【小麦高分子量谷蛋白亚基研究进展】高分子的研究进展

　　摘要小麦是重要的粮食作物，随着人们生活水平的提高，对小麦品质提出了更高的要求，小麦高分子量谷蛋白亚基（HMW-GS）无疑对小麦品质有重大的影响。从高分子量谷蛋白亚基的命名、基因的定位、多态性和遗传以及高分子量谷蛋白亚基的结构和功能、与品质的关系、目前高分子量谷蛋白亚基分子标记的开发、转基因情况等方面进行了综述。
　　关键词小麦；高分子量谷蛋白亚基；分子标记；转基因
　　中图分类号S512.1文献标识码A文章编号 1007-5739（2011）03-0011-05
　　
　　ResearchProgressonWheatHigh-Molecular-WeightGluteninSubunit
　　SUN Zhen-gangJIANG Yan-liXU QiXU Ai-ling
　　（Cotton Research Institute，Shanxi Academy of Agricultural Sciences，Yuncheng Shanxi 044000）
　　AbstractWheat，as a key crop，should be required to improve it′s quality as the people′s life is better than ever. Wheat High-Molecular-Weight Glutenin Subunit（HMW-GS） plays a significant role on wheat quality undoubtly. In the paper，HMW-GS study progress was reported from its naming，gene localization，polymorphism and inheritance，structure and fuction，relation with wheat quality，exploitation of molecular marker，status of transgene，etc.
　　Key wordswheat；High-Molecular-Weight Glutenin Subunit；molecular marker；transgene
　　
　　小麦是世界第一大粮食作物，是我国第三大粮食作物，近年来我国每年播种面积都在3 000万hm2左右，总产大约1.1亿t（《农村统计年鉴》，2006年）。小麦籽粒主要由蛋白质、淀粉和脂类等物质组成，其中蛋白质含量只有13%左右，但却是影响面粉食品加工品质的重要因素，较高的蛋白质含量一般与优良的烘烤品质有关。Osborne于1907年最早发表了关于谷类作物蛋白质分类的研究报告，将蛋白质组分按其在不同溶剂中溶解度的不同分为4类：溶于稀盐的是清蛋白（albumin）和球蛋白（globulin），溶于乙醇（70%）的是醇溶蛋白（glidian），不溶于稀盐和乙醇而能溶于稀醋酸的是谷蛋白（glutenin），这就是传统的“Osborne分类系统”。其中谷蛋白和醇溶蛋白是面筋的主要组成成分，约占小麦籽粒蛋白质含量的85%，醇溶蛋白是单体混合物，决定着面团的延展性和粘性；谷蛋白是通过亚基间的二硫键结合形成的高分子聚合物，决定着面团的弹性[1]。因此，谷蛋白亚基是影响小麦食品加工品质最为重要的因素。
　　目前分析谷蛋白亚基的主要方法是SDS-PAGE，根据在SDS-PAGE中的迁移率，谷蛋白分为A、B、C等3个区[1]，A区为高分子量谷蛋白亚基（High molecular weight glutenin subunit，简称HMW-GS），B区和C区为低分子量谷蛋白亚基（Low molecular weight glutenin subunit，LMW-GS）。高分子量谷蛋白基因位点（Glu-1）编码的亚基又分为x型和y型亚基（x型亚基分子量高，迁移率小；y型亚基分子量低，迁移率大）。大量研究证实，HMW-GS对小麦品质有重要影响[2-3]。
　　1普通小麦高分子量谷蛋白亚基的命名
　　常用的高分子量谷蛋白亚基的命名系统有Payne等[4-5]提出的“数字命名系统”、Payne等[6]提出的“字母命名系统”和目前应用最广的“数字-字母”命名系统。
