【Cu2+\Hg2+对泥鳅超氧化物歧化酶活性的影响】超氧化物歧化酶偏高的原因

　　摘要：研究了Ｃｕ２＋和Ｈｇ２＋ ２种重金属离子对泥鳅（Ｍｉｓｇｕｒｎｕｓ ａｎｇｕｉｌｌｉｃａｕｄａｔｕｓ）体内超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性的影响，并比较了肝脏和肾脏组织中ＳＯＤ活性的差别。在实验室条件下，将泥鳅置于不同质量浓度的Ｃｕ２＋（１．００、１．５０、２．００、２．５０、３．００ ｍｇ／Ｌ）及Ｈｇ２＋（０．０５、０．１０、０．１５、０．２０、０．２５ ｍｇ／Ｌ）溶液中，分别测定染毒２４、４８、７２ ｈ后，泥鳅肝脏和肾脏组织中ＳＯＤ的活性。结果表明，Ｃｕ２＋和Ｈｇ２＋对泥鳅肝脏和肾脏组织中ＳＯＤ活性的影响相似，低浓度的Ｃｕ２＋和Ｈｇ２＋对泥鳅肝脏和肾脏中ＳＯＤ活性有诱导作用；高浓度的Ｃｕ２＋、Ｈｇ２＋则使组织中ＳＯＤ活性降低，随着时间的延长，高浓度组的抑制作用更加明显。
　　关键词：重金属；泥鳅（Ｍｉｓｇｕｒｎｕｓ ａｎｇｕｉｌｌｉｃａｕｄａｔｕｓ）；ＳＯＤ；浓度
　　中图分类号：S949；X503.225文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）13－2710-03
　　
　　Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｃｕ２＋ ａｎｄ Ｈｇ２＋ ｏｎ Ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ Ｄｉｓｍｕｔａｓｅ Ａｃｔｉｃｉｔｙ ｉｎ
　　Ｍｉｓｇｕｒｎｕｓ ａｎｇｕｉｌｌｉｃａｕｄａｔｕｓ
　　
　　ＹＡＮＧ Ｈｏｎｇ－ｃｈａｏ，ＷＵ Ｙａｎ－ｌｉ
　　（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｓｈａｎｇｑｉｕ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｓｈａｎｇｑｉｕ ４７６０００， Ｈｅｎａｎ， Ｃｈｉｎａ）
　　
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｃｕ２＋ ａｎｄ Ｈｇ２＋ ｏｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ（ＳＯＤ） ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｉｎ ｌｉｖｅｒ ａｎｄ ｋｉｄｎｅｙ ｏｆ Ｍｉｓｇｕｒｎｕｓ ａｎｇｕｉｌｌｉｃａｕｄａｔｕｓ； ａｎｄ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｏｆ ＳＯＤ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｅｔｗｅｅｎ ｌｉｖｅｒ ａｎｄ ｋｉｄｎｅｙ ｗｅｒｅ ｃｏｍｐａｒｅｄ． Ｍ． ａｎｇｕｉｌｌｉｃａｕｄａｔｕｓ ｗａｓ ｅｘｐｏｓｅｄ ｔｏ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ ｗｉｔｈ Ｃｕ２＋（１．００， １．５０， ２．００， ２．５０， ３．００ ｍｇ／Ｌ）ｏｒ Ｈｇ２＋（０．０５， ０．１０， ０．１５， ０．２０， ０．