉｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｃａｒｐｏｓｉｎａ ｎｉｐｏｎｅｎｓｉｓ Ｗａｌｓｉｎｇｈａｍ oｎ ｆｒｕｉｔ， ｓｏｌｉｄ ｐｈａｓｅ ｍｉｃｒｏ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ（ＳＰＭＥ） ａｎｄ ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｕｍ（ＧＣ－ＭＳ） ｗｅｒｅ ａｐｐｌｉｅｄ ｔｏ ａｎａｌｙｓｉｓ ｔｈｅ ｖｏｌａｔｉｌｅｓ ｉｎ ａｐｐｌｅｓ． Ｔｈｅ ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅ ｖｏｌａｔｉｌｅｓ ｏｆ ａｐｐｌｅｓ （aｃｅｔａｌｄｅｈｙｄｅ， bｕｔａｎａｌ， bｕｔｙｌａｌｃｏｈｏｌ， hｅｘａｎｏｌ， fｕｒｆｕｒａｌ， hｅｐｔａｎｏｉｃ ａｃｉｄ， eｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ， aｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ－ｂｕｔｙｌ ｅｓｔｅｒ， aｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ－ｐｅｎｔｙｌ ｅｓｔｅｒ， aｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ－ｈｅｘｙｌ ｅｓｔｅｒ， pｒｏｐａｎｏｉｃ ａｃｉｄ－ｐｒｏｐｙｌ ｅｓｔｅｒ） ｗｈｉｃｈ could be ｅａｓｉｌｙ ｄａｍａｇｅｄ ｂｙ Ｃ. ｎｉｐｏｎｅｎｓｉｓ ｗｅｒｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ａｓ ｔｈｅ ａｔｔｒａｃｔａｎｔ ｔｏ ｔｈｅ ｂｕｇs． Ａｎｄ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｗａｓ ｔａｋｅｎ ｔｏ ｏｂｔａｉｎ ａ ｂｅｔｔｅｒ ｍｉｘｅｄ ｒａｔｉｏ to ａｔｔｒａｃｔ ｔｈｅ ｂｕｇｓ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗed ｔｈａｔ ０．１ ｍｇ／ｍL ａｎｄ １.0 ｍｇ／ｍL ｏｆ eｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ， ０．１ ｍｇ／ｍL ｏｆ aｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ－ｂｕｔｙｌ ｅｓｔｅｒ， １.0 ｍｇ／ｍL ｏｆ aｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ－ｐｅｎｔｙｌ ｅｓｔｅｒ， ６.0 ｍｇ／ｍL ａｎｄ ６０.0 ｍｇ／ｍL ｏｆ aｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ－ｈｅｘｙｌ ｅｓｔｅｒ， ０．１ ｍｇ／ｍL ｏｆ pｒｏｐａｎｏｉｃ ａｃｉｄ－ｐｒｏｐｙｌ ｅｓｔｅｒ ｈａｄ ｒｅｍａｒｋａｂｌｅ ｅｆｆｅｃｔｓ． Ａn ｏｖｉｐｏｓｉｔｉｏｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｗａｓ ｔａｋｅｎ ｉｎ ｔｈｅ artificial ｃｌｉｍａｔｅ ｂｏｘ； and ｔｈａｔ ｍｉｘｅｄ ｒａｔｉｏ ｏｆ ０．