　　1979年，Payne等用优质面包小麦品种Maris Widgeon和高产劣质小麦品种Maris Ranger杂交，发现有1个谷蛋白亚基与SDS沉淀值高度相关，即定名为1号亚基。1980年，Payne等又测定了Cappele、Desprez、Holdfast、Cheyenne、Spica、Hobbitsib、Berseé和Chinese Spring等品种的整倍体、单体及3个代换系的HMW-GS的带型，根据带型的相对位置从高到低依次确定了2~12号11个亚基，因此1~12亚基依迁移率由慢到快排列。1981年，Payne等又测定了Alcedo等10个品种HMW-GS带型差异较大的品种，发现在已编号的12个亚基的7号和8号亚基之间的空白区有4条新带出现，依次编为13~16号，即13~16亚基随亚基迁移率依次排列。后来随着研究工作的深入及新亚基的不断发现，要遵从数字与迁移率相关原则就有一定困难。为使用方便，Payne等[6]提出了“字母命名系统”。
　　字母命名系统是将HMW-GS的名称与其所在的染色体结合起来，对HMW-GS进行命名的系统。它的优点是用1个字母表示新鉴定的HMW-GS等位基因，而不影响其他基因的命名，且可直观地表示出HMW-GS基因所在的染色体。如Glu-A1a、Glu-A1b、Glu-A1c表示1A染色体上控制HMW-GS基因位点的3种等位基因。
　　为使用方便，Payne等[6]根据分析结果绘制了Glu-A1、Glu-B1、Glu-D1位点不同亚基的相对迁移率示意图，给出了不同标准品种的亚基类型（图1）。
　　“数字-字母”命名系统是将数字命名系统和字母命名系统结合起来的命名系统，此系统提供了HMW-GS所在染色体位置及其在SDS-PAGE上的迁移率。如Bx7＋By9中的Bx、By表示这2个亚基由染色体1B上的基因位点控制，数字7和9表示其迁移率。
　　2普通小麦高分子量谷蛋白亚基的基因定位
　　HMW-GS基因是一类多基因家族（multigene family），Payne等[4]利用中国春缺体―四体（NT）系和双端体（DT）系，与正常的整倍体中国春（CS）相比较，证明小麦高分子量谷蛋白亚基（HMW-GS）是由小麦第一部分同源群染色体上的3个复合位点控制的。
　　其基因位点分别位于1A、1B、1D长臂近着丝点处，分别命名为Glu-A1、Glu-B1、Glu-D1位点，总称为Glu-l位点[7]。每个位点编码分子量不同的2个亚基，普通小麦品种理论上应有6种不同的HMW-GS，但实际上仅有3～5种HMW-GS，原因是一些基因失去活性而成假基因，其中Glu-A1位点编码1个或0个HMW-GS，Glu-B1位点基因编码1个或2个HMW-GS，Glu-Dl位点编码2个HMW-GS[6-7]。大量研究表明，不同小麦品种HMW-GS组成图谱存在很大差异。
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　　HMW-GS具有广泛的多态性，Glu-A1位点有5个等位基因，即Glu-A1a、Glu-A1b、Glu-A1c、Glu-A1k和GIu-A1t，编码6种亚基，即N、1、2*、26、21*和21*+21*y，Glu-B1位点有16个等位基因，即Glu-B1a、Glu-B1b、Glu-B1c、Glu-B1d、Glu-B1e、Glu-B1f、Glu-B1g、Glu-B1h、Glu-B1i、Glu-B1j、Glu-B1k、Glu-B1l、Glu-B1r、Glu-B1s、Glu-B1ak和Glu-B1a1，编码18种亚基，即6+8、6+15、6.8+20、7、7+8、7*+8、7*+8*、7+8*、7+9、7+18、13+16、13+19、14+15、17+18、20、21、22和23+24；Glu-D1位点有18种等位基因，即Glu-D1a、Glu-D1b、Glu-D1c、Glu-D1d、Glu-D1e、Glu-D1f、Glu-D1g、Glu-D1h、Glu-D1i、Glu-D1j、Glu-D1n、Glu-D1q、Glu-D1x、Glu-D1y、Glu-D1ah、Glu-D1ai、Glu-D1aj和Glu-D1ak，编码26种亚基，即N、1.5+10、1.5+10.5、1.5+12、1.5+T2、2+10、2+10.5、2+11、2+12、2+12*、2+T2、2.1+10、2.1+10.5、2.1+12、1+T2、2.1*+10.5、2.1*+12*、2.2、2.2*、2.2+12、3+10.5、3+T2、4+10、5+9、5+10和5+12[6，8-9]。HMW-GS的广泛多态性为品质育种中优质亚基的聚合奠定了基础，提供了丰富的遗传变异，有利于小麦面筋强度的遗传改良研究，赋予了HMW-GS广阔的研究空间。
