【生长激素释放肽在非小细胞肺癌组织的表达及其意义】小细胞肺癌补肽好吗

　　[摘要] 目的 探讨生长激素释放肽（Ghrelin）在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义。 方法 应用免疫组织化学法检测72例肺癌组织及30例肺正常组织中Ghrelin的表达，分析在不同临床病理指标下Ghrelin的表达情况。 结果 在肺癌组织中Ghrelin阳性率为58.33%，显著高于正常肺组织的13.33%（P ＜ 0.05）；Ghrelin表达与临床分期、淋巴结转移有相关性（P ＜ 0.05），与性别、是否吸烟、病理分型、病理分级无关（P ＞ 0.05）。 结论 肺癌组织中Ghrelin过度表达，可能对肺癌的发生发展及侵袭转移起着一定的作用。
　　[关键词] 非小细胞肺癌；免疫组织化学；生长激素释放肽
　　[中图分类号] R734.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2012）07（b）-0007-03
　　Expression and significance of ghrelin in NSCLC tissue
　　ZHANG Xiaofei1 WEI Yaqiang2
　　1.Department of Oncology, Yan"an People"s Hospital, Shaanxi Province, Yan"an 716000, China; 2.Department of Respiratory Medicine, Yan"an People"s Hospital, Shaanxi Province, Yan"an 716000, China
　　[Abstract] Objective To explore the expression and clinical significance of ghrelin in non-small cell lung cancer (NSCLC). Methods The expression of ghrelin was detected in 72 lung cancerous tissues and 30 normal tissues using immunohistochemical staining method, to analyze the expression of ghrelin in the different clinicopathological parameters. Results The expression of ghrelin in lung cancerous tissues (58.33%) was significantly higher than that in lung normal tissues (13.33%) (P ＜ 0.05), the ghrelin positive rate was 58.33% in lung cancer tissue; there was correlation between the expression of ghrelin and clinical staging, lymph node metastasis (P ＜ 0.05), but no correlation with gender, smoking, pathological type, histological grade (P ＞ 0.05). Conclusion Ghrelin over expression maybe related to the pathogenesis and development of lung cancer.
　　[Key words] Non-small cell lung cancer; Immunohistochemistry; Ghrelin
　　1999年，Kojima等[1]发现生长激素释放肽（Ghrelin）是促生长激素分泌物受体（GHS-R）的第一个内源性配体，由28个氨基酸残基构成的一种小分子多肽。Ghrelin主要的产生部位是胃黏膜，但是在多种组织中也有表达，如肠道、胰腺、下丘脑、垂体、肾、胎盘等[2-4]，Ghrelin作为一种脑肠肽表现出了不同的生理调节功能。本次研究选择2007年9月～2009年12月我院收治的非小细胞肺癌（NSCLC）患者标本72例，所有患者均施行根治性手术治疗，通过观察Ghrelin在NSCLC组织中的表达，探讨其临床意义，现报道如下：
　　1 资料与方法
　　1.1 一般资料
　　研究对象为2007年9月～2009年12月在我院施行根治性手术治疗的NSCLC患者72例，设置肺正常组织作为对照，选择同期手术正常标本30例，经过病理HE染色确诊全部病例符合研究标准。72例患者中，男41例，女31例；年龄36～75岁，平均（64.5±2.5）岁；所有患者均未在术前接受任何的化疗放疗。患者在鳞癌、腺癌、高分化癌、中分化癌和低分化癌分别有42、30、28、22、22例。TNM分期（2009年肺癌国际分期修订版）中，Ⅰ～Ⅱ期45例，Ⅲ～Ⅳ期27例，发生与未发生淋巴结转移的各为32例和40例。
　　1.2 方法
　　1.2.1 试剂 纯化兔抗人Ghrelin抗体（一抗）（北京博奥森生物技术有限公司生产）。二抗和三抗的S-P试剂盒（福州迈新生物技术开发有限公司生产），包括内源性过氧化物酶阻断剂（3%双氧水），正常山羊血清工作液，二抗（生物素标记的山羊抗兔IgG）工作液，三抗（辣根酶标记的链霉卵白素）工作液，DAB（3，3-二氨基联苯胺）试剂盒。
　　1.2.2 标本处理及组织切片 所有组织标本都采用10%中性甲醛溶液进行固定，常规进行脱水，石蜡包埋处理，切片厚度5 μm，胶片捞片均涂有氨丙基-三乙氧基硅烷。
　　1.2.3 免疫组织化学法检测 免疫组化SP法，在60℃烤箱中放置染色石蜡切片，烤40 min，二甲苯脱蜡，梯度酒精水化。用pH 7.4的磷酸盐缓冲液（PBS）冲洗，然后滴加3%双氧水封闭，室温下进行10 min，以去除内源性过氧化物酶。用PBS冲洗5 min，冲洗3次；然后山羊血清封闭，室温下进行15 min；然后，滴加50 μL一抗溶液，在4℃温度下过夜。第2天，采用PBS冲洗5 min，冲洗3次，然后滴加二抗溶液，在37℃的温度孵育30 min；然后用PBS冲洗5 min，冲洗3次，然后滴加三抗溶液，在37℃的温度下孵育30 min；3，3-二氨基联苯胺显色，苏木素复染、脱水、透明、封片。光镜观察，空白阴性对照组每次染色的时候都以0.01 mmol/L PBS代替一抗溶液。