１ ｍｇ／ｍL eｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ， １.0 ｍｇ／ｍL aｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ－ｂｕｔｙｌ ｅｓｔｅｒ， １０ｍｇ／ｍL aｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ－ｐｅｎｔｙｌ ｅｓｔｅｒ， ５.0 ｍｇ／ｍL aｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ－ｈｅｘｙｌ ｅｓｔｅｒ， ０．１ｍｇ／ｍL pｒｏｐａｎｏｉｃ ａｃｉｄ－ｐｒｏｐｙｌ ｅｓｔｅｒ ｗas most attractive．
　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｃａｒｐｏｓｉｎａ ｎｉｐｏｎｅｎｓｉｓ Wａｌｓｉｎｇｈａｍ；ｈｏｓｔ ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ； ａｔｔｒａｃｔａｎｔ； ｏｖｉｐｏｓｉｔｉｏｎ
　　
　　桃小食心虫又叫桃蛀果蛾，属鳞翅目，蛀果蛾科，简称“桃小”，拉丁学名为Ｃａｒｐｏｓｉｎａ ｎｉｐｏｎｅｎｓｉｓ Ｗａｌｓｉｎｇｈａｍ，主要发生在我国偏北方和偏东部地区［１］，对苹果的危害最严重，是北方果树生产中影响产量的重要因素之一。雌虫在苹果表面产卵，幼虫孵化后蛀果［２］，从而造成苹果减产、品质和商品性下降。前人对苹果挥发性成分研究较多，但苹果挥发性成分与桃小食心虫的产卵选择效应之间的关系还未见详细报道。苹果不同品种受害程度不同，可能因为不同果实散发不同强度的香味物质。为进一步探明桃小产卵与挥发性物质的相关性，本文根据其特有的生活习性［３，４］和前人所做的一些尝试，进行了系列试验研究，以期得出一组效果较佳的引诱产卵物质，阐明苹果挥发性物质与桃小产卵选择性之间的关系。
　　１材料与方法
　　１．１试验材料
　　１）苹果品种：红富士、黄元帅、国光、津轻、乔纳金均为８月初采自大连市普兰店区苹果园。
　　２）养虫笼：养虫笼规格为长３８ ｃｍ、宽１８ ｃｍ、高２０ ｃｍ。
　　３）供试化合物：乙醛、丁醛、丁醇、己醇、糠醛、庚酸、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸戊酯、乙酸己酯、丙酸丙酯。
　　１．２试验方法
　　１．２．１苹果挥发性物质成分的测定选取６个大小、重量、颜色基本一致的完好果实，放置于带有聚四氟乙烯进样垫的密闭玻璃瓶内（体积为３ Ｌ），平放２４ ｈ 后将固相微萃取纤维头（聚二甲基硅氧烷涂层厚度为１００ μｍ）通过进样垫插入瓶内顶空吸附３０ ｍｉｎ，吸附完成后，缩回纤维头，待分析。
　　利用Ｔｈｅｒｍｏ Ｔｒａｃｅ ＧＣ Ｕｌｔｒａ－ＩＴＱ ９００气质联用仪进行分析。色谱条件：色谱柱为ＤＢ－５（６０ ｍ×０．３２ ｍｍ×０．５ μｍ）；进样口温度２５０ ℃，不分流进样，程序升温，３６ ℃保持５ ｍｉｎ，２ ℃／ｍｉｎ升到５０ ℃，然后以５ ℃／ｍｉｎ升到１００ ℃，再以８ ℃／ｍｉｎ升到１８０ ℃，１５ ℃／ｍｉｎ升到２５０ ℃，保持３ ｍｉｎ，载气为Ｈｅ气，柱流速５０ ｍＬ／ｍｉｎ。质谱条件：电离方式ＥＩ，电子能量７０ ｅＶ，全扫描方式，扫描范围：３５～５００ ａｍｕ，离子源温度２５０ ℃。