　　4普通小麦高分子量谷蛋白亚基的遗传
　　普通小麦高分子量谷蛋白亚基的遗传受基因型的控制，不受环境影响。不同的生态环境只影响各亚基含量及比例的变化[10，6]。小麦HMW-GS在F1代呈共显性和倾母遗传现象。倾母现象的产生与小麦双受精和3n胚乳形成时，来源于母本和父本的遗传物质分别占2/3和1/3所造成的基因剂量效应有关。这种共显性遗传，异质位点呈混合型，同质位点呈单一型，由于剂量效应的存在，呈混合型的异质位点等位基因总表达量与同质位点等量或接近，故优劣亚基杂合基因型品质界于两者之间[11]，在F2籽粒中，1对等位基因差别的分离比例为纯合（亲本1）∶杂合∶纯合（亲本2）=1∶2∶1，回交后代分离比为纯合∶杂合=1∶1。由此可见，控制HMW-GS的基因为孟德尔式基因，其遗传行为遵从孟德尔的基因独立分配和自由组合规律[6]。
　　5普通小麦高分子量谷蛋白亚基的结构和功能
　　所有高分子量谷蛋白亚基的氨基酸序列都可以分为3个相似的区域：非重复氨基酸序列的N-末端区（81～104个氨基酸残基）和C-末端区（42个残基）、高度重复的中部区（481～681个残基）[12]。N端和C端含有Cys残基，从而形成分子间二硫键，产生高分子量的线形聚合物，这些聚合物使得面团具有良好的弹性。半胱氨酸残基主要分布在两端区，所有的y-型亚基都有6个半胱氨酸残基（HC1~6），均分布在非重复的端区，5个在N-末端区，1个在C-末端区，其中HC3和HC4是y-型亚基所独有的。所有的x-型亚基均有4个半胱氨酸残基（HC1、HC2、HC5、HC6），3个在N-末端区，1个在C-末端区（只有硬粒小麦谷蛋白亚基1Bx20例外）。缺失事件导致2个半胱氨酸丢失，使得x-型亚基比y-型亚基少2个半胱氨酸。
　　由序列比较可知，两端区的氨基酸序列同源性很高（表1）。Van Dijk等[13]亚克隆了1Dx5的N-末端区，并在细菌表达系统表达、纯化，研究了其初级结构。结果表明，N-端区决定亚基的溶解性；圆二向色谱和荧光色谱发现其结构组成具pH值依赖性，在低pH值时稳定；经热和脲变性后发现了2个独立的展开区，一个随pH值的变化稳定性下降，另一个不受pH值的影响。
　　中部重复区是由六氨基酸肽段（Pro-Gly-Gln-Gly-Gly-Gln）、九氨基酸肽段（Gly-Tyr-Tyr-Pro-Thr-Ser-Pro/Leu-Gln-Gln）和三氨基酸肽段（Gly-Gln-Gln）形成的重复结构，疏水性较强，Gln、Cys和Gly的含量较高，各肽段的数目因亚基不同而有差异，其中三氨基酸肽段仅存在于x-型亚基中。
　　中部重复区的氨基酸序列变化大主要归因于其重复单元数目的不同[1]。在x-型或y-型亚基中，由同一位点控制的等位基因变异的差异也只存在于中部重复区[14]，如Glu-D1位点编码亚基中部重复区都含有21个九氨基酸肽段，除此之外1Dx亚基含有73个六氨基酸肽段、20或23个三氨基酸肽段，而1Dy亚基含有47或49个六氨基酸肽段。1Dy10和1Dy12只是在近C-末端区的中部重复区有6个氨基酸序列的差异。1Dx2.2*比1Dx2延长了中部重复区[15]；1Bx17与1Bx7相比有2个氨基酸易位和36个氨基酸缺失[16]。面筋弹性是衡量面粉食品加工品质的主要指标之一。通过对HMW-GS相似序列的蛋白质的研究，发现中部重复域在水中有高水平的泳动性，由β-转角和β-折叠构成，并随水的组成比例不同而不同。据电镜结果推测，高分子量谷蛋白亚基重复域的氢键负责面筋的弹性。
　　谷蛋白亚基不仅决定面筋的弹性，同时也决定面团的强度，其作用主要依赖于其分子间二硫键形成聚合体的能力。2个半胱氨酸可以形成链内或链间二硫键，二硫键对于谷蛋白亚基之间相互作用形成和维持谷蛋白聚合体的结构和功能有重要意义。y-型亚基1By9、1Dy10和1Dy12靠近C-末端区的中部重复区有1个半胱氨酸残基（HCb）。同样，在x-型亚基1Dx5的N-末端区靠近中部重复区的位置也有1个半胱氨酸残基（HCa），而1Dx2没有，可能是由于这个半胱氨酸残基能够增加链间二硫键的数目使得1Dx5+1Dy10比1Dx2+1Dy12形成较大谷蛋白聚合体的比例增加[17]，从而使面筋弹性增强。1Bx7和1Dx5的N-端区氨基酸序列具有同源性，但其二硫键的形成方式不同。5亚基的前2个半胱氨酸位于连续的α-螺旋区内，若螺旋的折叠迅速发生，这2个半胱氨酸的巯基相距2.2 nm，从而不能形成链内二硫键；7亚基的α-螺旋在前2个半胱氨酸处中断，该中断区可能形成反式γ-转角，这2个半胱氨酸的巯基相距0.4 nm，很可能形成链内二硫键。