２５ ｍｇ／Ｌ） ｕｎｄｅｒ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ； ａｎｄ ｔｈｅ ｔｉｓｓｕｅ ＳＯＤ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ａｆｔｅｒ ２４， ４８， ａｎｄ ７２ ｈｏｕｒｓ． Ｉｔ ｗａｓ ｆｏｕｎｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ＳＯＤ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｓｈｏｗｅｄ ｓｉｍｉｌａｒ ｔｅｎｄｅｎｃｙ ｗｈｅｎ ｅｘｐｏｓｅｄ ｔｏ Ｃｕ２＋ ｏｒ Ｈｇ２＋ ｉｎ ｌｉｖｅｒ ｏｒ ｋｉｄｎｅｙ． ＳＯＤ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｗａｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｗｈｅｎ ｅｘｐｏｓｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｌｏｗ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｅａｖｙ ｍｅｔａｌｓ， ｗｈｉｌｅ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ｈｉｇｈ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ of ｈｅａｖｙ ｍｅｔａｌs． Ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｈｉｇｈ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｗａｓ ｍｏｒｅ ａｎｄ ｍｏｒｅ ｓｅｖｅｒｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｐｒｏｌｏｎｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｉｍｅ．
　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｈｅａｖｙ ｍｅｔａｌ； Ｍｉｓｇｕｒｎｕｓ ａｎｇｕｉｌｌｉｃａｕｄａｔｕｓ； ＳＯＤ； ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
　　
　　近年来，由于工业的发展，大量含重金属的废水被直接或间接排入江河湖泊，水环境污染日益严重［１］，铜和汞是水环境中常见的重金属污染物，在有机体中有累积作用，并具有器官和组织毒性［２，３］。超氧化物歧化酶（Ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ，ＳＯＤ）是机体防御过氧化损伤系统的关键酶之一，其活性变化在一定程度上可反映污染物对生物体的影响，是一类敏感的分子生态毒理学指标［４，５］。
　　泥鳅（Ｍｉｓｇｕｒｎｕｓ ａｎｇｕｉｌｌｉｃａｕｄａｔｕｓ）属鲤形目（Ｃｙｐｒｉｎｉｆｏｒｍｅｓ）鳅科（Ｃｏｂｉｔｉｄａｅ）花鳅亚科（Ｃｏｂｉｔｉｎａｅ），是我国常见的经济鱼类。以泥鳅为对象，研究在不同质量浓度的Ｈｇ２＋、Ｃｕ２＋影响下，不同暴露时间其肝脏和肾脏组织ＳＯＤ活性的变化，从而了解重金属离子对水生动物ＳＯＤ的影响及其产生的生化毒害作用，以期为进一步探讨重金属污染对水生动物的毒害机理积累科学资料，为淡水鱼的养殖生产提供理论依据。
　　１材料与方法
　　１．１供试材料
　　实验所用泥鳅为购自河南省商丘３１０农贸市场的泥鳅成体，平均体长１５ ｃｍ，平均质量２５ ｇ。
　　１．２实验方法
　　１．２．１饲养条件购买的泥鳅在实验室水缸中先暂养７ ｄ，所用水为曝气４８ ｈ的自来水，ｐＨ值７．２～７．４，水温１６ ℃以上，暂养期间泥鳅活动正常，无病，死亡率小于５％。实验前１ ｄ停止喂食，选择身体健康、反应敏捷、大小基本一致的泥鳅用于实验。
　　１．２．２染毒采用静水法对泥鳅进行染毒［６］。在预实验的基础上，分别设置０．０５、０．１０、０．１５、０．２０和０．２５ ｍｇ／Ｌ ５个Ｈｇ２＋质量浓度，１．００、１．５０、２．００、２．５０和３．００ ｍｇ／Ｌ ５个Ｃｕ２＋质量浓度。将泥鳅随机分为１０个染毒实验组，每组３０尾，分别暴露在以上１０种溶液中。饲养容器为２０ Ｌ的玻璃缸，每２４ ｈ更换１次相同质量浓度的实验液，实验期间水体其他环境与驯养环境相同，不投饵，随时清除死泥鳅和排泄物。实验设置１个空白对照组，不添加Ｈｇ２＋、Ｃｕ２＋。
