玫瑰精油 提取工艺研究:玫瑰精油提取工艺
玫瑰精油的化学成分及其抗菌活性
摘 要 通过水蒸汽同步蒸馏法提取玫瑰精油,采用GC-MS方法分析了玫瑰精油的化学组成,共鉴定出其中14个化学成分并测定其相对含量,占总含量的95.25%。香茅醇为玫瑰精油的主要成分,相对含量为90.37%。体外抑菌实验表明,玫瑰精油除对黑曲霉没有抗菌活性外,对其它7种供试菌均具有不同程度的抑制作用,其中对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的最小抑菌浓度（MIC）为0.063% （v/v），对枯草芽孢杆菌、变形杆菌和白色念珠菌的最小抑菌浓度（MIC）为0.125% （v/v），而对绿脓杆菌（Pseudomonasaeruginosa）的抗菌活性相对较弱, M I C为0.5%（v/v）。抑菌直径结果也表明了玫瑰精油除对黑曲霉、绿脓杆菌的抗菌活性较弱外,对其它6种菌株的抑菌直径都大于8.5mm。考察了玫瑰精油对3种敏感菌株包括金黄色葡萄球菌（革兰氏阳性菌）、大肠杆菌（革兰氏阴性菌）和白色念珠菌（真菌）的杀菌动态过程,为玫瑰精油的应用提供了理论依据。
关键词 玫瑰精油;成分;抗菌活性
1玫瑰精油的化学组成
天然玫瑰的精油组成十分复杂,主要成分是单萜类化合物,如香叶醇、香茅醇、芳樟醇等,玫瑰醚、倍半萜烯、倍半萜含氧化合物也占相当比例,其它的化合物有庚醛、乙醇、烷烃系列( C 1 7 ~ C 2 7 ) (玫瑰油石蜡烃的主要成分)等[ 1 ]。而这些化学成分含量的多少及化学成分上的差异,造成这些玫瑰油香气的微妙差异[ 2 ]。总的说来,香茅醇、香叶醇、B- 2苯乙醇和橙花醇与它们的酯类是构成玫瑰花香的基本成分,是玫瑰的主体香气成分。
2玫瑰精油的提取和分离
玫瑰油的生产工艺主要有水蒸气蒸馏法,有机溶剂浸提法、超临界二氧化碳萃取法和分子蒸馏法等玫瑰油称为/液体黄金0,是玫瑰花的提取物。玫瑰精油在食品、化妆品、医药、保健品等领域具有重大的应用价值和经济价值,因此其提取被广泛地研究。
1玫瑰精油的化学组成
天然玫瑰的精油组成十分复杂,主要成分是单萜类化合物,如香叶醇、香茅醇、芳樟醇等,玫瑰醚、倍半萜烯、倍半萜含氧化合物也占相当比例,其它的化合物有庚醛、乙醇、烷烃系列( C 1 7 ~ C 2 7 ) (玫瑰油石蜡烃的主要成分)等[ 1 ]。而这些化学成分含量的多少及化学成分上的差异,造成这些玫瑰油香气的微妙差异[ 2 ]。总的说来,香茅醇、香叶醇、B- 2苯乙醇和橙花醇与它们的酯类是构成玫瑰花香的基本成分,是玫瑰的主体香气成分[ 1 ]。但玫瑰精油抗菌活性目前国内未见
文献报道,本研究通过玫瑰精油对8种菌株的抑菌直径、M I C、M B C的测定以及杀菌动态研究,揭示了玫瑰精油具有很好的抗菌活性,为玫瑰精油作为细菌感染性疾病的选择性用药,同时也为玫瑰精油的综合开发利用提供了科学依据。
1仪器和材料
1.1主要仪器
DL2CJ22N超净工作台,LDZX240BN立式自动电热压力蒸汽灭菌器, DPX-9082B-Z恒温培养箱,英国VG platformII,气质联用仪。
1.2实验材料与试剂
牛肉膏、蛋白胨、琼脂等皆为生化试剂。其它试剂均为分析纯试剂。
1.3 玫瑰的来源
玫瑰购自三圣乡花卉市场。
1.4 菌种及培养条件