　　１．２．２桃小对植物挥发性物质的行为反应
　　１）桃小对单体挥发性物质溶液的行为反应。将每种挥发性物质分别溶于液体石蜡中，在旋涡混合器上充分混合，配成浓度为０．１、１．０、１０．０ ｍｇ／ｍＬ的溶液。
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文 　　“Ｙ”型嗅觉测定仪由以空气压缩机、空气过滤器（内装活性炭）、空气加湿器（１２５ ｍＬ广口瓶内装有蒸馏水）、味源瓶和对照瓶、空气流量计、“Ｙ”型玻璃管组成。
　　在测试时，将生理指标一致的待测试虫由出气口送入“Ｙ”型管内，试虫在“Ｙ”型管基部与带有信息物质的气味湍流接触后逆风飞行（爬行），沿着气味的浓度梯度进入特定的支管内。当桃小越过某臂
　　１／２处，则记为桃小对气味做出选择；当桃小放入后２ ｍｉｎ内不做选择，则记录无反应，结束对该虫的行为观察。每头雌虫只测试１次，每个处理测３０次。每次处理后用洗涤剂彻底清洗测定装置，１００ ℃烘干， 以消除不同处理间残留气味的影响。每测定５头时调换一下“Ｙ”型管两臂的方向，用以消除几何位置对桃小行为可能产生的影响。测定时间安排在９∶００～１５∶００进行［５］。
　　２）桃小对挥发性物质混配溶液的行为反应。按设计方案将挥发性物质溶于液体石蜡中，在旋涡混合器上充分混合，配成混合溶液。对桃小行为反应的测定方法同上。
　　１．２．３挥发性物质混配溶液对桃小产卵影响试验称取１０份０．２ ｇ脱脂棉花分别放入培养皿中（直径９ ｃｍ），在９份棉花上滴加利用嗅觉仪测出的混配溶液０．７５ ｍＬ，剩１份加０．７５ ｍＬ液体石蜡作为对照。用果蔬保鲜薄膜四面密封培养皿后在薄膜上层均匀扎上５个小针眼将培养皿包好，上覆洁净的定性滤纸，将滤纸与培养皿固定好。将培养皿随机放入养虫笼中。笼中放入20头成虫（１０雌１０雄）。笼顶盖湿纱布，然后将养虫笼置于人工气候箱内，保持温度２５ ℃，相对湿度为６５％～７５％，光照利用３２ Ｗ的日光灯每天照明１４ ｈ。试验过程中不时观察成虫的产卵行为，最后记录各滤纸上的着卵量。每个处理设５个重复。
　　２结果与分析
　　２．１苹果挥发性成分测定结果
　　测得５种苹果香气成分见表１。８月份为桃小二代产卵高峰期，故在此时进行苹果的挥发性成分测定。通过对５种苹果挥发性成分的种类及含量进行比较，初步确定乙醛、丁醛、丁醇、己醇、糠醛、庚酸、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸戊酯、乙酸己酯、丙酸丙酯为金冠苹果的特异性挥发成分。
　　２．２桃小对苹果挥发性物质的行为反应
　　２．２．１桃小对单体挥发性物质溶液的行为反应桃小在“Ｙ”型嗅觉仪中对苹果挥发性物质的行为反应如表２所示，各挥发性物质对桃小的行为反应不一，即使是同一种挥发性物质，当配制成不同浓度时，对桃小的行为反应也不一样。从表２可知，当用乙酸乙酯（０．１、１．０ ｍｇ／ｍＬ）、乙酸丁酯（０．１ ｍｇ／ｍＬ）、乙酸戊酯（１．０ ｍｇ／ｍＬ）、乙酸己酯（６．０、６０．０ ｍｇ／ｍＬ）、丙酸丙酯（０．１ ｍｇ／ｍＬ）作为诱源时，桃小食心虫均表现为比较积极的反应，桃小对这些挥发物的趋性显著（Ｐ＜０．０５）。
　　２．２．２桃小对苹果挥发性物质混配溶液的行为反应对于苹果挥发性物质混配的方案参考了单体物质的引诱结果，为优化出最佳引诱物质，本试验采用液体石蜡为溶剂，附加４种不同浓度的乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸戊酯、乙酸己酯、丙酸丙酯，按正交表Ｌ１６（４５）的正交设计方法进行试验，试验结果见表３。