　　高分子量谷蛋白亚基以延伸的棒状蛋白形式存在[18-19]。非重复的N-末端和C-末端区的肽段有形成α-螺旋的倾向，构成一种球状结构[12]；中部重复区的氨基酸则易形成反向的β-折叠，并有规律地组织起来形成松散的β-螺旋结构[18-19]，对面筋的弹性起着重要作用。由硬粒小麦的1Bx20隧道电镜观察到的棒状β-螺旋的直径是19.5 A，螺间距为14.9 A。不同亚基中部重复区的氨基酸组成不同，因而形成的反式β-折叠有所不同。以1Dy10和1Dy12为例，前者的氨基酸残基数目少于后者，但在SDS-PAGE图谱上迁移慢，这是由于1Dy10的近C-末端区的中部重复区的6个氨基酸序列的差异，使得1Dy10重复单元的比例提高，产生了更规则的β-折叠，在还原剂处理时更不易变性[20]，这也是1Dy10比1Dy12烘烤品质优良的主要原因。
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文 　　6高分子量谷蛋白亚基组成与小麦品质的关系
　　谷蛋白的数量与品质性状有关[21]，但Payne等[5-6]认为HMW-GS构成对品质性状的影响更大。
　　Glu-1位点对小麦品质有加性效应、上位效应和互作效应。大量研究表明，Glu-1位点对小麦品质性状的加性效应大小为Glu-D1>Glu-A1>Glu-B1[3，5，7]；Lawrence等[22]和Gupta等[17]的研究结果则表明，Glu-1位点对小麦品质性状的加性效应大小为Glu-D1>Glu-B1>Glu-A1，可能原因是Glu-D1和Glu-B1编码的亚基较多的缘故。Carrillo等[23]和Kolster等[24]的研究显示，HMW-GS位点对品质性状有上位效应。Nieto-Taladriz等[25]提出，Glu-B1、Glu-A3/Glu-A1和Glu-D1位点对面团特性有上位效应和加性效应，加性效应和上位效应均能解释面团粘性变异的15%，分别解释面团延展性变异的4%和15%，解释面筋强度变异的9%和14%。Glu-1位点对面包品质的加性效应占11%~15%，上位效应占6%~7%，互作效应稍小[24]。Gupta等[2]提出，Glu-A1和Glu-A3位点对小麦品质性状的互作效应未达显著水平，而Glu-A1与Glu-D1以及Glu-B1与Glu-D1之间的互作效应达显著水平；Kolster等[24]的结果则表明两位点间的互作效应均未达显著水平。由此可见，对Glu-D1位点编码的HMW-GS与面包品质性状的关系已有较一致的认识，由于遗传背景的影响，用不同材料研究Glu-A1和Glu-B1位点编码的HMW-GS对品质的效应，所得结果差异很大[26]。国内对HMW-GS位点的效应分析仅限于位点的加性效应，品质指标测试项目单一，多以沉降值作为烘烤品质的预测指标，但沉降值受蛋白质含量的影响较大，难以得出准确的结论，加之中国材料变异类型多，HMW-GS位点对品质性状的效应尚需进一步研究。
　　国外对HMW-GS的组成与面包品质性状的关系进行了大量研究[2，7，22-24，27]。HMW-GS组成已成为品质育种中亲本选配和杂交后代选择的重要依据。国内外许多学者研究了单个HMW-GS对烘烤品质的贡献大小[7，27-28]，说明不同HMW-GS对小麦品质贡献不同。除此而外，Brites等[29]和王瑞等[30]的研究表明，Glu-B1位点的14+15与Glu-D1的5+10一样，均赋予普通小麦和硬粒小麦更高的SDS-沉降值及更长的面团形成时间。马传喜等[31]认为Glu-B1位点17+18亚基赋予小麦更高的SDS-沉降值。张延滨等[32]研究了龙麦2+12和5+10亚基近等基因系的面粉品质差异，结果表明，5+10亚基对面粉品质贡献确实优于2+12亚基。赵友梅等[33]提出，HMW-GS组成为2*、7+8和5+10的小麦品种，其面粉品质和面包烘烤品质较好，HMW-GS组成为N、7+9和2+12的小麦品种的品质较差。
