【马齿苋多糖对雏鸡胸腺免疫功能的影响及其机制】马齿苋多糖提取工艺优化

　　摘要：为了观察马齿苋多糖（Ｐｏｒｔｕｌａｃｅ oｌｅｒａｃｅａ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＰＯＰ）对雏鸡胸腺免疫功能的影响，并探讨其可能的作用机制，试验通过对雏鸡灌注不同剂量的ＰＯＰ，测定雏鸡胸腺指数，应用ＭＭＴ（四甲基偶氮唑盐比色法）方法测定雏鸡胸腺淋巴细胞转化率，利用流式细胞器测定雏鸡胸腺淋巴细胞周期与胸腺Ｔ淋巴细胞亚群的变化。结果表明，ＰＯＰ能显著增加雏鸡胸腺淋巴细胞转化率和胸腺指数（Ｐ＜０．０５），淋巴细胞增殖指数显著提高（Ｐ＜０．０５），ＣＤ４＋ Ｔ淋巴细胞含量显著增加（Ｐ＜０．０５），ＣＤ８＋ Ｔ淋巴细胞数量变化不明显，ＣＤ４＋／ＣＤ８＋ Ｔ淋巴细胞比值显著升高（Ｐ＜０．０５）。ＰＯＰ可通过调节雏鸡胸腺内细胞水平的变化，增强雏鸡细胞免疫功能，促进免疫系统发育。
　　关键词：雏鸡；马齿苋多糖（ＰＯＰ）；胸腺指数；淋巴细胞转化率；淋巴细胞增殖指数；ＣＤ４＋／ＣＤ８＋
　　中图分类号：Ｒ２８５；Ｓ８５２．４ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）15－3264-03
　　Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｐｏｒｔｕｌａｃｅ oｌｅｒａｃｅａ Pｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｏｎ Ｔｈｙｍｕｓ Ｉｍｍｕｎｅ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｉｎ Ｃｈｉｃｋｅｎ ａｎｄ Ｉｔｓ Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ
　　ＧＥ Ｊｉａｎa，ＹＡＮＧ Ｃｕｉ－ｊｕｎb，ＳＵＮ Ｍａｏ－ｈｏｎｇa，ＬＩ Ｘｉｕ－ｈｕａa
　　（a． Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；b． Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ， Ｈｅｂｅｉ Ｎｏｒｔｈ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｚｈａｎｇｊｉａｋｏｕ ０７５０００， Ｈｅｂｅｉ，Ｃｈｉｎａ）
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＰＯＰ（Ｐｏｒｔｕｌａｃｅ oｌｅｒａｃｅａ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ） ｏｎ ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｔｈｙｍｕｓ ｉｍｍｕｎｅ ｆｕｎｔｉｏｎ ｉｎ ｃｈｉｃｋｅｎ， ａｎｄ ｓｔｕｄｙ ｉｔｓ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ， ４０ ｃｈｉｃｋｅｎｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ａｌｌｏｃａｔｅｄ ｔｏ ４ ｇｒｏｕｐｓ ａｎｄ ｆｅｄ ｗｉｔｈ ＰＯＰ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｌｅｖｅｌ. Aｎｄ ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｔｈｙｍｕｓ ｉｎｄｅｘｅｓ， ｔｈｅ ｔｈｙｍｕｓ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ａｎｄ ｔｈｙｍｕｓ ｃｅｌｌ ｐｅｒｉｏｄ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ３－（４，５－ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌ－２－ｙｌ）－２，５－ｄｉｐｈｅｎｙｌ ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ ｂｒｏｍｉｄｅ ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ ｍｅｔｈｏｄ（ＭＴＴ） ａｎｄ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｔｈｙｍｕｓ ｉｎｄｅｘｅｓ， ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ， ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｉｎｄｉｃｅｓ（ＬＰＩ）， ａｎｄ ｔｈｅ ＣＤ４＋Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｏｆ ＰＯＰ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ （Ｐ＜０．０５）. Tｈｅｒｅ was ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｃｈａｎｇｅ ｉｎ ＣＤ８＋Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ； ａｎｄ ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｂｅｔｗｅｅｎ ＣＤ４＋／ＣＤ８＋Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ was ｉｎｃｒｅａｓｅｄ （Ｐ＜０．０５）． Ｉｔ was ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ＰＯＰ ｃｏｕｌｄ ｅｎｈａｎｃｅ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｉｔｙ ｉｎ ｃｈｉｃｋｅｎ ｂｙ ａｄｊｕｓｔｉｎｇ ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｌｅｖｅｌ changes ｉｎ ｔｈｙｍｕｓ．
　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｃｈｉｃｋｅｎ； ＰＯＰ； ｔｈｙｍｕｓ ｉｎｄｅｘｅｓ； ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ； ＬＰＩ； ＣＤ4＋／ＣＤ８＋
　　中药多糖广泛存在于植物、动物和微生物细胞和细胞壁中，具有促进机体免疫力、抗菌、抗病毒、抗寄生虫、抗肿瘤、抗辐射、抗炎、降低血脂以及改善动物生产性能等一系列作用。其中多糖的免疫调节作用是主要的，它对机体的特异性和非特异性免疫功能具有增强作用，其作用机制是通过刺激单核-巨噬细胞系统的吞噬功能、促进淋巴细胞增殖和转化、促进抗体生成、诱导细胞因子的分泌、激活补体系统等途径实现对机体免疫系统功能的调节。尤其是中药多糖作为一种几乎无毒副作用的天然提取物，其药理作用甚广，在促生长及增强机体免疫方面有着重要的作用，是一类天然免疫增强剂［１－３］。
　　中药马齿苋（Ｐｏｒｔｕｌａｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ Ｌ．）为药食两用马齿苋科植物，是我国卫生部划定的７８种药食同源的野生植物之一。含有多种化学成分，包括蛋白质、脂肪、维生素、氨基酸、多糖、生物碱、黄酮类等，具有抗氧化、抗菌、增强免疫功能等药理活性作用。其中马齿苋多糖（Ｐｏｒｔｕｌａｃａ ｏｌｅｒａｃｅａ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＰＯＰ）是马齿苋的主要有效成分之一，已引起人们越来越多的关注。现代药理学研究表明，马齿苋多糖具有提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能、促进淋巴细胞转化、提高正常家兔淋巴细胞和ＰＨＡ诱导的淋巴细胞的增殖能力、扶植肠道正常菌群生长、调整菌群失调、防止感染等功能；并具有促进大鼠受损结肠黏膜修复，缓解大鼠溃疡性结肠炎的效应［４－８］。但迄今为止，关于马齿苋多糖对机体免疫机能的影响研究报道较少。本试验通过对雏鸡灌注不同剂量的ＰＯＰ，观察雏鸡胸腺指数、外周血淋巴细胞转化率、胸腺内细胞周期的变化，探讨ＰＯＰ对雏鸡免疫性能的影响，以期为马齿苋在兽医临床中的应用提供参考。