　　１．２．３酶样的制备分别于染毒后２４、４８和７２ ｈ采样，每次每组随机取泥鳅５尾，解剖后取出肝、肾脏置研钵内，称取质量，然后加入预冷的０．０５ ｍｏｌ／Ｌ的磷酸缓冲液（ｐＨ值７．８），用组织研磨器磨成匀浆，定容到１ ｍＬ刻度离心管中，于４ ℃、３ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１０ ｍｉｎ，上清液即为ＳＯＤ酶粗提液，分别测定各上清液体积并记录。
　　１．２．４ＳＯＤ活性的测定采用抑制ＮＢＴ光化还原的方法［７］测定ＳＯＤ活性。
　　１．３数据处理
　　实验数据采用平均数±标准差（ｎ＝３）表示，进行单因素方差分析（ＡＮＯＶＡ），各实验组与对照组之间的两两比较采用最小显著差数法（ＬＳＤ法），Ｐ＜０．０５时为差异显著，Ｐ＜０．０１时为差异极显著。
　　２结果与分析
　　对照组实验结果表明：在不添加Ｈｇ２＋、Ｃｕ２＋的情况下，泥鳅的ＳＯＤ活性分别为肝脏（４６３．６８±１９．６０） Ｕ／（ｇ・ｈ），肾脏（１ ６８４．３９±５３．５0）Ｕ／（ｇ・ｈ），且暴露后２４、４８和７２ ｈ ＳＯＤ活性没有显著差异。
　　２．１Ｃｕ２＋对泥鳅肝脏和肾脏ＳＯＤ活性的影响
　　由图１可见，处理２４ ｈ，１．００～２．００ ｍｇ／Ｌ染毒组泥鳅肝脏ＳＯＤ活性被诱导，其中１．００ ｍｇ／Ｌ染毒组肝脏ＳＯＤ活性升高极显著（Ｐ＜０．０１），２．００ ｍｇ／Ｌ染毒组肝脏ＳＯＤ活性稍有增高（Ｐ＞０．０５）；而２．５０和３．００ ｍｇ／Ｌ染毒组肝脏ＳＯＤ活性则均被抑制。处理４８ ｈ，１．００和１．５０ ｍｇ／Ｌ染毒组ＳＯＤ活性仍高于对照组，但已呈下降趋势；而２．５０和３．００ ｍｇ／Ｌ染毒组ＳＯＤ活性下降则达到极显著水平（Ｐ＜０．０１）。处理７２ ｈ，１．００ ｍｇ／Ｌ染毒组ＳＯＤ活性与对照组无显著差异，其他染毒组ＳＯＤ活性均显著或极显著降低（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。可见低浓度的Ｃｕ２＋在一定时间内对泥鳅肝脏ＳＯＤ活性具有显著或极显著的诱导作用（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），但随着处理时间的延长，泥鳅肝脏ＳＯＤ活性由被诱导逐渐变为被抑制；高浓度的Ｃｕ２＋抑制泥鳅肝脏ＳＯＤ活性，且处理时间越长，抑制越明显。
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文 　　处理时间为２４ ｈ时，１．００ ｍｇ／Ｌ染毒组泥鳅肾脏ＳＯＤ活性略高于对照组，其余４个处理浓度ＳＯＤ活性均显著或极显著低于对照组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）；处理４８ ｈ后，各染毒组肾脏ＳＯＤ活性均极显著低于对照组（Ｐ＜０．０１）。可见，Ｃｕ２＋浓度对泥鳅肾脏ＳＯＤ活性没有明显的诱导作用，处理时间越长，ＳＯＤ活性越低。
　　２．２Ｈｇ２＋对泥鳅肝脏和肾脏SOD活性的影响
　　由图２可见，处理２４ ｈ，０．０５ ｍｇ／Ｌ染毒组泥鳅肝脏ＳＯＤ活性被诱导，但升高不显著（Ｐ＞０．０５）；而０．１０～０．２５ ｍｇ／Ｌ染毒组肝脏ＳＯＤ活性则均被抑制，其中０．２０和０．２５ ｍｇ／Ｌ染毒组ＳＯＤ活性被抑制达到极显著水平（Ｐ＜０．０１）。处理４８ ｈ，０．０５ ｍｇ／Ｌ染毒组泥鳅肝脏ＳＯＤ活性仍略高于对照组，但已呈下降趋势；０．１０～０．２５ ｍｇ／Ｌ染毒组肝脏ＳＯＤ活性均低于对照组，且０．１５～０．２５ ｍｇ／Ｌ ３个染毒组ＳＯＤ活性显著或极显著低于对照（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。处理７２ ｈ，各染毒组ＳＯＤ活性均被抑制（Ｐ＜０．０１）。总的来说，低浓度Ｈｇ２＋在短时间内对泥鳅肝脏ＳＯＤ活性具有一定诱导作用；高浓度的Ｈｇ２＋抑制泥鳅肝脏ＳＯＤ活性，且处理时间越长，抑制越明显。
