HPLC法测定交通心肾胶囊中盐酸小檗碱含量 盐酸小檗碱怎么读
摘 要 目的：建立中成药交通心肾胶囊中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法：采用ODS C18色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 ?m），以乙腈-水（1 000 ml中含磷酸二氢钾3.4 g和十二烷基硫酸钠1.7 g）（3∶4）为流动相；流速1.0 ml/min，于345 nm波长处测定。结果：盐酸小檗碱在0.2～1.0 ?g范围内，均与相应的峰面积呈良好线性关系（r=0.999 8），平均回收率为101.30％，RSD为1.44％（n=6）。结论：该方法准确可靠，可用于本制剂的质量控制。
关键词 交通心肾胶囊 盐酸小檗碱 高效液相色谱法
中图分类号：O657.72；R927.2 文献标识码：A 文章编号：1006-1533(2012)17-0048-03
Determination of berberine hydrochloride in Jiaotongxinshen capsules by HPLC
GUO Gui-ling
(Shanghai Celgen Bio-Pharmaceutical Co., Ltd., Shanghai 201203, China)
ABSTRACT Objective：To establish an HPLC method for the determination of berberine hydrochloride in Jiaotongxinshen capsules. Methods：HPLC was performed on an ODS C18 column (150 mm×4.6 mm, 5 ?m) with mobile phase of acetonitrile-water (3 : 4) at flow rate of 1.0 ml/min and the detection wavelength of 345 nm. Results：The calibration curve for the determination of berberine hydrochloride was linear over the range of 0.2～1.0 ?g (r=0.999 8 ) and the average recovery was 101.30% (RSD=1.44%, n=6). Conclusion：The method is simple, rapid and accurate and can be used for quality control of Jiaotongxinshen capsules.
Key Word Jiaotongxinshen capsules; berberine hydrochloride; HPLC
中药复方制剂交通心肾胶囊由黄连，肉桂，益智，枸杞等13味中药材组成，具有交通心肾,补肾益精,精主安神的功效。用于心肾不交，肝肾阴虚所致的心悸不宁，虚烦不寐，多梦易醒，眩晕耳鸣，腰膝酸软，遇事善忘，五心烦热，神疲乏力，尿频等症。方中黄连为君药，其主要成分为盐酸小檗碱。目前其含量测定采用的是薄层色谱扫描法，但其样品处理时间较长，测定方法繁琐，重复性较差。采用HPLC法测定中成药中的盐酸小檗碱含量有较多文献报道[1-6]，为此，本文应用HPLC法[7]对交通心肾胶囊中盐酸小檗碱含量测定进行研究，以探索更加快捷，简便的质量控制方法。
1 仪器与试药
日本岛津公司LC-10 AVP高效液相色谱仪；德国赛多利斯BP211 D型电子分析天平；盐酸小檗碱对照品，批号：110713-200208（中国药品生物制品检定所）；交通心肾胶囊，规格：0.36 g/粒（上海××药业股份有限公司）；甲醇、乙腈均为一级色谱纯，其他试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
ODS C18色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 ?m）；流动相为乙腈-水（3∶4，1.0 L中含磷酸二氢钾3.4 g和十二烷基硫酸钠1.7 g）；检测波长为345 nm；流速1.0 ml/min；柱温：30 ℃；理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3 000。
2.2 对照品的制备
精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成0.05 mg/ml的对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备
取交通心肾胶囊内容物适量，混匀，精密称取0.36 g，置100 ml量瓶中，加入盐酸-甲醇（1∶100）约95 ml，60 ℃水浴加热15 min，取出，超声处理30 min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45 ?m滤膜过滤，即得。
2.4 线性关系的考察[8]
精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液4，8，12，16，20 ?l依次进样，按上述色谱条件测定，以进样量（X）对峰面积（Y）进行回归，求得回归方程为Y=4.2389 X+0.0146，r=0.999 8，表明盐酸小檗碱在0.2～1.0 ?g之间的线性关系良好(图1)。
2.5 阴性对照试验
取缺黄连的群药按其质量标准制备阴性对照品，依样品测定项下的方法测定，结果在盐酸小檗碱对照品（图2）吸收峰位置处无干扰（图3）。
2.6 精密度试验
精密吸取对照品溶液10 ?l重复进样5次，盐酸小檗碱对照品面积平均值为2 040 518，RSD为0.30%（表1）。
2.7 稳定性试验
取供试品溶液常温放置，分别在0，0.5，1，3，6 h测定，结果平均峰面积为1 991 844，RSD为0.33%（表2）。
2.8 重复性试验
取同一样品，精密称取6份，按供试品溶液制备方法处理并测定，结果盐酸小檗碱的平均含量为12.29 mg/g，RSD为2.39%（表3）。