　　Payne[7]假设1A、1B、1D染色体上3个位点的基因效应是累加的，位点间不存在互作，根据单个或成对HMW-GS与SDS-沉降值的关系，建立了Glu-1品质评分体系，该Glu-1评分能解释面包烘烤品质差异的30%～60%。赵友梅等[33]、赵和等[3]、毛沛等[28]根据HMW-GS构成特点，分别制定了HMW-GS新的评分系统和方程，使Glu-1位点HMW-GS评分更趋完善。He等[34]研究表明，中国小麦的Glu-1位点HMW-GS平均评分为6.7分，变幅为3～10分，随着Glu-1位点HMW-GS品质评分的增加，馒头品质评分呈上升的趋势。张勇等[35]的研究结果显示，中国春播麦区小麦HMW-GS平均评分为7.8分，高于冬播麦区。总之，Payne [7]的评分系统在一定程度上可作为小麦食品加工品质预测指标，但该评分系统未考虑位点间互作对品质的影响，难以得出HMW-GS与品质关系的准确结论，应根据试验材料作相应矫正分析。
　　7高分子量谷蛋白亚基分子标记的开发
　　高分子量谷蛋白亚基的鉴定以往常采用SDS-PAGE的方法，但由于不同亚基的分子量非常接近（如7和7*，8和8*），用SDS-PAGE的方法不能把它们区分开，再者SDS-PAGE的方法只能在小麦收获后用籽粒进行鉴定，不能在收获前确定其基因型，因此大量的谷蛋白分子标记被开发出来。Smith等[36]开发了一个可以区分Dx2和Dx5亚基的共显性标记，同年D′Ovidio等[14]开发了Dx5亚基的特异性分子标记，含Dx5亚基的材料可扩增出1条450 bp的条带，而含有Dx2、3、4、2.2和2.2*的材料没有扩增出450 bp条带。Lafiandra等[37]等设计了可以区分Glu-1Ax位点等位基因的引物，具有1Ax1或1Ax2*亚基的品种能扩增出1 500 bp的条带，而1Axnull只能扩增出920 bp的条带。Ahmad等[38]根据已公布的1Bx7亚基的两端序列设计了特异性引物，扩增出1Bx7亚基特异性条带2 373 bp。Ma等[39]根据已公布的1Ax2*亚基的序列，在其N端和中间重复序列设计了特异性引物，能扩增出1Ax2*亚基1 319 bp的特异性条带，同时也设计了1Dx5亚基的特异性引物能扩增出1Dx5特异条带478 bp。Radovanovic等[40]设计了优质亚基1Bx7OE的特异性引物，能扩增出1Bx7OE特异的条带1 116 bp，其他1Bx位点的亚基均不能扩增出条带。Butow等[41]设计了1Bx位点的共显性分子标记，1Bx7OE亚基能扩增出约563 bp的条带，而其他等位基因扩增出520 bp的条带。Lei等[42]依据已发表的1By位点的基因序列设计开发了1By8、1By9、1By16的特异性分子标记，1By8为显性标记，1By9和1By16为共显性标记。Xu等[43]报道开发了1Bx位点优质亚基1Bx14和1Bx17的特异性分子标记，因这2个标记为共显性标记，用这2个引物同时进行扩增基本上可以区分Glu－Bx位点的等位基因。
　　8高分子量谷蛋白亚基的克隆与转基因研究
　　目前，从GeneBank可搜索到的关于高分子量谷蛋白亚基的克隆序列有594个记录，其中可以检索到的从普通小麦克隆到的高分子量谷蛋白亚基序列如表2所示。
　　利用转基因技术导入外源优质小麦高分子量谷蛋白亚基基因是改良小麦品质有效途径，大部分报道转优质谷蛋白亚基基因都可以提高小麦面包加工品质并赋予其新的功能特性。Blechl 等[44]将高分子量谷蛋白亚基1Dx5和1Dxl0基因转入普通栽培小麦Bob White，发现外源基因拷贝数的增加，有利于HMW-GS和其他贮藏蛋白的积累。Altpeter等[45]将1Axl基因导入普通小麦，1Axl基因编码蛋白占总蛋白的含量增加从而影响小麦面包的烘烤品质。Barro等[46]也将优质亚基基因转入普通小麦，部分植株导入的新亚基的表达水平远高于内源亚基的表达，改善了小麦品质。Alvarez等[47]将1Axl和1Dx5亚基基因转入一个商业栽培小麦，得到的后代有的正常表达，有的过量表达，还观察到基因沉默的现象。Barro等[48]研究了转入1Axl和1Dx5亚基基因的小麦转基因系的面粉的功能特性。Rakszegi等[49]报道了转1Axl不同拷贝数转基因小麦在大田种植材料的品质特征。小麦及其近源物种中高分子量谷蛋白亚基基因的不断克隆和优质基因的发掘，可以将优质的谷蛋白亚基基因转入普通栽培小麦，因此利用转基因技术改良小麦品质前景广阔。