　　处理２４ ｈ，０．０５ ｍｇ／Ｌ染毒组泥鳅肾脏ＳＯＤ活性略高于对照组（Ｐ＞０．０５），其余４个处理浓度ＳＯＤ活性均低于对照组，且０．１５～０．２５ ｍｇ／Ｌ ３个染毒组活性降低达到极显著水平（Ｐ＜０．０１）。处理４８ ｈ和７２ ｈ，０．１０～０．２５ ｍｇ／Ｌ ４个染毒组肾脏ＳＯＤ活性均极显著低于对照组（Ｐ＜０．０１），且均呈下降趋势。综上，Ｈｇ２＋对泥鳅肾脏ＳＯＤ活性没有明显的诱导作用；高浓度的Ｈｇ２＋抑制泥鳅肾脏ＳＯＤ活性，且处理时间越长，抑制越明显。
　　３讨论
　　ＳＯＤ广泛存在于生物体内，对生物体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用，其功能是将Ｏ２ˉ歧化为Ｈ２Ｏ２和Ｏ２，是生物体防御内、外环境中超氧离子对生物体侵害的重要酶，能够很灵敏地反映外界对生物体的损伤，ＳＯＤ清除Ｏ２ˉ的能力与ＳＯＤ的含量和相对活性有关。研究表明，在其耐性限度内，随着重金属离子浓度的增加，ＳＯＤ活性会被诱导；当超过它的耐性阈值时，ＳＯＤ的活性通常会受到抑制［８－１０］。
　　本实验表明，泥鳅肝脏、肾脏ＳＯＤ活性随重金属离子质量浓度和时间的变化表现出明显的时间和剂量效应。当Ｃｕ２＋质量浓度低于２．００ ｍｇ／Ｌ或Ｈｇ２＋的质量浓度低于０．１０ ｍｇ／Ｌ时，泥鳅肝脏ＳＯＤ活性被诱导；当Ｃｕ２＋的质量浓度低于１．００ ｍｇ／Ｌ或Ｈｇ２＋质量浓度低于０．０５ ｍｇ／Ｌ时，肾脏ＳＯＤ活性被诱导。肝脏或肾脏ＳＯＤ活性在高于以上质量浓度的染毒组中则受到抑制，抑制作用随着染毒时间的延长和浓度的增高而增强。低浓度的Ｃｕ２＋、Ｈｇ２＋胁迫时，ＳＯＤ活性出现一定的“毒物兴奋效应”［１１］，泥鳅体内产生过量的Ｏ２ˉ，诱导泥鳅ＳＯＤ活性提高；但当处理浓度过大，时间过长时，泥鳅体内产生大量的Ｏ２ˉ，超过泥鳅体的ＳＯＤ清除能力，就会对组织细胞造成损伤，影响泥鳅的正常生理活动，使ＳＯＤ活性降低和丧失，甚至导致细胞死亡。
　　比较Ｈｇ２＋和Ｃｕ２＋对泥鳅不同组织的ＳＯＤ活性的影响，在相同的处理时间，Ｈｇ２＋对同种组织ＳＯＤ活性的抑制作用强于Ｃｕ２＋，由此可初步判断，Ｈｇ２＋的毒性比Ｃｕ２＋的毒性大。但重金属对鱼类的毒性还受水环境中许多物理、化学以及生物因素的影响，包括ｐＨ、无机阴离子、水的硬度、其他金属离子、络合物等［１２，１３］，如水的硬度可以降低某些重金属的毒性；而在弱酸性条件下（ｐＨ值５～６），某些重金属的毒性会增强［１４］。在人工培养液或天然水体中，重金属的形态和数量都不是单一或固定不变的，重金属间还可能存在协同作用或拮抗作用。此外，不同的鱼类对金属离子的毒性反应程度可能有变化，在鱼生长的不同阶段和不同季节，ＳＯＤ的活性也会不一样，也不能排除鱼类本身体内含有多种重金属对实验结果造成的影响。
　　在各处理条件下，肝脏和肾脏ＳＯＤ活性对重金属离子敏感性存在一定的差异，表现在低浓度的Ｃｕ２＋（１．００ ｍｇ／Ｌ）和Ｈｇ２＋（０．０５ ｍｇ／Ｌ）胁迫下肝脏的ＳＯＤ活性被诱导程度大于肾脏，这表明，泥鳅肝脏中ＳＯＤ活性的敏感性高于肾脏。这可能是由于肾脏和肝脏的生理功能不同所致，肝脏是鱼体的主要解毒器官，能将进入体内的毒物在肝脏内氧化、还原或水解，将毒物转化成为无毒或低毒易溶的代谢物排出体外，该过程中会产生大量的Ｏ２ˉ，因而肝脏中ＳＯＤ的活性较高［１５］；而肾脏几乎没有解毒功能，因此其ＳＯＤ的敏感性要低得多。
　　
　　参考文献：
　　［１］ ＣＯＬＢＯＲＮ Ｔ，ＶＯＭ ＳＡＡＬ Ｆ Ｓ，ＳＯＴＯ Ａ Ｍ． Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ－ｄｉｓｒｕｐｔｉｎｇ ｃｈｅｍｉｃａｌｓ ｉｎ ｗｉｌｄｌｉｆｅ ａｎｄ ｈｕｍａｎｓ［Ｊ］． Ｅｎｖｉｒｏｎ Ｈｅａｌｔｈ Ｐｅｒ ｓｐｅｃｔ，１９９３，１０１（５）：３７８－３８４．