表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis，缩写为S.e以下同)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,S.a)和枯草芽孢杆菌
(Bacillussubtiliis,B.s),大肠杆菌(Escherichiacoli,E.c)绿脓杆菌
(Pseeudomonaseruginosa,P.a)、变形杆菌(Proteusvulgaris,P.v)、白色念珠菌
(Candidaalbicans,C.a)和黑曲霉(Aspergillusnigar,A.n)均接种于中科研 微生物研究所。前3种为革兰氏阳性菌,大肠杆菌、绿脓杆菌和变形杆菌为革兰氏阴性菌,后2种为真菌。除黑曲霉需用察氏培养基于28℃培养5d外,其余菌种均于营养琼脂培养基在37℃培养24h。
2 试验方法
2 . 1 菌悬液的制备[7]
将上述供试菌种用适宜的培养基斜面活化后,用
液体培养基制成含菌量约为1 05c f u#m L- 1菌悬液。
2 . 2 精油提取与含量测定
采用水蒸气同步蒸馏法提取精油。玫瑰花碾
碎后加水沸蒸回流3 h。所得精油用无水硫酸钠脱
水,过滤后量取体积。取适量精油用正己烷溶解稀
释为体积分数0 . 1 %用于气质联用分析。样品测
定前置于- 2 5e下密封贮存[ 8 ]。
2 . 3 G C - M S分析方法[9]
气相色谱条件:色谱柱D B - 5 ( 3 0 m@0 . 2 5 m m
@0 . 2 5Lm ) ,进样口温度2 6 0e,柱温6 0e~
2 2 0e。升温程序:起始温度6 0e,以1 5e/ m i n升
温至1 6 0e,再以5e/ m i n升温至2 5 0e,维持2
m i n。汽化室温度2 5 0e,气质接口温度2 8 0e。进
样量1LL ,分流比3 0B1 ;载气为氦气,纯度
9 919 9 % ,流速1 . 2 m L#mi n- 1。
质谱条件:离子源为E I源,电子能量7 0 e V ,离子
源温度2 3 0e,四极杆1 5 0e,扫描范围3 0 ~ 5 0 0 a m u。
经谱库检索并与保留时间相结合鉴定精油各
组分峰,并对色谱峰用面积归一化法进行定量,计
算各组分的相对含量。
2 . 4 抗菌活性实验
2 .4 . 1 琼脂扩散法
抑菌直径的测定采用琼脂扩散法[ 1 0 , 1 1 ]。用无
菌棉签蘸取1 08c f u#m L- 1的试验菌悬液,在营养
琼脂平板表面均匀涂抹3次,然后绕平板边缘涂抹
一周,盖好表面皿, 4e冰箱保存5 m i n ,滤纸片(用
打孔器将滤纸制成直径为6 . 0 m m的小圆纸片)
1 6 0e干热灭菌2 h ,平放于无菌平皿内,每片滴加
5LL的玫瑰精油,室温自然晾干,用无菌镊子取样
片轻轻贴放于平板表面,每个平板贴2片试验样片,
1片无菌生理盐水对照片。放于培养箱内培养,黑
曲霉在2 8e温度下培养5 d ,其它菌株均在3 7e培
养2 4 h。测量抑菌圈直径大小,实验重复3次。
2 .4 . 2 微量肉汤稀释法
M I C及M B C的测定采用微量肉汤稀释
法[ 1 0 , 1 1 ]。M I C ( M i n i m a l I n h i b i t o r y C o n c e n t r a t i o n )为
最小抑菌浓度,即药物与一定浓度的菌液作用后,
能够抑制可见菌生长的最低浓度, M B C ( M i n i m a l
4 8 94期李玉杰等:玫瑰精油的化学成分及其抗菌活性
参考文献