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　　[1] PAYNE P I，COIFIELD K G.Subunit composition of wheat glutenin proteins isolated by gel filcration in a dissociating medium[J].Planta，1997（145）：83-88.
　　[2] GUPTA R B，SINGH N K，SHEPHERD K W.The cumulative effect of allelic variation in LMW and HMW glutenin subunits on dough properties in the progeny of two bread wheats[J].Theoretical and Applied Genetics，1989（77）：57-64.
　　[3] 赵和，卢少源，李宗智.小麦高分子量麦谷蛋白亚基的遗传变异及其与品质和其它农艺性状关系的研究[J].作物学报，1994，20（1）：67-75.
　　[4] PAYNE P I，CORFIELD G，HOLT M，et al.Correlations between the inheritance of cereal high-molecular-weight subunits of glutenin and bread-making quality in progenies of six crosses of bread wheat[J].J Sci Food Agric，1980（32）：51-60.
　　[5] PAYNE P I.HOLT L M，LAW C N.Structural and genetical studies on the high-molecular-weight subunits of wheat glutenin[J].Theoretical and Applied Genetics，1981（60）：229-236.
　　[6] PAYNE P I，LAWRENCE G J.Catalogue of alleles for the complex gene loci，Glu-A1，Glu-B1，and Glu-D1 which code for high-molecular-weight subunits of glutenin in hexaploid wheat[J].Cereal Research Com-munications，1983（11）：29-35.
　　[7] PAYNE P I.Genetics of wheat storage proteins and the effect of allelic variation on bread-making quality[J].Annual Review of Plant Physio-logy，1987（38）：141-153.
　　[8] MARCHYLO B A，LUKOW O M，KRUGER J E.Quantitative variation in high molecular weight glutenin subunit 7 in some Canadian wheats[J].Journal of Cereal Science，1992（15）：29-37.
　　[9] PFLIIGER L A，SUATEZ E Y，AFIANDRA D L.Relationships between wheat high molecular weigh quality subunits compositions，1RS tran-slocations and SDS sedimentation volume[J].J Genet & Breed，1998（52）：271-279.
　　[10] AURENCE G J，SHEPERD K W.Inheritance of glutenin subunits of wheat[J].TAG，1981（60）：333-337.
　　[11] 李保云，王岳光，刘凤鸣，等.小麦高分子量谷蛋白亚基与小麦品质性状关系的研究[J].作物学报，2000，26（3）：322-326.