　　［２］ 贾秀英． 四种重金属对泥鳅幼鱼呼吸强度的影响［Ｊ］． 浙江大学学报（农业与生命科学版），２００１，２７（５）：５５６－５５８．
　　［３］ 朱毅，张瑞涛． 砷、铜、苯酚对鲤鱼（Ｃｙｐｒｉｎｕｓ ｃａｒｐｉｏ Ｌｉｎｎ．）的联合毒性研究［Ｊ］．应用与环境生物学报，２００１，７（３）：２６２－２６６．
　　［４］ ＺＥＮＧ Ｙ Ｗ，ＳＨＥＮ Ｓ Ｑ，ＬＩ Ｚ Ｃ，ｅｔ ａ１． Ｅｃｏｇｅｏｇｒａｐｈｉｃ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｓ ｏｆ ｉｎｄｉｇｅｎｏｕｓ ｒｉｃｅ（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．） ｉｎ Ｙｕｎｎａｎ， Ｃｈｉｎａ［Ｊ］． Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ａｎｄ Ｃｒｏｐ Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ，２００３，５０（６）：５６７－５７７．
　　［５］ 徐立红，张甬元，陈宜瑜． 分子生态毒理学研究进展及其在水环境保护中的意义［Ｊ］． 水生生物学报，１９９５，９（２）：１７１－１８５．
　　［６］ 周永欣，章宗涉． 水生生物毒性试验方法［Ｍ］． 北京：农业出版社，１９８９.７５－１５６．
　　［７］ ＳＴＥＷＡＲＴ Ｒ Ｒ Ｃ， ＢＥＷＬＥＹ Ｊ Ｄ． Ｌｉｐｉｄ ｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ ａｇｉｎｇ ｏｆ ｓｏｙｂｅａｎ ａｘｅｓ［Ｊ］． Ｐｌａｎｔ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，１９８０，６５（２）：２４５－２４８．
　　［８］ 赵元凤，吕景才，宋晓阳，等． 镉污染对鲢鱼超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性的影响［Ｊ］． 农业生物技术学报， ２００２，１０（３）： ２６７－２７１．
　　［９］ 焦传珍． 铈对镉染毒泥鳅肝胰脏中超氧化物歧化酶和过氧化物酶活性的影响［Ｊ］． 水产学报，２００９，２８（１２）：７８６－７８８．
　　［１０］ 李伟民，尹大强，胡双庆，等． 氯代硝基苯胺对鲫鱼（Ｃａｒａｓｓｉｕｓ ａｕｒａｔｕｓ）血清抗氧化酶的影响［Ｊ］． 环境科学学报， ２００２， ２２（２）：２３６－２４０．
　　［１１］ ＳＴＥＢＢＩＮＧ Ａ Ｒ Ｄ． Ｈｏｒｍｅｓｉｓ――ｔｈｅ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｒｏｗｔｈ ｂｙ ｌｏｗ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ［Ｊ］． Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｔｏｔａｌ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ， １９８２，２２（３）：２１３－２３４．
　　［１２］ 刘欣梅，项黎新，邵健忠， 等． 重金属诱导细胞凋亡的分子机制［Ｊ］． 细胞生物学杂志，２００４，２６（３）：２３５－２４０．
　　［１３］ 刘学忠，郑志高，王捍东， 等． 金属硫蛋白生物学功能研究进展［Ｊ］． 畜牧兽医杂志，２００４，２３（２）：１９－２１．
　　［１４］ 曹剑辉，马广智，方展强． 镉对草鱼鳃和肝组织超氧化物歧化酶的影响［Ｊ］． 水利渔业，２００４，２４（１）：９－１１．
　　［１５］ 赵红霞，周萌，詹勇，等． 重金属对水生动物毒性的研究进展［Ｊ］． 中国兽医杂志，２００４，４０（４）：３９－４１．
　　
　　注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文