　　由表３可知，ＲＡ＞ＲＣ＞ＲＤ＞ＲＥ＞ＲＢ，即乙酸乙酯对桃小产卵引诱的影响最为显著，然后依次为乙酸己酯、乙酸戊酯、丙酸丙酯，最不显著的因子为乙酸丁酯。其中最佳条件组合为Ａ１Ｂ２Ｃ３Ｄ４Ｅ１，即乙酸乙酯０．１ ｍｇ／ｍＬ，乙酸丁酯１．０ ｍｇ／ｍＬ，乙酸己酯５．０ ｍｇ／ｍＬ，乙酸戊酯１０．０ ｍｇ／ｍＬ，丙酸丙酯０．１ ｍｇ／ｍＬ，由于在试验设计表中没有符合此条件的方案，所以按照上述得出的最佳引诱条件做追加试验，得出结果为引诱臂２８次，效果最为明显，暂时将此组方定为组方Ａ。本研究采用的正交表没有对各因素的交互作用进行研究，因此得出的结果具有一定的局限性。
　　２．３苹果挥发性物质混配溶液对桃小产卵的影响
　　根据桃小对混配苹果挥发性物质的行为反应结果，将正交试验中效果较好的配比方案即正交试验中的组方２、组方３、组方６、组方８、组方９、组方Ａ和一种效果不好的组方１３外加对照共计８种物质进行产卵测定。在供试的７种混合物中，桃小食心虫在组方１３中所产的卵量显著少于对照（Ｐ＜０．０５）；在组方２、组方６、组方８、组方９、组方Ａ中的产卵量均显著多于对照（Ｐ＜０．０５），而其中组方Ａ的诱卵量又显著高于其他物质（表４）。因此，确定组方Ａ（乙酸乙酯０．１ ｍｇ／ｍＬ，乙酸丁酯１．０ ｍｇ／ｍＬ，乙酸己酯５．０ ｍｇ／ｍＬ，乙酸戊酯１０．０ ｍｇ／ｍＬ，丙酸丙酯０．１ ｍｇ／ｍＬ）为本次试验最佳产卵引诱物质。
　　３讨论
　　在自然界，植食性的昆虫对寄主的产卵选择性一般依据视觉和嗅觉识别植物，并发生定向趋性，同时植物挥发性物质对昆虫的定向定位、取食、产卵等行为反应均起重要作用［６］。国外许多学者关于植食性昆虫对不同颜色、气味、果型的寄主植物产卵选择性研究甚多［7，8］，主要依据不同植物挥发性物质对植食性昆虫产卵趋性的影响，来判定最适产卵的寄主植物，进而分析鉴定出具有引诱作用的信息化合物。
　　本研究通过对苹果挥发性成分的测定分析并利用“Ｙ”型嗅觉测定仪进行生物测定，结果表明，桃小食心虫对植物挥发性物质的行为反应可分为正趋性和负趋性。负趋性表现为爬向诱虫臂的桃小食心虫数目显著少于爬向对照臂的桃小食心虫，而正趋性则正好相反。不同的植物挥发物，或同一挥发物的不同浓度对桃小食心虫引起的行为反应存在较大的差异。并且几种正趋向的挥发性物质组合效果明显好于单体物质。在室内条件下根据桃小食心虫产卵情况得出０．１ ｍｇ／ｍＬ乙酸乙酯、１．０ ｍｇ／ｍＬ乙酸丁酯、１０．０ ｍｇ／ｍＬ乙酸戊酯、５.0 ｍｇ／ｍＬ乙酸己酯、０．１ ｍｇ／ｍＬ丙酸丙酯的配比组合具有较好的引诱效果。本研究结果表明，桃小食心虫选择寄主产卵与寄主植物的挥发性物质具有一定的联系，可为日后深入研究桃小食心虫产卵情况提供参考。研究挥发性化合物对桃小食心虫的行为机理，对于丰富生态学理论，发挥其在生物防治中的作用，探索减少化学农药的使用次数和用量，从而对开发桃小食心虫防治新技术具有重要意义。
　　参考文献：
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　　［４］ 曹可诚． 桃小食心虫对苹果品种的生态选择［Ｊ］． 山西果树，１９９４（２）：２６－２７．
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　　注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文
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