原核表达 人Ｎｄｆｉｐ１和Ｎｅｄｄ４的原核表达，纯化和抗体制备
发布时间：2019-02-16 04:08:52 影响了： 人
摘要：为了进一步从蛋白水平上检测Ndfip1(Nedd4 family interacting protein 1)和Nedd4(Neuronal precursorcell-expressed developmentally down-regulated 4)在肢带型肌营养不良(Limb-girdle muscular dystrophy，LGMD)患者的肌肉组织中的表达及功能，以正常人的脑和肾脏组织的总RNA为模板，RT-PCR扩增Ndfip1和Nedd4部分编码序列，构建原核表达重组质粒pET28b-hNdfip1和pET28b-hNedd4，转化大肠杆菌BL21后，加IPTG诱导蛋白表达，Ni-NTA层析柱纯化蛋白，免疫BALB/c小鼠制备抗体，Western blot检测显示抗体能识别人和小鼠的Ndfip1和Nedd4，小鼠各组织中Ndfip1的蛋白表达谱与文献报道的Ndfip1 mRNA表达谱不一致，暗示Ndfip1具有转录和翻译水平的调控。
关键词：Ndfip1；Nedd4；肢带型肌营养不良；抗体
中图分类号：Q78；R392
文献标识码：A
文章编号：1007-07847(2008)01-0040-05
Expression，Purification of hNdfip1 and hNedd4，and the Specific Antibody Preparation
注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文 本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文