Al-Cu-Mg_回心草总黄酮与Ｍｇ、Ｆｅ、Ｍｎ、Ｃｕ、Ｚｎ的测定分枥及其药效机理的研究
摘要：分析云南地产中草药回心草总黄酮与微量元素Mg、Fe、Mn、Cu、zrI的含量。紫外分光光度法测定回心草中总黄酮的含量；原子吸收分光光度法测定Mg、Fe、Mn、cu、zn的含量。总黄嗣的舍量4，316 mg／g；Mg：1335，8774±5，5167mg／g；Fe：5239，5059±66，2673／，tg／g；Mn：343，7009±2，5763弘g，g；Cu：12，9448±0，1435／tg／g；Zn：40，3146±1，2603。实验结果为探讨中药回心草中总黄酮舍量与微量元素的关系，研究回收草中微量元素与治疗心脑血管痰病的关系提供了有用的方法和依据。
关键词：回心草；总黄酮；微量元素
中图分类号：R 282，71
文献标识码：A
文章编号：0367-6358(2007)12-713-03
作者简介：董顺福(1963－)，男，学士。教授，主要从事化学光谱分析及中药有效成份的研究。
回心草产于滇西北地区的云南丽江玉龙雪山上。生长的潮湿林地或湿润的岩石及石缝中，具有安神镇静、治心慌、心悸等心脑血管疾病，含有邻苯二甲酸二丁酯、对聚伞花素及微量元素等多种化学成分。现代研究表明，微量元素和总黄酮与人体的生物功能具有密切的关系，为研究中药回心草中微量元素和总黄酮的分析方法及其含量与治疗心脑血管疾病的关系，本文采用紫外分光光度法测定了回心草中总黄酮的含量，用原子吸收分光光度法测定了Mg、Fe、Mn、cu、zII 5种矿物元素的含量。对微量元素和总黄酮与治疗心脑血管疾病的关系进行了系统的分析研究。
1 金属元素含量的测定
1.1材料和试剂
回心草，采自云南地产中草药。
HN03，HCIo4均为优级纯。
标准储备液，Mg、Fe、cu、Zn均为国家标准溶液(NCS)，浓度为1mg／mL，国家钢铁材料测试中心，Mn储备液浓度为0，5 mg／mL，中国环境检测总站。使用液浓度：Mg为100g／mL；Fe、cu、zn均为50g/mL;Mn为20g/mL。去离子高纯水(电阻率为106Ω／cm)。
1.2仪器及仪器工作条件
HC-9006型原子吸收分光光度计，附80586计算机及FAAS软件处理系统。
原子吸收分光光度计仪器工作条件见表1。
1.3样品处理
随机取干燥样品100 g，研碎。充分混匀，准确称取1，000 g。平行称取3份，于25 mL锥形瓶中，加浓HN010 mL，密封过夜，次日加浓HN03 10 mL，HC1045mL，置电热板上缓慢加热消化，至溶液呈无色透明，近千为止。冷却后，转移至25 mL容量瓶中，用4％I-HNO3定容至刻度，混匀备用。
1.4标准溶液
各元素标准系列工作液见表2。
按仪器最佳工作条件分别测定各标准系列工作液。由计算机绘出标准曲线，算出回归方程和相关系数。在本工作范围内，各元素线性关系良好。
1.5样品含量测定
按表1所列仪器最佳工作条件：用火焰原子分光光度法吸收法测定样品溶液中cu、zn、Mn的含量，测定Mg、Fe时需将样品稀释10倍后再行测定。Mg的测定加10％的LA(No)，可排除ca、K、Na等的干扰。
回心草中Mg、Fe、Mn、cu、zn元素的回归方程、相关系数和含量测定结果见表3。
2 总黄酮的测定
2.1乙醇提取回心草中总黄酮
准确称取中药回心草10，0g于索氏提取器中，120mL乙醇回流4h，至无色，换成70％乙醇提取10h，过滤，减压浓缩至20mL左右，等体积石油醚萃取，用70％乙醇定容至100 mL，在200―400 nm波长范围内紫外扫描，最大吸收波长为284nm。