　　[12] SHEWRY P R，HALFORD N G，TATHAM A S.High molecular-weight subunits of wheat glutenin[J].Journal of Cereal Science，1992（15）：105-120.
　　[13] VAN DIJK A A，VAN SWIETEN E，KRUIZE I T，et al.Physical chara-cterisation of the N-terminal domain of HMW-GS Dx5 from wheat[J].Journal of Cereal Science，1998（28）：115-126.
　　[14] D"OVIDIO R D，ANDERSON O D.PCR analysis to distinguish between alleles of a member of a multigene family correlated with wheat bread-making quality[J].Theoretical and Applied Genetics，1994（88）：759-763.
　　[15] BUONOCORE F，HICKMAN D R，CAPORALE C.Characterization of a novel HMW-GS encoded by chromosome 1D of bread wheat[J].J Cereal Sci，1996（23）：55-60.
　　[16] REDDY P，APPELS R.Analysis of a genomic DNA segment carrying the wheat HMW-GS Bx17 and its use as a RFLP marker[J].Thero Appl Genet，1993（85）：616-624.
　　[17] GUPTA R B，MACRITCHIE F.Allelic variation at glutenin subunit and gliadin loci，Glu-1-Glu-3 and Gli-1，of common wheats.II.Biochemical basis of the allelic effects on dough properties[J].Journal of Cereal Science，1994（19）：19-29.
　　[18] TATHAM A S，MIFLIN B J，SHEWRY P R.The beta-turn conformation in wheat gluten proteins: relationship to elasticity[J].Cereal Chem，1985（62）：405-412.
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文 　　[19] FIELD J M，TATHAM A S，SHEWRY P R. The structure of a high Mr subunit of durum wheat（Triticum durum）glutenin[J].Biochem J，1987（247）：215-221.
　　[20] FLAVELL R B，GOLDSBROUGH A P，ROBERT L S.Genetic variation in wheat HMW-GS and the molecular basis of bread making quality[J].Bio/Technology，1989（7）：1281-1285.
　　[21] KHAN K，TAMMING G，LUKOW O.The effects of wheat flour proteins on mixing and baking quality correlations of with protein fractions and HMW-GS composition by gel electrophoresis[J].Cereal Chem，1989（66）：391-396.
　　[22] LAWRENCE G J，MAC RITCHIE F，WRIGLEY C W.Dough and baking quality of wheat lines deficient in glutenin subunits controlled by the Glu-A1，Glu-BI and Glu-DI loci[J].Journal of Cereal Science，1988（7）：109-112.
　　[23] CARRILLO J M，ROUSSET M，QUALSET C O，et al.Use of recombi-nant inbred lines of wheat for studying the associations of high-mole-cular-weight glutenin subunits alleles to quantitative traits.l.Grain yield and quality prediction tests[J].Theor Appl Genet，1990（79）：321-330.
　　[24] KOLSTER P，EEUWIJK F A，VAN GELDER W M J.Additive and epi-static effects of allelic variation at the high-molecular-weight glutenin subunit loci in determining the bread-making quality of breeding lines of wheat[J].Euphytica，1991（55）：277-285.
　　[25] NIETO-TALADRIZ M T，PERRETANT M R，BOUGUENNEC A.Effect of gliadins and HMW and LMW subunits of glutenin on dough pro-perties in the F6 recombinant inbred lines from a bread wheat cross[J].Theor Appl Genet，1994（88）：81-88.
　　[26] MANIFESTO M M，FEINGOLD S，HOPP H E，et al.Molecular markers associated with differences in bread-making quality in a cross between bread wheat cultivars with the same high Mr glutenins[J].J Cereal Sci，1998，27（3）：217-227.
　　[27] BRONNEKE V，ZIMMERMANN G，KILLERMANN B.Effect of high molecular weight glutenins and D-zone gliadins on bread-making quality in German wheat varieties[J].Cereal Research Communications，2000，28（1-2）：187-194.
　　[28] 毛沛，李宗智，卢少源.小麦高分子量谷蛋白亚基对面包品质性状的效应分析[J].华北农学报，1995，10（S1）：55-59.
　　[29] BRITES C，CARRILLO T M.Influence of high molecular weight and low molecular weight glutenin subunits controlled by Glu-1 and Glu-3 loci on durum wheat quality[J].Cereal Chemistry，2001，78（1）：59-63.
　　[30] 王瑞，宁锟.一些优质小麦及其杂种后代高分子量麦谷蛋白亚基组成与面包品质之关系[J].西北农业学报，1995（4）：25-30.
　　[31] 马传喜，吴兆苏.小麦胚乳蛋白质组分及高分子量麦谷蛋白亚基与烘烤品质的关系[J].作物学报，1993，19（6）：562-666.
　　[32] 张延滨，辛文利，孙连发，等.小麦2+12与5+10亚基近等基因系间面粉品质差异的研究[J].作物学报，2003（29）：93-96.
　　[33] 赵友梅，王淑检.高分子麦谷蛋白亚基的SDS-PAGE图谱在小麦品质研究中的应用[J].作物学报，1990，16（3）：208-218.
　　[34] HE Z H，PENA R J，RAJARAM S.High molecular weight glutenin sub-unit composition of Chinese bread wheats[J].Euphytica，1992（64）:11-20.
　　[35] 张勇，何中虎，张艳，等.春播麦区小麦高分子量麦谷蛋白亚基变异及其与品质性状关系的研究[J].华北农学报，1999（14）：2-9.
　　[36] SMITH R L，SCHWEDER M E，BARNETT R D.Identification of glute-nin alleles in wheat and triticale using PCR-generated DNA markers[J].Crop Science，1994（34）：1373-1378.
　　[37] LAFIANDRA D，TUCCI G，PAVONI A，et al.PCR analysis of x- and y-type genes present at the complex Glu-A1 locus in durum and bread wheat[J].Theoretical and Applied Genetics，1997（94）：235-240.
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文 　　[38] AHMAD M.Molecular marker-assisted selection of HMW glutenin alleles related to wheat bread quality by PCR-generated DNA markers[J].Theoretical and Applied Genetics ，2000（101）：892-896.
　　[39] MA W，ZHANG W，GALE K R.Multiplex-PCR typing of high molecular weight glutenin alleles in wheat[J].Euphytica，2003（134）：51-60.
　　[40] RADOVANOVIC N，CLOUTIER S.Gene-assisted selection for high molecular weight glutenin subunits in wheat doubled haploid breeding programs[J].Molecular Breeding，2003（12）：51-59.
　　[41] BUTOW B J，GALE K R，IKEA J，et al.Diversity and dissemination of Bx7 glutenin subunits revealed by novel PCR markers and RP-HPLC[J].Theoretical and Applied Genetics，2004（109）：1525-1535.
　　[42] LEI Z S，GALE K R，HE Z H，et al.Y-type gene specific markers for enhanced discrimination of high-molecular weight glutenin alleles at the Glu-B1 locus in hexaploid wheat[J].Cereal Sci，2006（43）：94-101.
　　[43] XU Q，XU J，LIU C L，et al.PCR-based markers for identification of HMW-GS at Glu-B1x loci in common wheat[J].J Cereal Sci，2007：In Press.
　　[44] BLECHL A E，ANDERSON O D.Expression of a novel high-molecular-weight glutenin subunit gene in transgenic wheat[J].Nature Biotechno-logy，1996（14）：875-879.
　　[45] ALTPETER F，VASIL，SRIVASTAVA V，et al.Integration and expression of the high-molecular-weight subunit 1Ax1 gene into wheat[J].Nature Biotechnology，1997（14）：1155-1159.
　　[46] BARRO F，ROODE L，B S，et al.Transformation of wheat with high molecular weight subunit genes results in improved functional properties[J].Nature Biotechnology，1997（15）：1295-1299.
　　[47] ALVAREZ M.L，GUELMAN S，HALFORD N G，et al.Silencing of HMW glutenins in transgenic wheat expressing extra HMW subunits[J].Theoretical Applied Genetics，2000（100）：319-327.
　　[48] BARRO F，BARCELO P，LAZZERI P A，et al.Functional properties and agronomic performance of transgenic Tritordeum expressing high mole-cular weight glutenin subunit genes 1Ax1 and 1Dx5[J].Journal of Cereal Science，2003（37）：65-70.
　　[49] RAKSZEGI M，PASTORI G，JONES H D，et al.Technological quality of field grown transgenic lines of commercial wheat cultivars expressing the 1Ax1 HMW glutenin subunit gene[J].Journal of Cereal Science，2007：In Press.
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