2.2标准曲线绘制
准确称取干燥至恒重的芦丁标准品(F20060930，国药集团化学试剂有限公司)0，0760 g，用30％乙醇溶解后，转移至250mL容量瓶中，30％乙醇定容，摇匀备用。溶液浓度为0，3040 mg／mL。准确转移上述芦丁溶液0，00、1，20、1，60、2，00 mL于25 mL锥形瓶中，加30％乙醇至12，5 mL，加入0，8 mL 5％NAN02溶液，放置5 min；加0，8 mL 5％Al(N03)3溶液，放置6 min，加5 mL 4％NaOH溶液，30％乙醇稀释至刻线，放置10 rain，紫外分光光度计于510 nm处测定吸收度，绘制标准曲线。
回归方程：A=9，250c+0，001
相关系数：r=1，000
2.3 回心草中总黄酮的测定
准确量取提取液0，50 mL于25 mL容量瓶中，加30％乙醇至12，5 mL，加入0，8 mL 5％NaNO，溶液，放置5 rain，加0，8 mL 5％Al(No)溶液，放置6mln，加5 mL 4％NaOH溶液，30％乙醇稀释至刻线，放置10 rain，于510 nm处测定吸收度A=0，159。总黄酮含量为4，316±0，076mg，g，RSD％=1，77％。
3 讨论
研究表明回心草具有安神镇静，治疗心慌、心悸等心脏疾病的功效，长期服用可以起到疏通血管，软化血管，使血管恢复弹性，改善血液循环的作用。黄酮类化合物是中草药中的重要的天然产物，是中草药中的有效成分，天然来源的生物黄酮能被人体迅速吸收，能通过血脑屏障进入脂肪组织，消除疲劳，保护血管，防止动脉硬化。能使超氧化物岐化酶(SOD)活性加快，提高机体抗氧化能力及对NO的降解，明显扩张微细血管，降低血管阻力，增加脑血流量，改善微循环、清除自由基的作用。
微量元素作为药物中有机成分的中心原子，有利于药物有效成分的合成和作用，微量元素的研究有助于研究中草药的生长规律、药物的功效和中药的质量控制。临床微量元素学研究证明，镁具有光谱抗心率失常作用，对急性缺血缺氧引起的严重室性快速心律失常有明显的效果。锰参与人体氧化还原、磷酸化过程，是碱性磷酸酶等多种酶的激活剂。可以改善动脉硬化患者的脂类代谢。是SOD的重要组成部分，在清除超氧化物，增强机体免疫功能方面具有重要的影响，可以有效消除体内自由基，具有传导信息、调控脑、中枢神经、保护细胞膜的结构与功能。铜是血红蛋白的活化剂，体内铜缺乏会引起心肌细胞氧化代谢紊乱，诱发动脉硬化，铜元素可以防止动脉壁的弹力纤维胶原降解，保护血管壁内膜的完整性，阻止动脉粥样硬化的发生和发展。中药中的黄酮类化合物与金属离子可以相互作用，芦丁与金属铁、锰、铜相互协同作用可以有效去除体内游离基，有实验研究表明，芦丁铜对实验产生的o2自由基具有较好的清除作用，且清除活性大于芦丁的作用。本实验采用原子吸收分光光度法测定了Mg、Fe、Mn、Cu、zn的含量，结果表明，本方法准确快速，灵敏度高，精密度好，对于测定药用植物中的微量元素含量。是一种有效的分析方法。
提取总黄酮溶剂可采用不同浓度的甲醇、乙醇，实验表明，醇提取效果较大提取效果好。本实验用乙醚回流，去除药品中脂溶性色素，选用70％乙醇作溶剂，可以有效提取药物中黄酮类化合物。用石油醚进一步萃取后，除去溶于乙醇中的杂质，避免和减少多种水溶性成分的析出。在显色反应中，碱性条件下，黄酮与铝离子形成稳定的配合物，设定扫描范围400-600 nm，确定总黄酮的波长为510nm，测定结果准确可靠。